12.Ферменты бактерий. Понятие о биохимических свойствах микроорганизмов. Автоматическая регуляция синтеза ферментов. Идентификация бактерий по ферментативной активности.

Ферменты участвуют во всех обменных процессах. Ферменты делятся на экзоферменты, которые выделяются в окружающую среду, где они расщепляют питательные вещества. Эти вещества поступают внутрь клетки, где расщепляются эндоферментами.

По постоянству действия:

- Ферменты, постоянно участвующие в обменных процессах - конституитивные. Они принимают активное участие в синтезе структурных компонентов.

- Ферменты, действующие только при наличии субстрата – адаптационные: ферменты транспорта и катаболизма лактозы – галактоздпермиаза, -галактозидаза, галактозидацетилтрансфераза.

В целях диагностики определяют такие ферменты: лецитиназа, уреаза, сахараза, мальтаза, гиалуронидаза,

Ферменты патогенности:1) гиалуронидаза – расщепляет ГАГ (матрикс соедин. ткани), что облегчает механическое продвижение по ткани2) уреаза – расщепляет мочевину с образованием аммиака, что помогает выжить в очень кислой среде3) гемагглютинины – запускают агглютинацию крови, что создает благоприятные условия для роста и размножения моргов.4) лецитиназа – расщепляет желток куриного яйца5) пенициллаза – расщепляет пенициллин (первый антибиотик)

Микроорганизмы синтезируют различные ферменты - специфические белковые катализаторы. 1. Оксидоредуктазы - катализируют окислительно- восстановительные реакции.2. Трансферазы - осуществляют реакции переноса групп атомов.3. Гидролазы - осущесвляют гидролитическое расщепление различных соединений.4. Лиазы - катализируют реакции отщепления от субстрата химической группы негидролитическим путем с образованием двойной связи или присоединения химической группы к двойным связям.5. Лигазы или синтетазы - обеспечивают соединение двух молекул, сопряженное с расщеплением пирофосфатной связи в молекуле АТФ или аналогичного трифосфата.6. Изомеразы - определяют пространственное расположение групп элементов.

В бактериологии для дифференциации микроорганизмов по биохимическим свойствам основное значение часто имеют конечные продукты и результаты действия ферментов. В соответствии с этим существует микробиологическая (рабочая) классификация ферментов.

1.Сахаролитические.2.Протеолитические.3.Аутолитические.4.Окислительно - восстановительные. 5.Ферменты патогенности (вирулентности).

Идентификация бактерий по ферментативной активности.

Наиболее часто определяют ферменты класса гидролаз и оксидоредуктаз, используя специальные методы и среды.

Для определения протеолитической активности микроорганизмы засевают в столбик желатина уколом. Через 3—5 дней посевы просматривают и отмечают характер разжижения желатина. При разложении белка некоторыми бактериями могут выделяться специфические продукты — индол, сероводород, аммиак. Для их определения служат специальные индикаторные бумажки, которые помещают между горлышком и ватной пробкой в пробирку с МПБ или пептонной водой, засеянными изучаемыми микроорганизмами. Индол (продукт разложения триптофана) окрашивает в розовый цвет полоску бумаги, пропитанной насыщенным раствором щавелевой кислоты. Бумага, пропитанная раствором ацетата свинца, в присутствии сероводорода чернеет. Для определения аммиака используют красную лакмусовую бумажку.

Для многих микроорганизмов таксономическим признаком служит способность разлагать определенные углеводы с образованием кислот и газообразных продуктов. Для выявления этого используют среды Гисса, содержащие различные углеводы (глюкозу, сахарозу, мальтозу, лактозу и др.).набор сред Гисса с ростом микроорганизмов называют «пестрым рядом».