54. Определение цитоза ликвора. Клеточные элементы ликвора в норме и при патологии.

Определение цитоза. Для получения точного результата необходимо подсчитать общее количество клеток в ликворе не позднее 30 мин после его извлечения. Установлено, что разрушение эритроцитов, лейкоцитов и тканевых клеточных элементов происходит из-за низкого содержания белка в ликворе, который оказывает стабилизирующее действие на клеточные мембраны. Кроме того, в целях избежания возможной примеси "путевой" крови для цитологического исследования рекомендуется брать вторую или третью пробирку полученного ликвора.

В нормальном ликворе взрослого человека практически отсутствуют клеточные элементы: в вентрикулярном ликворе 0-1 клетка/мкл, в субокципитальном - 2-3 клетки/мкл и люмбальном ликворе 3-5 клеток/мкл. Содержание клеток в нормальном ликворе уменьшается в направлении от люмбального к субокципитальному, а в вентрикулярном - почти равно нулю.

У доношенных и недоношенных новорожденных количество лейкоцитов практически одинаковое - от 0 до 32-106/л (Цветанова Е.М., 1986). Увеличение количества клеток в ликворе (плеоцитоз) рассматривают как признак органического поражения центральной нервной системы (ЦНС), хотя некоторые заболевания ЦНС протекают при нормальном количестве клеток - нормоцитозе.

Плеоцитоз считается:

слабым или легким, если количество клеток в люмбальном ликворе колеблется от 6 до 70 x 106/л (0,006-0,07-109/л);

умеренным - от 70 до 250 x 106/л (0,07-0,250 x 109/л);

выраженным - от 250 до 1000 x 106/л (0,250-1,0 x 109/л);

резко выраженным - более 1000 x 106/л (более 1 x 109/л);

массивным - более 10 x 109/л.

Частые люмбальные пункции и пневмоэнцефалография могут вызвать увеличение количества клеток в ликворе.

55. Методы исследования (культуральный, микроскопия, иммунологический) микозов. Примеры.

При выделении культур грибов используют среды с кислым рН, на которых рост бактерий затруднён. Чаще всего используют среду Сабуро (пептонный агар с большим содержанием мальтозы или глюкозы). Для придания питательным средам селективных свойств в них добавляют антибиотики (пенициллин, стрептомицин, гентамицин, левомицетин). Обычно делают парные посевы (при 25°С и 37°С) для выявления возможного диморфизма. Идентификацию возбудителя проводят по морфологическим и биохимическим признакам. Культуральный метод диагностики микозов требует для своего осуществления нескольких недель.

Иммунологические методы при диагностике микозов используют для обнаружения антител или антигенов возбудителя, а также для выявления состояния специфической сенсибилизации.

К результатам серологических реакций при микозах следует относиться осторожно, так как грибы содержат большое количество перекрёстно реагирующих антигенов. Тем не менее обнаружение специфических антител в сыворотке крови или антигенов возбудителя в крови, ликворе и моче позволяет установить диагноз до получения результатов посевов. Чаще используется латекс-агглютинация (выявляет IgM), РСК (выявляет IgG) и ИФА.

Микроскопия является одним из основных методов выявления возбудителя при микозах.Часто прибегают к микроскопии неокрашенных препаратов. Микроскопия методом раздавленной или висячей капли позволяет выявить структуры грибов в клинических образцах жидкой консистенции. Для визуализации структур возбудителя в фрагментах кожи, ногтях, волосах и других клинических образцах с большим количеством клеток, содержащих кератин, исследуемый материал предварительно обрабатывают 10% КОН. Едкий кали разрушает кератин, оставляя неизменёнными клетками грибов.