Патогенные для человека спирохеты являются представителями трех родов семейства Spirochaetaceae: Treponema (возбудитель сифилиса – Т. pallidum, возбудитель фрамбезии – Т. pallidum subsp. tenue, возбудитель пинты – Т.carateum); Borrelia (возбудитель эпидемического возвратного тифа – В. recurrentis, возбудители клещевого возвратного тифа – В. persica, В. hispanisa и др.) и рода Leptospira семейства Leptospiraceae (возбудитель лептоспироза – L.interrogans).

Спирохеты имеют штопорообразную извитую форму. Они отличаются друг от друга характером и числом завитков, длиной клеток, а также другими морфологическими и физиологическими признаками.

Спирохеты представляют собой тонкие спирально извитые нити, изогнутые вокруг центральной оси. Клетки спирохет представляют собой цитоплазматические цилиндры, отграниченные цитоплазматической мембраной (ЦМ) от тонкой и эластичной клеточной стенки. Между ЦМ и цитоплазматическим цилиндром расположены фибриллы, которые, как и жгутики бактерий, состоят из белка флагеллина. У трепонем и боррелий имеется два пучка фибрилл, прикрепленных к дисковидным образованиям – блефаропластам. Фибриллы обеспечивают разные типы движения спирохет: поступательное, вращательное и сгибательное.

 

отребностей клетки.

Рис. Структура спирохет

Клетка спирохеты в продольном (А) и поперечном (Б) разрезе. На рис. А изображена клетка, содержащая по одной аксиальной фибрилле у каждого конца; на рис. Б — поперечный разрез, прошедший через среднюю часть клетки, где показаны два пересекающихся пучка, состоящих из множества аксиальных фибрилл: 1 —протоплазматический цилиндр; 2 —наружный чехол; 3 — аксиальные фибриллы;4 — место прикрепления аксиальных фибрилл; 5 — пептидогликановый слой клеточной стенки; 6 — ЦПМ

Таблица

Классификация: представители отдельных родов различаются по длине и толщине, числу и характеру завитков.

 

Все спирохеты – грамотрицательные микроорганизмы. Различные виды – анаэробы, факультативные анаэробы и аэробы. Большая часть спирохет – свободно живущие микроорганизмы, обитают как сапрофиты и в организме человека. Патогенными для людей являются немногие.

Определить родовую принадлежность спирохет в готовом мазке, окрашенном по Романовскому-Гимзе, используя данные, приведенные в табл.

Род	Количество и характер завитков	Характер движения	Окраска по Романовскому - Гимзе
Treponema	8-12, мелкие, равномерные	Плавное, сгибательно-поступательное	Бледно-розовый
Borellia	3-10, крупные, неравномерные	Толчкообразное, сгибательно-поступательное	Фиолетовый
Leptospira	Многочисленные первичные, вторичные завитки в виде буквы S	Очень активное, вращательно-поступательное	Розово-синий

 

 

Морфологию спирохет изучают в препаратах «раздавленная» капля и в мазках, окрашенных по Романовскому – Гимзе. Нативные препараты микроскопируют в темном поле или с помощью фазово-контрастного микроскопа, наблюдая за активным и характерным движением спирохет и особенностями их формы.

Приготовление мазков из крови. На чистое обезжиренное стекло ближе к одному из его концов помещают каплю крови. Другое предметное стекло, имеющее шлифованный край, прижимают под углом 45° к капле крови, а затем скользящим движением передвигают его к свободному концу первого стекла. При этом кровь распределяется по предметному стеклу тонким слоем. Высушивают препарат на воздухе, фиксируют в жидком фиксаторе (метиловый спирт или смесь этилового спирта и эфира).

Для приготовления «толстой» капли на предметное стекло наслаивают 2—3 капли крови, распределяя ее до величины 10-копеечной монеты. После высушивания на воздухе осторожно наливают несколько капель дистиллированной воды на 10-15 мин для удаления гемоглобина из эритроцитов.

Окрашивание препарата по Романовскому – Гимзе смесью метиленового синего, эозина и азура. На мазок наносят рабочий раствор красителя (2 капли красителя на 1 мл дистиллированной воды) на 10-20 мин. Затем препарат промывают водой и высушивают на воздухе. По Романовскому – Гимзе спирохеты возвратного тифа окрашиваются в фиолетовый цвет, эритроциты крови – в розовый, ядра лейкоцитов – в фиолетовый Трепонемы окрашиваются в бледно-розовый цвет, лептоспиры – в розово-сиреневатый.

Трепонемы

Бледная трепонема

Treponema pallidum — возбудитель сифилиса — была откры­та в 1905 г. Ф. Шаудином и Э. Гофманом.

Морфология, физиология. Длина спиралевидного тела клетки колеблется от 6 до 20 мкм при диаметре 0,13—0,15 мкм. Протоплазматический цилиндр скручен в 8—12 равнозначных завитков. От концов клеток отходят по 3 периплазматических жгутика.

Т. pallidum плохо воспринимает анилиновые красители из-за малого количества нуклеопротеидов в клетке. Только при длительном окрашивании по методу Романовского-Гимзы приобретает слабо-розовый цвет, что послужило поводом для названия возбудителя сифилиса «бледная трепонема».

T. Pallidum (в темном поле микроскопа)

 

При действии неблагоприятных факторов, в частности лечебных препаратов, трепонемы могут переходить в L-форму, а также образовывать цисты – свернутые в шар спирохеты, покрытые непроницаемой муциновой оболочкой. Цисты могут длительное время находиться в организме больного, не проявляя патогенности. При благоприятных для них условиях цисты спирохет становятся спиралевидными, размножаются и восстанавливают свою патогенность.

Т. pallidum  очень  требовательна к составу искусственных питательных сред и на обычных средах не размножается. Она растет на средах, содержащих почечную или мозговую ткань в строго анаэробных условиях при температуре 35 °С. Культивирование трепонем в течение длительного времени приводит к потере вирулентности и изменениям других биологических свойств (биохимических, физиологических). Для сохранения исходных свойств трепонем в лабораториях их пассируют на кроликах – в ткани яичек животных, где они хорошо размножаются.

Антигены. Наличие в составе микробной клетки трепонем полисахаридных, липидных и белковых комплексов обусловливает их сложную антигенную структуру.

Экология и распространение. Средой обитания для бледной трепонемы является организм человека. Животные в естественных условиях сифилисом не болеют. Заражение происходит половым путем и редко через предметы обихода (белье, посуда и др.).

Попадая в окружающую человека среду, трепонемы быстро погибают, так как они малоустойчивы к высыханию, измене­ниям температуры и действию химических веществ. Так, при температуре 55°С они гибнут через 15 мин, при 45-48 °С – через 1 ч. Чувствительны трепонемы к тяжелым металлам (ртуть, висмут, мышьяк), кислотам и обычным дезинфицирующим веществам.

Патогенность возбудителей и патогенез сифилиса. Экспериментальное заражение трепонемами лабораторных животных (крыс, мышей, морских свинок) создает бессимптомную инфекцию. Заражение кроликов в кожу или яичко позволяет размножить, накопить необходимое количество трепонем. Эта модель дала возможность, кроме сохранения исходных биологических свойств культур, выделенных от больных людей, изучить их отношение к лечебным препаратам и другие вопросы инфекционной патологии. Способность трепонем противостоять защитной реакции фагоцитов, активно внедряться в ткани при поврежда­ющем действии эндотоксина обеспечивает развитие патологи­ческого процесса.

Время от заражения	Начало 2-10 недели	Первичный сифилис 1-3 месяца	Вторичный сифилис 2-6 недель	Скрытый сифилис 3-30 лет	Третичный  и четвертичный сифилис
Ведущие признаки	Первичный шанкр в месте проникновения	Увеличение лимфатических узлов.	Сыпь на коже и слизистых оболочках.		Нейросифилис Кардиоваскулярный сифилис Прогрессирующие деструктивные процессы

 

 После инкубационного периода, длительность которого составляет в среднем 24 дня (но может затягиваться до 90- дней), на месте внедрения возбудителя возникает без­болезненный плотный инфильтрат — твердый шанкр и регионарный аденит — плотный увеличенный лимфатический узел. Это – первичный период сифилиса. Этот этап продолжается примерно 6 нед. Возбудитель размножается, накапливается в большом количестве в первичном очаге.