Стрептококки

Молоко с метиленовой синью.

Приготовление раствора краски. 0,2 г метиленовой синьки растворяют в 20 мл горячей дистиллированной воды, пропускают через бумажный фильтр и стерилизуют при 0,5 ати 20 мин, после чего употребляют по назначению. Краска хранению не подлежит.

К стерильному обезжиренному молоку (см. Среды, содержащие глюкозу и молоко) асептически добавляют 1 % по объему раствора краски, перемешива­ют и разливают в пробирки. Среду употребляют свежеприготовленной.

Мясо-пептонный бульон с желчью. К 90 мл стерильного МПБ, рН 7,4-7,6, добавляют асептически 10 мл стерильной бычьей желчи, перемешивают, разли­вают в пробирки и стерилизуют при 0,5 ати 20 мин или текучим паром триж­ды по 20 мин.

Среда Эдвардса. На основе мясной воды, полученной из фарша конины, го­товят МПБ с содержанием 1 % пептона и 0,5% хлорида натрия и устанавлива­ют рН 7,2. Добавляют и расплавляют 2% промытого агар-агара, после чего в горячую среду вносят 0,1 % сульфата таллия и 0,1% эскулина, подогревают до кипения при постоянном помешивании, разливают в стерильные колбы по 95 мл и стерилизуют текучим паром трижды по 30 мин.

Готовят основной раствор кристаллвиолета 1: 1500 (0,1 г на 150 мл ди­стиллированной воды) и стерилизуют одновременно с описанной средой.

Перед употреблением агар расплавляют, охлаждают до 50⁰С и на каждые 95 мл среды добавляют асептически 1 мл раствора кристаллвиолета и 5 мл взвеси промытых эритроцитов (их приготовление см. ниже) или 5 мл стериль­ной дефибринированной крови барана или быка; перемешивают и разливают в чашки. Конечная концентрация краски 1 : 160 000

Стафилококки

Кровяно-солевой агар. Состав среды: 2%-пый МПА, рН 7,2-7,4, с 7,5% хлорида натрия и 5 % взвеси промытых эритроцитов.

Дефибринированную кровь барана или крупного рогатого скота пропуска­ют через два слоя стерильной марли в центрифужные пробирки, уравновешивают их с пробками. Отмечают на пробирках уровень крови, закрывают и центрифу­гируют при 1500-2000 об/мин 10-15 мин, Плазму крови отсасывают, а к эрит­роцитам доливают стерильный физиологический раствор до отмеченного уровня, перемешивают стерильной стеклянной палочкой, уравновешивают и снова центрифугируют. Трижды промытые эритроциты доводят физиологическим раство­ром до первоначального объема крови.

В расплавленный солевой агар, охлажденный до 45⁰С, добавляют 5% (по объему) равномерной взвеси эритроцитов, перемешивают, не допуская образо­вания пены, и разливают в чашки. Среду можно хранить на холоду не более 7 дней.

Молочно-солевой агар. Состав среды: 3%-ный МПА, рН 7,2-7,4, с 10% хлорида натрия - 3 части, стерильное обезжиренное молоко - 1 часть.

В расплавленный и охлажденный до 45⁰С солевой агар прибавляют в указанном отношении молоко, подогретое до 45⁰С, перемешивают и разливают в чашки. Среду можно хранить на холоде до 10 дней.

Солевой бульон. К мясной воде добавляют 1 % пептона и 6,5% хлорида нат­рия, подогревают до растворения, охлаждают до 50⁰С, устанавливают рН 7,2­-7,4, разливают в пробирки по 5 мл. И стерилизуют при 1 ати 30 мин.