7. Диссоциация и агрегация клеток.

Новейшие методы изучения растущих тканей основаны на диссоциации клеток, для чего можно использовать слабые растворы некоторых ферментов, например, трипсина, разрушающего материал, который соединяет клетки друг с другом. Диссоциированные клетки тщательно перемешивают, а затем выращивают на культурных средах в таких условиях, чтобы они могли свободно перемещаться и воссоединяться друг с другом. Подобного рода работы показали удивительную способность диссоциированных клеток вновь объединяться с клетками своего типа, а иногда даже образовывать такие сложные тканевые комплексы, как определенные части мозга.

Существует несколько основных точек зрения на механизмы агрегации клеток как in vitro, так и in vivo. Согласно одной из них в агрегации клеток участвует особые внутриклеточные соединения, называемые лигандами. Другие исследователи отводят главную роль физическим свойствам плазматической мембраны, которые различны у разных клеток. Следует отметить, что за последнее время уделяется все больше внимания выяснению свойств плазматической мембраны и её роли в процессах развития. Для изучения данной проблемы используют лектины – природные растительные соединения, которые избирательно связываются с определенными углеводными цепями, выступающими над поверхностью плазматической мембраны. Эти и другие исследования показывают, сколь важную роль играет плазматическая мембрана в ассоциации клеток сходных типов или же в разделении групп несходных клеток.

7. Биохимические методы.

В число этих методов, используемых для изучения клеточных и тканевых систем зародышей, входят почти все методы, которые в настоящее время используют в биохимии, а потому хочу ограничиться лишь перечислением из основных групп:

а) химические методы, которые являются самыми сравнительно старыми методами, предназначенные для определения наличия или отсутствия в исследуемом материале тех или соединений и их количеств. При исследовании метаболических особенностей зародышей часто проводят анализ активности ферментов.

б) хромотография на бумаге;

в) электрофорез – оба эти метода используют при изучении зародышей как методы разделения.

г) центрифугирование растворов или гомогенатов тканей также относят к методам разделения.

Для выявления определенных типов нуклеиновых кислот предложен ряд высокоспециализированных методов. Эти методы основаны на гибридизации специфических молекул ДНК или РНК с комплиментарными молекулами. Подобные методы оказались чрезвычайно ценными для установления наличия или отсутствия различных специфических молекул нуклеиновых кислот в клетках зародыша.

7. Методы облучения.

В некоторых экспериментах пучок рентгеновских лучей направляют на небольшой участок зародыша с тем, чтобы вызвать поражение определенной структуры или инактивировать ту или иную группу клеток. Иногда с этой целью применяют облучение ультрафиолетом или при помощи лазерных пучков. Точность методов с использованием лазерных пучков такова, что можно разрушить небольшие участки отдельных хромосом.