51. Антителогенез. Первичный и вторичный

На скорость образования Ат влияют: доза Аг, частота стимуляции, состояние иммунной системы. Если организм впервые встречается с Аг – первичный ответ, при повторном контакте – вторичный. Первичный ответ. Латентный период 3-5сут. Распознавание Аг и образование клонов плазмоцитов. Логарифмическая фаза7-15 сут. АТ поступают в кровь. Когда титры АТ достигают пика наступает стационарная фаза 15-30 сут. Фаза снижения титров 1-6 мес. Сначала образуется IgM, затем IgG. Скорость низкая, титры АТ невысокие. Вторичный. После Аг стимуляции часть лимфоцитов остается в крови - клети памяти. При вторичном попадании Аг титры АТ больше, циркулируют дольше. Скорость АТобразования выше. Кол-во Аг, необходимое для индукции иммунного ответа, меньше. Среди иммуноглобулинов доминирует IgG. Клонально-селекционная теория:1. АТ и лимфоциты с нужной специфичностью изначально существуют в организме;2.Лимфоциты, участвующие в иммунном ответе, имеют Агспецифические поверхностные рецепторы. У B-лимфоцитов рецепторы- молекулы той же специфичности, что и АТ, которые лимфоциты впоследствии продуцируют и секретируют.3.Любой лимфоцит несет на своей поверхности рецепторы только одной специфичности.4.Лимфоциты, имеющие Аг, пролиферируют и формируют клон плазмоцитов. Плазмоциты синтезируют АТ только той специфичности, на которую был запрограммирован лимфоцит-предшественник. Сигналами к пролиферации служат цитокины, которые выделяются другими клетками. Лимфоциты могут сами выделять цитокины.

52.Серодиагностика инфекционных заболеваний.

Иммунные реакции используют при диа­гностических и иммунологических исследо­ваниях у больных и здоровых людей. С этой целью применяют серологические методы, т. е. методы изучения антител и антигенов с помо­щью реакций антиген—антитело, определяе­мых в сыворотке крови и других жидкостях, а также тканях организма. Обнаружение в сыворотке крови боль­ного антител против антигенов возбудите­ля позволяет поставить диагноз болезни. Серологические исследования применяют также для идентификации антигенов микро­бов, различных биологически активных ве­ществ, групп крови, тканевых и опухолевых антигенов, иммунных комплексов, рецепто­ров клеток и др. При выделении микроба от больного про­водят идентификацию возбудителя путем изучения его антигенных свойств с помощью иммунных диагностических сывороток, т. е. сывороток крови гипериммунизированных животных, содержащих специфические ан­титела. Это так называемая серологическая идентификация микроорганизмов. В микробиологии и иммунологии широко применяются реакции агглютинации, преци­питации, нейтрализации, реакции с участи­ем комплемента, с использованием меченых антител и антигенов (радиоиммунологичес­кий, иммуноферментный, иммунофлюоресцентный методы). Перечисленные реакции различаются по регистрируемому эффекту и технике постановки, однако, все они осно­ваны на реакции взаимодействия антигена с антителом и применяются для выявления как антител, так и антигенов. Реакции иммуните­та характеризуются высокой чувствительнос­тью и специфичностью. Особенности взаимодействия антитела с ан­тигеном являются основой диагностических реакций в лабораториях. Реакция invitroмеж­ду антигеном и антителом состоит из специ­фической и неспецифической фазы. В специ­фическую фазу происходит быстрое специфи­ческое связывание активного центра антитела с детерминантой антигена. Затем наступает неспецифическая фаза — более медленная, ко­торая проявляется видимыми физическими явлениями, например образованием хлопьев (феномен агглютинации) или преципитата в виде помутнения. Эта фаза требует наличия определенных условий (электролитов, опти­мального рН среды).  Связывание детерминанты антигена (эпитопа) с активным центром Fab-фрагмента анти­тел обусловлено ван-дер-ваальсовыми силами, водородными связями и гидрофобным взаимо­действием. Прочность и количество связавше­гося антигена антителами зависят от аффин­ности, авидности антител и их валентности.

53. Реакция агглютинации. Компоненты…

РА — простая по постановке реакция, при которой происходит связыва­ние антителами корпускулярных антигенов (бактерий, эритроцитов или др. клеток, нерастворимых частиц с адсорбированными на них Аг). Она протекает при наличии электролитов (физ. р-р). Применяются различные варианты РА: развернутая, ориентировоч­ная, непрямая и др. РА проявляется образованием хлопьев или осад­ка (клетки, «склеенные» антителами, имеющими два или более антигенсвязывающих центра). РА используют для: 1) определения АТ в сыворотке крови боль­ных, например, при бруцеллезе (реакции Райта, Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (реак­ция Видаля) и др; 2)  определения возбудителя, выделенного от больного; 3)  определения групп крови с использова­нием моноклональных АТ против аллоантигенов эритроцитов. Для определения у больного АТ ставят развернутую РА: к разве­дениям сыворотки крови больного добавля­ют диагностикум (взвесь убитых микробов,) и через несколько часов инкубации при 37 ˚С отмечают наибольшее разведение сыворотки (титр сыворотки), при котором произошла агглютинация. Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят ориентиро­вочную РА, применяя диагностические АТ (агглютинирующую сыворотку), т. е. проводят серотипирование возбудителя.    Реакцию проводят на предметном стекле. К капле диа­гностической агглютинирующей сыворотки в разведении 1:10 или 1:20 добавляют чистую культуру возбудителя, выделенного от больно­го. Рядом ставят контроль: вместо сыворотки наносят каплю раствора натрия хлорида. При появлении в капле с сывороткой и микроба­ми хлопьевидного осадка ставят развернутую РА в пробирках с увели­чивающимися разведениями агглютинирую­щей сыворотки, к которым добавляют по 2—3 капли взвеси возбудителя. Агглютинацию учитывают по количеству осадка и степени просветления жидкости.  Реакцию считают положительной, если агглютинация отмеча­ется в разведении, близком к титру диагнос­тической сыворотки. Одновременно учитыва­ют контроли: сыворотка, разведенная изото­ническим раствором натрия хлорида, должна быть прозрачной, взвесь микробов в том же растворе — равномерно мутной, без осадка.