Òiкелей емес (пассивтi) гемагглютинация реакциясы (тегр)

Б½л реакция – агглютинация реакциясыны» бiр т¾рi, негiзгi принципi – эритроциттер ¼з беткейiне ертiндi антигендер ж¸не гаптендердi жабыстыра (адсорбция) алатын ºабiлетi (бактерияларды, вирустарды ж¸не т.б. микроорганизмдердi). Осы жа¹дайда эритроциттер жана серологиялыº арнайы ºабiлетке ие болады, сондыºтан иммундыº сары сулармен, гомологиялыº адсорбциялан¹ан антигендермен агглютинация реакциясына ºатысады. Осындай эритроциттердi сенсибилизациялан¹ан эритроциттер, эритроцитарлыº диагностикум деп атайды. Сенсибилизациялан¹ан эритроциттердi алу ¾шiн эритроциттердi алдын ала танинмен 1:20000 ертiндiде ¼ндейдi, б½л жа¹дайда оларды» адсорбцияланатын ºабiлетi (жабысу) жо¹арлайды. Реакцияны полистеролдыº планшета¹а немесе пробиркада жасайды. Тексерiлетiн ºан сары суында¹ы комплементтен ажырату ¾шiн алдын ала 58С 30 мин ºыздырады. Сосын сары судан ертiндi ºатарын дайындайды 1:10–нан 1:12000–ге дейiн ж¸не одан жо¹ары, 0.5 мл пробиркалар¹а немесе планшета лункаларына º¾яды. °р сары су ертiндiсiне 0.1 мл эритроцитарлыº диагностикум ºосады. Реакцияны б¼лме температурасында 2 са¹ат ½стайды немесе термостатта. ²орытындысы о» + – егер пробирка немесе лунка т½бiндегi эритроциттер т½нбасыны» шеттерi иректелген – ºол шатыр т¸рiздес. Реакцияны» ºорытындысы терiс– жа¹дайда эритроциттер т½нбасы бiр келкi т½бiне т¾седi, т¾йме т¸рiздес.

Тапсырма 3.

ТЕГР (РПГА) ºою т¸жiрибесi (ауру адамны» микробºа ºарсы антиденелерiн табу ¾шiн). Серодиагностика.

Зерттеу к¾нi	Ìàºñàòû	Зерттелетiн материал	Зерттеу барысы	ºорытынды
1	Ауру адамны» сары суында антиденелердi» титрi жо¹арлау–ын аныºтау	1.Ауру адамны» сары суы 8 т¸улiкте 1:50 2.Ауру адамны» сары суы 15 т¸улiкте 1:50	ÒÅÃÐ ºîþ.

ТЕГР–ны ºою схемасы (Видаль реакциясы – iш с¾зектi» диагностикасы)

Ингредиенттер	Пробиркалар номерi ж¸не ертiндiлерi
	1 1:50	2 1:100	3 1:200	4 1:400	5 1:800	6 ê
1.Сары су (1:50) ауруды» 8 немесе 15 т¸улiгiндегi	1.0				1.0 º½йып тастау
2.Ôèç.åðòiíäi	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0
3.Эритроцитарлыº диагностикум	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1

Ескерту: бiрiншi пробиркадан 1,0 мл екiншiге апару, 2-шi пробиркадан 3-ге, 3-шi пробиркадан – 4-ге, 5-ден 1,0 мл дез.ертiндiсiне єЅйып тастау. Диагностикумны» 0,1 мл–ден ёр бiр пробирка№а енгiзу, 2 са№атєа термостатєа єою немесе бјлмеде саєтау.

Іорытындыны 2 са№аттан кейiн жѕргiзедi.

ТЕГР–ны есептеу, альбом№а сурет салу, зерттеген сары суды» титрiн аныєтау.

Коагглютинация реакциясы

БЅл реакция – агглютинация реакциясыны» бiр тѕрi: стафилококкты» А–белогы иммуноглобулиндердi» gG тобы молекуланы» Fc–фрагментiмен спецификалыє емес байланысу№а єабiлеттi.

Коагглютинация реакциясын єою ѕшiн стафилококкты» Соwan–1 штаммын єолданылады (осыдан ¸дiстi» атауы – Со– (Ко–)–агглютинация.

Коагглютинация реакциясын екi вариантта ºолданылады:

1. °р т¾рлi биологиялыº с½йыºтыºтарда патогендi микроорганизмдердi» антигендерiн табу ¾шiн (несепте т.б.)

Б½л ¾шiн антиденелiк Ко–диагностикум дайындайды: – стафилококк жасушаларыны» ¾стiнде белгiлi спецификалыº gG–дi адсорбциялайды (жабыстырады). Зерттейтiн º½ралда антиген (Аг) бар болса е»гiзген Ко–диагностикумымен тез арада агглютинация болады.

Коагглютинация реакциясыны» ºою схемасы:

gG Соwan–1 Ко–диагностикум

Y Y Y Y +

а) Ко–диагностикумны» дайындауы:

Аг Со–агглютинация

+

б) антигенi бар зерттеу º½рал¹а ºосу.

Осындай вариант к¼кж¼тел, менингококтыº инфекцияларды» ж¸не т.б. тез арада аныºтауын ºою ¾шiн ºолданылады.

2. Созылмалы бактериялыº инфекцияларды аныºтау ¾шiн.

Созылмалы инфекцияларды» ºоздыр¹ыштары ¼з беткейiнде спецификалыº антиденелердi тасымалдайды, сондыºтан олар стафилококк Соwan–1 штаммымен агглютинация реакциясын беруi м¾мкiндiгi бар. Мысалы, пиелонефрит ауруында ¸р т¾рлi шартты–патогендi бактериялар б¼лiнедi (Е.со1i, Р.аеruginosa, эпидермальды стафилоккк ж¸не т.б.).

Шы¹арып алын¹ан даºыл Соwan–1 штаммымен агглютинация берсе, б½л созылмалы инфекция деп есептелiнедi.

Реакцияны» ºою схемасы:

+

Б¼лiп алын¹ан Соwan–1 Агглютинация даºылды» ºоспасы штаммды енгiзедi реакциясыны»

о» ºорытындысы

созылмалы инфек–

цияны» бар екенi»

áiëäiðåäi

Кумбс реакциясы (антиглобулиндi реакция)

Б½л реакцияны º½рамында 1 ¹ана белсендi орталы¹ы бар ж¸не антигеннi» бiр детерминантты тобымен байланысатын толыº емес (моноваленттi, тежеушi) антидененi аныºтау ¾шiн ºолданады. Сондыºтан да пайда бол¹ан антиген-антидене комплексi микроагрегат, т½»ба т¾збейдi, лайланбайды ж¸не басºа да ¼згерiстерге ¾шырамайды. Ал Кумбс реакциясы н¸тиженi к¼збен ºарап-аº ба¹алау¹а м¾мкiндiк бередi. Диагностика ¾шiн: резус-келiспеушiлiкте, бруцеллезде, аутоиммунды ауруларда (ºызыл б¼рi ауруы, полиартрит) ºолданады.

Маºсаты: Ж¾ктi ¸йелдi» зерттелетiн сары су º½рамында, резус-антигенге ºарсы толыº емес антидененi аныºтау ¾шiн.

Ингредиенттерi: зерттелетiн сары су, ºоянны» антиглобулиндi сарысуы (АГС), º½рамында резус-антигенi бар эритроцит. АГС-тi ºоянды адамны» глобулиндерiмен иммунизациялау жолы арºылы дайындайды. АГС-тi» º½рамында адамны» ¸рт¾рлi глобулиндерiне ºарсы толыº, биваленттi антиденелер бар.

Техникасы ж¸не н¸тижесi:

Зерттелетiн сарысу¹а резус-антигенi бар эритроцит ºосылады. 1 са¹ат инкубациядан кейiн АГС-тi енгiзедi. Реакция н¸тижелi болса, гемагглютинация байºалады.