Лабораторная работа № 7.2 Подсчёт форменных элементов крови

Цель работы: ознакомиться с основными принципами подсчёта эритроцитов и лейкоцитов в камере Горяева.

Материалы и оборудование: микроскоп, счётная камера с сеткой Горяева, смесители для эритроцитов и лейкоцитов, фильтровальная бумага, 3% раствор поваренной соли, 3% раствор уксусной кислоты, подкрашенной метилвиолетом, спирт, эфир, йод, вата.

Объект исследования: человек.

Рис. 14. Камера Горяева

Ход работы

Подсчёт форменных элементов производится с применением счётной камеры и сетки Горяева. Счётная камера представляет собой утолщённое предметное стекло, на поверхности которого четырьмя желобками образованы три узкие площадки. Средняя площадка разделена пополам бороздкой, по обеим сторонам от которой нанесена сетка Горяева, состоящая из 225 больших квадратов, из которых 25 квадратов разделены ещё на 16 малых квадратов.

При подсчёте форменных элементов крови пользуются правилом Егорова, согласно которому, эритроциты в малых, а лейкоциты в больших квадратах причисляются к данному квадрату только те, которые находятся внутри квадрата и на его верхней и левой разграничительной линиях. На участок камеры, где нанесены сетки, необходимо уложить обезжиренное покровное стекло и притирать его к поверхности до появления цветных колец Ньютона.

Подсчёт количества эритроцитов

Набрать кровь в смеситель для эритроцитов до метки 0,5. При этом следует следить, чтобы в капилляр не попали пузырьки воздуха. Избыток крови удалить фильтровальной бумагой. После чего кончик смесителя погрузить в приготовленный заранее флакон с 3% раствором поваренной соли и насасывать раствор, заполняя всю ампулу до метки 101. Тотчас снять резиновую трубку, зажать смеситель по длине между большим и указательным или средним пальцем и встряхивать в течение 3 минут. После чего слить 1-2 капли раствора, а остальным раствором заполнить сетку. Поместить камеру Горяева под малое увеличение микроскопа и подсчитать количество эритроцитов в 5 больших квадратах (80 малых). Вычислить количество эритроцитов (Э) в 1 л крови по формуле:

Э = N х 4000 х 200 х 10⁶

80

где: N – количество эритроцитов в пяти больших квадратах; 4000 – множитель, приводящий объём малого квадрата к объёму 1 мкл крови; 200 – поправка на степень разведения крови; 80 – количество малых квадратов, в которых был произведён подсчёт; 10⁶ – количество микролитов в 1 л.

Подсчёт количества лейкоцитов

Набрать кровь в смеситель для лейкоцитов до метки 0,5. Немедленно добавить к крови разбавляющий раствор 3% уксусной кислоты до метки 11. Тщательно перемешать содержимое капилляра и снова заполнить им камеру Горяева. Подсчёт проводят не менее чем в 100 больших квадратах. Это большие неразлинованные квадраты, которые в сетке камеры Горяева сгруппированы по четыре. Вычислить количество лейкоцитов в 1 л крови по формуле:

Л = N х 4000 х 20 х 10⁶

1600

где: N – количество лейкоцитов в ста больших квадратах; 4000 – множитель, приводящий объём малого квадрата к объёму 1 мкл крови; 20 – поправка на степень разведения крови; 1600 – количество лейкоцитов в малых квадратах; 10⁶ – количество микролитов в 1 л.

Рекомендации к оформлению

В заключении сравнить полученные результаты с нормальными значениями.