Лабораторная работа № 7.3 Определение количества гемоглобина в крови по методу Сали
Цель работы: знакомство с классическим методом определения
количества гемоглобина.
Приборы и материалы: исследуемая кровь, гемометр Сали, 0,1 Н раствор соляной кислоты, дистиллированная вода, спирт, вата, груша.
Объект исследования: человек.
Метод основан на колориметрическом принципе. При смешивании крови с соляной кислотой гемоглобин превращается в солянокислый гематин, имеющий коричневый цвет. Полученную смесь разводят дистиллированной водой до цвета раствора в стандартных пробирках находящихся в крайних отсеках гемометра. Этот раствор имеет интенсивность окраски, соответствующую содержанию гемоглобина, равному 166,7 г/л.
Рис. 15. Гемометр Сали
Ход работы
1. В градуированную пробирку гемометра наливают до первой метки 0,1 Н раствор соляной кислоты.
2. Капиллярной пипеткой набирают кровь точно до метки 0,02 мл и осторожно выдувают ее на дно пробирки. Не вынимая пипетку из пробирки, промывают ее соляной кислотой. Встряхивая пробирку, тщательно перемешивают ее содержимое. Для завершения реакции смеси дают постоять не менее пяти минут.
3. Специальной пипеткой прибавляют к смеси по каплям дистиллированную воду, перемешивая содержимое палочкой. Это продолжают до тех пор, пока цвет исследуемой жидкости не сравняется с окраской стандартного раствора.
4. Отмечают по шкале, на каком делении стоит уровень верхнего края мениска полученного раствора солянокислого гематина. Чтобы выразить результат в системе СИ (г/л), умножают найденную цифру на 10.
Возможные источники ошибок:
а) выцветшие стандартные растворы в старых гемометрах;
б) неточное соблюдение пятиминутной выдержки перед началом разведения (гематиновая окраска со временем усиливается);
в) попадание воздуха в капилляр с кровью.
Рекомендации к оформлению
В заключении следует указать, соответствует ли норме найденное количество гемоглобина.
Лабораторная работа № 7.4 Вычисление цветового показателя
Цель работы: научиться рассчитывать цветовой показатель крови.
Ход работы
Величина 33,4 пг, представляющая собой условное нормальное содержание гемоглобина в одном эритроците, принимается за единицу и обозначается цветовым показателем (ЦП). На величине цветового показателя основана клиническая классификация анемий: пригипохромной анемии ЦП ниже 0,85, при нормохромной ЦП=0,85-1,05, при гиперхромной ЦП больше 1,05.
Цветовой показатель рассчитывают по формуле:
ЦП = Гф / Гн : Эф / Эн, где
Гф – найденное (фактическое) количество гемоглобина в г/л;
Гн – условное нормальное количество гемоглобина в крови человека (166,7 г/л);
Эф – найденное (фактическое) количество эритроцитов;
Эн – условное нормальное количество эритроцитов (5·1012/л).
Рекомендации к оформлению
В протокол необходимо записать формулу и результаты расчета ЦП.
В заключении следует указать на степень соответствия полученных результатов нормальным величинам.
Лабораторная работа № 7.5
Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ)
по методу Панченкова
Цель работы: знакомство с методикой определения СОЭ.
Материалы и оборудование: исследуемая кровь, прибор Панченкова, часовое стекло, 5%-ный раствор лимоннокислого натрия, спирт, вата.
Объект исследования: человек.
Ход работы
1.Промывают капилляр Панченкова 5 %-ным раствором лимоннокислого натрия. Набирают в пробирку раствор до метки «50» (Р) и выдувают его на часовое стекло.
2. Дважды набирают в капилляр кровь до метки «0» (К). Кровь выдувают на часовое стекло в каплю раствора лимоннокислого натрия, каждый раз тщательно смешивая ее с раствором путем выдувания через капилляр воздушной струи, направленной на смесь крови с цитратом.
3. Промывают капилляр раствором лимоннокислого натрия, заполняют капилляр полученной цитратной кровью точно до метки «0» (К) и помещают в штатив строго вертикально.
4. Через один час определяют, на сколько миллиметров осели эритроциты, и результаты вносят в протокол.
Рекомендации к оформлению
В заключении следует указать, соответствует ли полученный результат данным, характеризующим СОЭ здорового человека.