1.3.2 Вибір оптики, підготовка мікроскопа до роботи, рекомендована послідовність виконання мікроструктурних досліджень

Для правильного вибору об’єктиву та окуляру для проведення мікроструктурних досліджень, необхідно виконати три кроки. По-перше, визначити необхідне доцільне збільшення. По-друге, знайти значення числової апертури об’єктиву та обрати з наявних той, числова апертура якого задовольняє умовам. По-третє, знайти необхідне збільшення окуляра.

Окрім величини розподільної здатності якість зображення мікроструктури визначається глибиною різкості, яскравістю, контрастністю зображення.

Глибина різкості – здатність приладу давати сфокусоване зображення виступів та впадин на поверхні об’єкту одночасно. Вона залежить від характеристик об’єктиву (оборотно пропорційна його числовій апертурі А й прямо пропорційна фокусній відстані f_об) та від розкриття апертурної діафрагми.

Контрастність зображення характеризується відношенням різниці яскравостей об’єкту й фона до їх суми. Вона залежить від якості підготовки об’єкту, розкриття польової діафрагми, способу освітлення, світла, що використовується та інших спеціальних способів підсилення контрасту.

Яскравість зображення визначається (окрім конструктивних особливостей мікроскопу) інтенсивністю світлового потоку від освітлювача та розкриттям апертурної діафрагми.

З всього вищесказаного виходить, що всі три параметра якості зображення можуть регулюватися шляхом налаштування апертурної та польової діафрагми й вибором способу освітлення.

При налаштуванні апертурної діафрагми необхідно кольорову окантовку, що виникає за рахунок хроматизму колекторної лінзи вивести за межі отвору діафрагми. При налаштуванні польової діафрагми необхідно розкрити її так, щоб її зображення співпало з полем зору окуляру, або трохи перекривало його.

Після того як оптика підібрана й встановлена в мікроскоп, а діафрагми налаштовані, на предметному столику закріплюють підготовлений мікрошліф, вмикають освітлювач та за допомогою макро- та мікрогвинтів фокусують зображення.

Рекомендується така послідовність при дослідженні мікроструктури зразка:

1. Підготовлений мікрошліф необхідно роздивитися при невеликому збільшенні мікроскопа (×70–100) для того, щоб мати уявлення про однорідність його структури та обрати ділянки для подальшого детального дослідження. Для цього макрометричним гвинтом предметний столик піднімають до упора та вставляють в ілюмінаторний тубус обраний об’єктив. В тубус вставляють обраний окуляр.

2. Дослідження при середніх (~×400) та великих (~×800) збільшеннях виконують після ретельного налаштування апертурної й польової діафрагм та виборі об’єктиву застосовуючи режим світлого поля.

Внаслідок того, що при зростанні збільшення мікроскопа величина поля зору скорочується, то для отримання достовірної інформації дослідження структури потрібно виконувати в декількох полях зору (5-10 різних). Це особливо важливо, якщо попередній аналіз виявив неоднорідності будови зразка. Для зручності підбору необхідної оптики, в табл. 1.3 наведені збільшення мікроскопу, які будуть забезпечуватися при використанні відповідного комплекту «об’єктив – окуляр».

Таблиця 1.3 – Збільшення мікроскопа та поле зору в площині об’єкту при візуальному спостереженні

Об’єктиви	Окуляри
	12,5х		15х		20х
	Збіль-шення	Поле зору	Збіль-шення	Поле зору	Збіль-шення	Поле зору
F=23,2 A=0,17	100	1,9	130	1,3	170	1,0
F=8,2 A=0,37	300	0,6	370	0,5	490	0,4
F=6,3 A=0,65	400	0,5	490	0,3	650	0,3
F=4,8 A=0,95	580	0,3	700	0,2	930	0,2

3. Для підсилення контрасту зображення та виявлення дрібних деталей структури використовують спеціальні методи світлової мікроскопії – темнопольного освітлення, поляризованого чи косого освітлення, тощо.

4.Для прибирання з зображення всіх кольорів, що виникають внаслідок нескоригованості об’єктива, застосовують жовто-зелений світлофільтр. Максимальну контрастність зображення забезпечує світлофільтр, колір якого доповнює колір поверхні зразка. Фокусування мікроскопу потрібно виконувати з тим світлофільтром, з яким буде досліджуватися мікроструктура.

5. Фотографування мікроструктури виконують як в окремих полях зору, так й панорамним методом, коли окремі поля перекриваються. Перед фотографуванням необхідно перевірити рівномірність освітлення поля та точність фокусування зображення на екрані чи в фотокамері.