ТЕМА: «Медицинские измерительные приборы».

Практическая работа № 25. «Работа на спектрофотометре».

К физико-химическим методам анализа относятся: фотометрия (фотоколориметрия, спектрофотометрия, нефелометрия, пламенная фотометрия), рефрактометрия, потенциометрия, электрофорез и хроматография (адсорбционная, молекулярно-ситовая, распределительная, ионообменная, аффинная).

Фотометрические методы: фотоколориметрия, спектрофотометрия, нефелометрия, пламенная фотометрия.

Фотоколориметрия- это определение концентрации вещества в растворе по изменению силы тока в фотоэлементе при падении на него луча света, прошедшего через исследуемый раствор.

При прохождении светового потока через окрашенную прозрачную жидкость часть света поглощается. Степень поглощения света прямо пропорциональна интенсивности окраски раствора. Окраска раствора зависит от концентрации в нем растворенного вещества: чем выше концентрация, тем интенсивнее окраска и тем больше света поглощает раствор. Степень поглощения определяют в приборе фотоэлектроколориметре (ФЭК). По степени светопоглощения определяют содержание вещества в растворе.

Фотоэлектроколориметр.

Спектрофотометрия- это определение количества вещества в окрашенном растворе или в твердой среде по измерению светопоглощения волн строго определенной длины. Светопоглощение измеряют с помощью фотоэлемента по изменению силы фототока, возникающего в нем, при падении на фотоэлемент светового потока, прошедшего через контрольный, а затем через исследуемые растворы или образцы.

Измерение светопоглощения производится в приборе - спектрофотометре, кварцевая призма которого выявляет монохроматические пучки спектра, соответствующие окраске раствора исследуемого вещества, в силу этого прибор отличается большой чувствительностью и точностью.

.

Спектрофотометр.

Нефелометрия - это вид оптического анализа, в основе которого лежит измерение интенсивности светового потока, рассеиваемого в направлении, почти перпендикулярном направлению падающего пучка.

Принцип нефелометрии заключается в измерении количества света, рассеиваемого частицами в жидкой среде. Оптимальные условия его применения состоят в использовании растворов низкой концентрации.

Нефелометр.

Пламенная фотометрия – вид исследования, используемый для определения содержания электролитов и некоторых других элементов, атомы которых способны возбуждаться и испускать свечение в высокотемпературном пламени газовой горелки.

Принцип определения состоит в следующем. Растворенный в воде образец (биологический материал) вводят в пламя посредством распылителя. В случае достаточно высокой температуры пламени внешние электроны атома, получая часть тепловой энергии, переходят на более высокие энергетические уровни. При возвращении возбужденных электронов на нисходящий стационарный уровень поглощенная ими энергия выделяется в виде световых квантов. Длина волны испускаемого света, зависящая от структуры электронной оболочки атома, отражает химическую структуру элемента. Если свет пламени, в котором находятся атомы металлов, разложить с помощью призмы в спектр, то он окажется линейчатым (спектр испускания). По интенсивности свечения его основной линии, выделяемой с помощью светофильтра можно судить о количественном содержании элемента в исследуемой биологической жидкости. Применяется для одновременного определения натрия и калия.