Преципитация реакциясы

Преципитация реакциясы электролит ºатысуында спецификалыº антиденелермен (преципитиндермен) ½саº бытыраулы (мелкодисперсные) антигендердi» (преципитогендердi») т½ндыру. Ертiлмейтiн антиген+антидене т½»ба ж¼нiнде комплекстi» т½ндырылуы тек ºана ингредиенттердi» баламалы ара ºатысында байºалады. Преципитиноген м¼лдiр коллоидты ертiндi болу керек. Преципитация реакциясы антиденелер ½стайтын белгiлi преципитация-лайтын сары су бойынша антигендердi аныºтау ¾шiн ºолданылады; сары суды жануарларды белгiлi антигенмен иммунизация жасап алады.

а) Кольцепреципитация реакциясын ºою ¾шiн пробиркалар¹а (диаметрi 0.5 см) 0.1 мл диагностикалыº сары суын ¸р т¾рлi антигендерге ºарсы º½яды, сосын оны» ¾стiне Пастер пипеткасымен пробирканы» ºабыр¹асымен зерттейтiн º½ралды ºабаттайды. Реакцияны 1-2 минуттан кейiн есептейдi. Реакцияны» ºорытындысы о» болса – сары суды» ж¸не зерттейтiн º½ралды» арасында аº саºина сияºты преципитат пайда болады. Баºылау (контроль) пробиркада болмау керек.

б) Гельдегi преципитация реакциясы: антиген ж¸не антидене гельде байланысып, преципитат пайдалынады. Преципитат гельде аº т¾стi сызыº болып келедi.

²ою техникасына бойынша преципитация реакциясыны» екi т¾рiн ажыратады:

1. ²арапайым диффузияны» ¸дiсi: иммундыº сары су ºосыл¹ан бiр ºабатты агарды гель дайындайды ж¸не осы ºабатта iстелiнген ш½»ºыр¹а антиген е»гiзiледi.

2. Оухтерлони бойынша екi ºабатты диффузияны» ¸дiсi: антигендер ж¸не антиденелер агарды гельды» ¸р т¾рлi ш½нºырларына е»гiзедi, олар диффундирлеп кездеседi, преципитат сызыºтары пайда болады. Осы реакцияны ºою ¾шiн шыныларды м¼лдiр агарымен º½йып е»гiзедi, б½л агарда сосын аралары бiрдей ш½»ºырлар жасайды.

Орта ш½нºыр¹а антиденелердi е»гiзедi, шеткi

ш½»ºырлар¹а зерттеуге арнал¹ан антигендердi

енгiзедi. Шыныны жауып б¼лме температурада

24-28 са¹атты» iшiнде саºтайды. Т¸жiрибенi»

суретiн альбом¹а салу, ºорытындысын талºылау

Тапсырма 4

Саºиналы преципитация реакциясын ºою схемасы

Ингредиенттердi» к¼лемi, мл	Пробиркаларды» номерi
	1 (ò¸æiðèáå)	2 (контроль)	3 (контроль)
0.5	Адамны» ºаны–ны» белогына ºарсы преципи–тацияланатын сарысу	ºалыпты сарысу	Ôèç.åðòiíäi
0.5	ºан тамшысыны» ж½¹ыны	ºан тамшысыны» ж½¹ыны	ºан тамшысыны» ж½¹ыны
Реакция ºорытындысын 1-2 мин кейiн ж¾ргiзедi.

Иммунофлюоресценттi ¸дiс

Б½л ¸дiс арºылы тез арада (1-2 са¹ат) микробтарды» ¸р т¾рлi антигендерiн аныºтау¹а болады (бактериялар, риккетсиялар, вирустар ж¸не т.б.) немесе антиденелердi» тi»дерде немесе м¾шелерде орналасуын табу¹а болады. Б½л ¸дiстi ж¾ргiзу ¾шiн антиденелердi немесе антигендердi флюорохромды бояулармен белгiлейдi. Реакция бол¹аннан со» препараттарды люминесценттiк микроскоппен зерттейдi. Антигендер боял¹ан антиденелермен байланысып препаратты» ºара»¹ы фонында жарºырап т½рады.

Микробиологиялыº зерттеулердi ж¾ргiзу ¾шiн тура ж¸не тура емес иммунофлюоресценция ¸дiстерi ºолданылады.

Практикалыº микробиологияда ж¸не вирусологияда иммунофлюо–ресценттiк ¸дiсi к¼бiнесе ж½ºпалы ауруларды» аныºтау ¾шiн экспресс-¸дiс жайында ºолданылады. ОРВИ-да РИФ ºою схемасын талºылау (грипп, парагрипп, аденовирустыº инфекцияларды дифференциясын жасау).

°дебиеттер:

Íåãiçãi:

1. Медицинская микробиология /Гл. ред. В.И.Покровский, О.К.Поздеев – М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1998. – С.70-89.; 2. А..И.Коротяев, С.А.Бабичев Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. Учебник. – Спб: «Специальная литература«, 1998. – С.151-165.; 3. Павлович С.А. Основы иммунологии. –Мн.: Выш. Шк., 1998. – С.11-19.; 4. °.°.Шортанбаев, Т.Е.Шайкенов, С.В.Кожанов Иммунология. Оºу º½ралы. – Алматы, 1994. – С.40-54.; 5. К.Х.Алмагамбетов Инфекция ж¸не иммунитет.Оºу º½ралы.–Астана, 2000; 6.Борисов Л.Б., Кузьмин-Соколов Б.Н., Фрейдлин И.С. Руководство к практическим занятиям по микробиологии – М.:Медицина, 1993. – 112с.

²осымша:

1.Р.В.Петров Иммунология. – М.: Медицина, 1987.– 416 с.; 2. Ройт А. Основы иммунологии. М., 1991.; 3. Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических методов исследования //М.:Медицина, 1968.– 466с.; 4. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования /под ред. М.О.Биргера //М.:Медицина, 1973. – 456с.; 5. Вершигора А.Е. Общая иммунология. – Киев, 1990.

Ñàáàº

Таºырыбы: Бактериолиздiк реакция.КБР(РСК), ИФР(HBA), ИФТ (ИФА),

РИТ(РИА). Тiстiлiк баºылау. 9-11 таºырыптар бойынша

ºорытынды сабаº.

Ñàáຠ½çàºòû¹û: 5 ñà¹àò

Сабаº ¼ткiзу орыны: оºу лабораториясы

Жабдыºтары – лабораторлыº ыдыс, бояулар, тексерiлетiн сарысу, тест-

даºылдар,серологиялыº реакциялар¹а реактивтер, тест-ж¾йелер

Ñàáàºòû» îºóëûº ìàºñàòû

Студент бiлу керек:

1. °р т¾рлi тобында¹ы иммуноглобулиндердi, антидененi» пайда болуы, иммунитеттегi антиденелердi» ма»ызы.

2. Комплемент, иммунологиялыº реакцияларында оны» ºатысуы ж¸не активтену жолдары.

Студент атºара бiлу керек:

1. Лизис реакциясын ºою

2. Комплемент байланыстыру реакциясын ºою

3. Нейтрализация реакциясын (флокуляция) ºою

4. Радиоиммунды, иммуноферменттi реакцияларын ºою ж¸не есептеу

5. ²оз¹ал¹ыш бактерияларды» иммобилизация реакциясын ºою

Таєырып бойынша јз бетiмен дайындалу№а арнал№ан сЅраєтар:

1. °р т¾рлi топта¹ы иммуноглобулиндерi, оларды» мiнездемесi. gM, gG, gA, gD, gE, S-gA иммуноглобулиндердi» молекулалыº º½рылысы. Активтiк орталарыны» спецификалы¹ы.

2. Иммунитетте антиденелердi» ма»ызы.

3. Антиденелердi» пайда болуы. Иммуногенездi» фазалары. Бiрiншi ж¸не екiншi иммундыº жауапта¹ы антиденелердi» к¼беюiнi» а¹ымы.

4. Бактериялыº инфекцияларда организмнi» ºор¹анышында¹ы секреторлыº S-gA ма»ызы.

5. Иммундыº лизистiк реакциясы, механизмi, ºажеттi ингредиенттер.

6. Комплемент, оны» компоненттерi. Иммунологиялыº реакцияларда ºатысуы. Классикалыº ж¸не альтернативтiк жолдарымен комплементтi» активтенуi.

7. Комплементтi байланыстыру реакциясы (КБР). Реакция¹а ºатысатын ж¾йелер, ингредиенттерi, КБР механизмi. КБР практикада ºолдануы.

8. Иммуноферменттiк ¸дiс, принципi, ºолдануы.

9. Радиоиммундыº ¸дiс, принципi, ºолдануы.

Аºпараттыº-дидактикалыº блок