Качественная реакция Молиша.

К сгустку муцина добавляют 3 капли 1% спиртового раствора тимола, перемешивают и по стенке пробирки осторожно приливают 20-30 капель концентрированной серной кислоты. При встряхивании на дне пробирки образуется продукт конденсации фурфурола с тимолом красного цвета.

Контрольные вопросы:

1.Синтез муцина и его функции.

2.Характеристика мукополисахаридов и изменение их свойств с возрастом.

3.Биохимия мукополисахаридозов.

4. Характеристика гликопротеинов, гликофорина, церуллоплазмина, гликопротеинов крови, интерферона и др. 5. Синтез муцина слюны, роль сиаловой кислоты в изменении вязкости слюны.

Тесты: 26, 32, 81, 85,92, 93.

Литература: 4. 9. 19.24. 29

VI. Тема: Белки минерализованных тканей кости и зуба.

1. Обнаружение белка в кости и зубе.

Цель занятия: изучить свойства и биологические функции белков костной ткани и зуба. Выполнить качественную реакцию по определению белков в гомогенате кости и зуба.

Теория вопроса. Большая часть белков твердых тканей зуба представлена коллагеновыми белками. Нерастворимые белки эмали относятся к коллаген и керамидоподобным белкам с большим количеством серина, глицина, лизина и оксипролина. Эти белки играют защитную роль в процессе деминерализации. Органическое вещество эмали образуют в основном белки - амелогенины, основная функция этих белков — формирование нерастворимой органической матрицы эмали, которая затем минерализуется благодаря особому кальцийсвязывающему белку эмали.

Кальцийсвязывающие белки эмали содержат ионы кальция в нейтральной и слабощелочной среде и способствуют проникновению кальция из слюны в зуб и обратно. На долю указанных белков эмали приходится 0,9% от общей массы эмали.

Белковый матрикс дентина составляет 20% от общей массы дентина, где на долю коллагена приходится 35% от всех органических веществ дентина. Основная часть цемента представлена бесклеточным цементом, верхушка зуба - клеточный цемент. Клеточный цемент напоминает кость, но больше содержит магния, а бесклеточный цемент состоит из коллагеновых волокон и аморфного вещества, склеивающего эти волокна.

Белки эмали, дентина и цемента обеспечивают минеральный обмен в твердых тканях зуба.

Примерно 95% органического матрикса приходится на коллаген, который вместе с минеральными компонентами обеспечивает механические свойства кости. Для коллагена кости характерно повышенное содержание фосфата. В сухом деминерализованном матриксе содержится около 17% неколлагеновых белков, среди которых находятся протеогликаны. Они непосредственно участвуют в процессах оссификации кости.

В слюне обнаружены специфические белки-саливопротеины, способствующие отложению фосфориокальциевых соединений на зубах и фосфопротеин- кальцийсвязывающий белок с высоким сродством к ГАП, участвующий в образовании зубного камня и зубного налёта.

Разнообразие и специфичность существующих белков в природе определяется аминокислотным составом и генетически точно заданной аминокислотной последовательностью в полипептидной цепи. Значение цветных реакций состоит в том, что они дают возможность обнаружить присутствие белка в биологических жидкостях и установить аминокислотный состав различных природных белков. Эти реакции применяются как для качественного, так и для количественного определения белка и содержащихся в нем аминокислот. Универсальной реакцией на белки является раннее изученная нами биуретовая реакция.

Ход работы. Небольшие измельченные кусочки кости и зуба помещают в 2 пробирки и добавляют по 10 капель 10% раствора едкого натрия. Содержимое пробирок нагревают до кипения. Белки кости и зуба при нагревании растворяются в щелочи и могут быть обнаружены в растворе с помощью универсальной реакции на белки – биуретовой. Появление сине-фиолетового окрашивания свидетельствует об образовании биуретового комплекса.

Контрольные вопросы:

1. Характеристика белков эмали, дентина, цемента, пульпы.

2. Коллаген, строение, свойства

3. Эластин, строение и свойства, основные отличительные особенности от коллагена.

Тесты: 5,6,35,41, 43, 50,67.

Литература: 14,18,20,26.