50. Приготовление каловой эмульсии, препаратов для исследования. Микроскопическое исследование кала. Элементы кала, выявляемые при микроскопии в норме и при патологии, клиническое значение.

Копрологическое исследование позволяет оценить:

1. Ферментативную активность и переваривающую способность желудка и кишечника

2. Нарушение секреторной функции поджелудочной железы

3. Наличие воспалительных процессов органов желудочно-кишечного тракта

4. Эвакуаторную функцию желудка и кишечника

5. Нарушение процессов желчеобразования и желчеотделения

6. Наличие яиц гельминтов, цист и вегетативных форм простейших

Макроскопическое исследование. В процессе исследования оценивается :

• Количество

• Форма

• Консистенция

• Цвет

• Запах

• Наличие остатков непереваренной пищи

• Наличие слизи, крови, гноя

приготовление каловой эмульсии:

1. Небольшое количество фекалий (образец материала размером с лесной орех) поместить в

центрифужную пробирку.

2. Добавить постепенно воду или физиологический раствор из расчета 1:2 или 1:8(в зависимости от консистенции).

3. Растереть стеклянной палочкой до консистенции «густого сиропа».

Приготовление препаратов для микроскопии

На широком предметном стекле готовятся 4

микропрепарата.

I Микропрепарат.

На предметное стекло наносится капля каловой эмульсии и накрывается покровным стеклом. В этом препарате обнаруживают:мышечные волокна, соединительную ткань, клетчатку, остатки жира, слизь, клеточные элементы (лейкоциты, эпителий), кристаллы, яйца гельминтов, цисты и вегетативные формы простейших.

II Микропрепарат.

На предметное стекло наносится капля каловой эмульсии и капля раствора Люголя. Капли осторожно перемешиваются стеклянной палочкой и накрывают покровным стеклом. Этот препарат предназначен для выявления • крахмала,• нормальной и патологической йодофильной флоры.

III Микропрепарат.

На предметное стекло стеклянной палочкой наносится капля каловой эмульсии и капля судана III (или 30% уксусной кислоты в зависимости от используемого метода). Материал перемешивается, накрывается покровным стеклом. Препарат предназначен для обнаружения жирных кислот и солей жирных кислот (мыл).

IV Микропрепарат.

На предметное стекло также наносится капля каловой эмульсии и капля 0,5% водного раствора метиленовой сини. Материал перемешивается, накрывается покровным стеклом. Препарат необходим для дифференцировки капель нейтрального жира и жирных кислот.

51. Химическое исследование кала. Лабораторные методы выявление скрытого кровотечения.

Химическое исследование Включает:

• Определение рН

• Выявления скрытого кровотечения

• Выявления скрытого воспалительного процесса

• Определения белка

• Определения билирубина

Для проведения химического исследования фекалий возможно использование диагностических

реагентных полосок. Приготовленная из материала обследуемого эмульсия наносится стеклянной

палочкой на уголок реагентного поля. После нанесения капли эмульсии наблюдается изменение или появление окраски реагентного поля. По истечении времени, указанного в инструкции к тесту, сравнивается окраска реагентной зоны со шкалой на этикетке контейнера.

рН фекалий здорового человека при смешанном рационе

питания нейтральная или слабощелочная (6,8-7,6).

Патологические варианты:

1. Кислая реакция (рН 5,0-6,50)

2. Резко кислая (рН 5,0-5,5)

3. Щелочная (рН 8,0-10.0)

Билирубин – присутствует в исследуемом материале, полученном только от детей в возрасте 3-6 месяцев; у детей более старших возрастных категорий и взрослых не обнаруживается.

Кровь – реакция на кровь в каловых массах здорового человека отрицательная. Наличие положительной реакции обусловлено кровотечением из различных отделов желудочно-кишечного тракта (пищевода, желудка, кишечника при полипозе, язвенном колите, злокачественных новообразованиях)

Для исследования на скрытую кровь можно использовать иммунохроматографические тесты, которые:

• Обладают высокой чувствительностью и абсолютной специфичностью к гемоглобину человека

• Не реагируют на присутствие железосодержащих препаратов

• Не требуют предварительной подготовки обследуемого

• Обеспечивают точный результат за непродолжительное время (10-15 мин)

• Содержат контроль процедуры анализа

• Не требуют дополнительного приборного обеспечения

• Хранятся при комнатной температуре в течение продолжительного времени (12-18 мес.)

52. Физико-химические свойства ликвора в норме. Виды изменений окраски ликвора, клиническое значение. Оценка прозрачности ликвора, клиническое значение. Выявление и исследование фибринозной пленки, клиническое значение.

Физико-химические свойства ликвора в норме.

1.Относительная плотность (удельный вес) люмбального ликвора составляет 1,005-1,009, субокципитального -1,003-1,007, вентрикулярного -1,002-1,004.

2. Прозрачность. Нормальная спинно-мозговая жидкость бесцветна, прозрачна, как дистиллированная вода, состоит на 98,9-99,0% из воды и на 1,0-1,1% из сухого остатка.

3. Нормальный ликвор бесцветен, как дистиллированная вода.

4. У здоровых людей рН люмбального ликвора составляет 7,28-7,32, в цистернальном - 7,32-7,34, что несколько ниже, чем в крови.

5. В нормальном ликворе присутствует белок (протеинархия). Содержание белка в люмбальном ликворе - 0,22-0,33 г/л, желудочковом ликворе -0,12-0,20 г/л, цистернальном ликворе - 0,10-0,22 г/л.

Нормальный ликвор бесцветен, как дистиллированная вода. Появление окраски обычно свидетельствует о патологическом процессе в ЦНС. Для обнаружения слабой окраски сравнивают доставленный ликвор с дистиллированной водой, налитой в такую же пробирку. Сероватый или серовато-розоватый цвет ликвора может быть при неудачной пункции (путевая кровь) или при субарахноидальном кровоизлиянии.

Прозрачность.Нормальная спинно-мозговая жидкость бесцветна, прозрачна, как дистиллированная вода, состоит на 98,9-99,0% из воды и на 1,0-1,1% из сухого остатка.

Помутнение ликвора зависит от существенного увеличения количества клеточных элементов (эритроцитов, лейкоцитов, тканевых клеточных элементов), бактерий, грибов и повышения содержания белка.

Помутнение, вызванное клетками и грибами, уменьшается или исчезает после центрифугирования. Помутнение, обусловленное бактериями, после центрифугирования не исчезает. При повышении содержания фибриногена в ликворе также отмечается изменение прозрачности в виде легкой опалесценции.

В норме в ликворе практически не содержится фибриногена. Молекула фибриногена имеет очень большую массу и с трудом проходит через гематоэнцефалический барьер (ГЭБ). Появление фибриногена в ликворе обусловлено заболеваниями ЦНС, вызывающими нарушение ГЭБ. Образование фибринозной пленки вызвано in vitro переходом фибриногена из золя в гель (фибрин). Фибринозная пленка (фибриновая сетка) образуется в ликворе при очень большом содержании фибриногена и имеет вид нежной, почти невидимой сеточки или пленки на стенках пробирки, мешочка, содержащего ликвор с клеточными элементами, или желеобразного сгустка на дне пробирки. Фибринозную пленку (мешочек) исследуют на туберкулез: извлекают путем выливания всего ликвора из пробирки на предметное стекло, расправляют на предметном стекле с помощью пинцета или бактериологической иглы или петли, высушивают на воздухе, фиксируют на пламени спиртовки, красят по Цилю-Нйльсену и микроскопируют в целях обнаружения микобактерий туберкулеза.

53. Химическое исследование ликвора. Значения рН, уровень белка, глюкоза, хлориды ликвора в норме. Методы определения белка и глюкозы в ликворе. Клиническое значение протеинархии и гликоархии.

рН является одним из относительно стабильных биохимических показателей ликвора. У здоровых людей рН люмбального ликвора составляет 7,28-7,32. Изменение рН в ликворе отражается на альвеолярной вентиляции, мозговом кровообращении и сознании. При неповрежденном гистогематическом барьере рН ликвора остается постоянным даже при изменении рН крови. колебания рН в норме и при патологии очень незначительные и составляют иногда всего 0,2 ед.

В нормальном ликворе присутствует белок (протеинархия). Содержание белка в люмбальном ликворе - 0,22-0,33 г/л, желудочковом ликворе -0,12-0,20 г/л, цистернальном ликворе - 0,10-0,22 г/л, эти референтные значения наработаны турбидиметрическим методом. При этом показатель 0,33 г/л рассматривается как величина, граничащая с патологией, а количество белка 0,22 г/л как гидроцефальный люмбальный ликвор. Нормальные показатели содержания белка в ликворе зависят от применяемого метода и могут быть представлены в более широких диапазонах.

ГликоархияВ ликворе содержание глюкозы примерно на 40% меньше, чем в плазме крови. В субокципитальном и вентрикулярном ликворе концентрация глюкозы на 12-15% выше, чем в люмбальном ликворе. Содержание глюкозы в ликворе у новорожденных и недоношенных несколько выше, чем у взрослых людей.При нормальном уровне глюкозы в крови в люмбальном ликворе концентрация глюкозы составляет примерно 60% уровня в плазме. При гипергликемии разница между ликвором и кровью возрастает значительно, в ликворе глюкоза достигает только 30-35% уровня плазмы. Уровень глюкозы в ликворе является одним из важных индикаторов функции гематоэнцефалического барьера и широко используется для его оценки. Глюкоза является основным субстратом для нейронов. Несмотря на то что большинство нейронов получают глюкозу из кровотока, у тех из них, которые прилегают к желудочкам мозга, при уменьшении концентрации глюкозы в ликворе может нарушаться трофика. Качественное и полуколичественное определение глюкозы в спинно-мозговой жидкости возможно с помощью диагностических полосок ГлюкоФАН и соответствующей диагностической зоны в политестах (новая глюкоза).