4). Провели серию серологических реакций для идентификацию чистой культуры. Оцените результат ра на стекле с агглютинирующими сыворотками:

Этап №1

	Агглютинация
Смесь агглютинирующих сывороток к Shigella sonnei и Shigella flexneri
Смесь агглютинирующих сывороток к другим видам шигелл
Контроль физ.р-р

Этап №2

	Агглютинация
Агглютинирующая сыворотка к Shigella sonnei
Агглютинирующая сыворотка к Shigella flexneri
Контроль физ.р-р

Вывод _________________________________________________

Укажите окончательный этап диагностики_________________________________

Задание 4. Задача. Бактериологическая диагностика брюшного тифа и паратифов.

В бактериологическую лабораторию поступил материал от больного с подозрением на дизентерию. В анамнезе: повышение температуры до 38-39°С, выраженная слабость, анорексия, головная боль, диарея. Язык утолщен, обложен серо-коричневатым налетом, с отпечатками зубов по краям. Увеличены печень и селезенка. На коже верхних отделов живота и нижних отделов грудной клетки обнаружена сыпь, число ее элементов 5-6, по характеру розеолезная.

1). Укажите какой материал можно взять на исследование_____________________________

____________________________________________________________________________

2). Оцените результат посева на среду Эндо_____________________________________

результат посева на среду с глюкозой и 10% желчи ______________________________

результат посева на среду Вильсона-Блера:_____________________________________

3). Определяли биохимические свойства выделенной культуры:

Подвиж- ность (0,3% агара)	Среда Олькеницкого				Ман- нит	Цитрат Сим- монса	Мало- нат	Фенил-аланин	Жела-тина	Лизин
	Глю- коза	лак- тоза	моче- вина	H2S
+/-	_г				кг	+	-	-	-	+

Сравните полученные данные с таблицей (см. задача 1) и определите род микроорганизма-возбудителя заболевания______________________________________

4).С целью серодиагностики поставлена реакция Видаля. Реакция Видаля — реакция агглютинации, применяемая для диагностики брюшного тифа и некоторых тифо-паратифозных заболеваний. К различным разведениям сыворотки крови больного добавляют смыв культур возбудителя (брюшного тифа, паратифов) или диагностикумы — стандартные растворы антигенов. После выдерживания в термостате наступает агглютинация в виде зерен, хлопьев, выпадающих в осадок.

Диагностикум	Разведения сыворотки				Контроль
	1:100	1:200	1:400	1:800	Диаг.	Сыв.
Брюшнотифозный О-монодиагностикум
Брюшнотифозный Н-монодиагностикум
Паратифозный А ОН-диагностикум
Паратифозный В ОН-диагностикум

Вывод________________________________________________

Агглютинины к возбудителям брюшного тифа и паратифов обнаруживают в сыворотке крови, начиная с 8-10 дня заболевания и позднее. Динамика их накопления весьма своеобразна: сначала появляются антитела к О-антигену, но их титр быстро уменьшается после выздоровления. Н-и Vi-антитела появляются позже, но с годами сохраняются в высоких титрах после болезни, прививок и у бактерионосителей. В этой связи для правильной оценки серологической реакции важно одновременно обнаруживать все типы агглютининов. Для постановки реакции агглютинации Видаля необходимо три компонента: 1) антитела (сыворотка больного), 2) антиген (бактериальный или эритроцитарный диагностикум), 3) 0,85% раствор хлорида натрия (электролит). Для получения сыворотки у больного из вены, пальца или мочки уха в стерильную пробирку берут 2-3 мл крови, ставят ее в термостат на 30 мин для свертывания. Образовавшийся сгусток обводят пастеровской пипеткой, отделяя его от стенок пробирки, помещают на 30-40 мин в холодильник, отсасывают сыворотку и делают ее рабочее разведение 1:50. Затем в шести параллельных рядах пробирок делают следующие разведения сыворотки от 1:100 до 1:1600 по стандартной схеме. В качестве антигенов для реакции агглютинации используют брюшнотифозные монодиагностикумы О9 и Hd, а также паратифозные О-и Н-диагностикумы. Они являются 3-х млрд взвеси указанных бактерий, убитых нагреванием или формалином. О-диагностикумы готовят кипячением культур или обрабатывают их спиртом, Н-диагностикумы - обработкой культур формалином. Окончательный учет проводят через 18-20 ч нахождения пробирок при комнатной температуре. При положительной реакции агглютинации образуется белесый осадок на дне пробирки с более-менее прозрачной жидкостью над ним. При отрицательной реакции жидкость остается мутной, осадок на дне пробирки отсутствует. Агглютинацию считают специфической, когда в контрольных пробирках (КС и КД) аглютинат не образуется. При типичной клинической картине брюшного тифа диагностическим титром реакции Видаля у больных, не прививались, считают разведение 1:100 и выше, при атипичных или стертых формах заболевания - не ниже 1:200. В последнее время реакции Видаля не считают очень специфической. Она может быть положительной и при других заболеваниях, сопровождающихся лихорадкой, после прививки или ранее перенесенной болезни и т.п.. И все же высокая специфичность реакции может быть обнаружена при ее постановке в динамике методом парных сывороток. Ни анамнестические, ни прививочные или групповые антитела не покажут нарастание титра со второй сывороткой, взятой через 10-12 дней.