Методические рекомендации к практическому занятию №14 по теме: «Коринебактерии дифтерии. Микобактерии туберкулеза». План занятия

1.Закрепить знания по изучению морфологии, биологии и резистентности коринебактерий и микобактерий, методов лабораторной диагностики и профилактики заболеваний, вызываемых ими.

2. Изучить правила взятия материала от больных дифтерий и туберкулезом.

3. Овладеть методикой и техникой проведения первого этапа бактериолоческого исследования материала при выделении коринебактерий дифтерии.

4. Закрепить знания по изучению средства специфической профилактики и терапии дифтерии, туберкулеза.

Самостоятельная работа

Задание 1

Изучите морфологические и тинкториальные свойства коринебактерий и микобактерий путем микроскопии готовых препаратов или по таблице, зарисуйте, подпишите.

1. 2.

1.

2.

Задание 2

Изучите питательные среды, применяемые для первичного посева материала от больных дифтерией (1, 2, 3), туберкулезом(4). Демонстрация сред.

1. Среда Ру, Леффлера

2. Среда Клауберга (КТА), Тинсдаля – Садыковой

3. Среда Бучина

4. Левеннштейна - Иенсена

Задание 3

Изучите правила сбора патологического материала (слизь из зева и носа) от больных дифтерией (работа в перчатках).

Показания для забора материала:

• у детей и взрослых с подозрением на дифтерию (ежедневно в течение 3 – дней);

• у пациентов с ангинами при наличии налетов (однократно);

• у пациентов со стенозирующим ларинготрахеитом (однократно);

• у детей и взрослых, бывших в контакте с источниками инфекции.

Методика взятия материала:

• стеклографом отмечают на пробирках номера, соответствующий номеру а направлении на исследование;

• усадить пациента к источнику света и попросить открыть рот;

• левой рукой шпателем прижать корень языка книзу;

• тампоном снимают слизь из миндалин, дужек, задней стенки глотки на границе здорового и пораженного участков;

• края пробирки обжигают над пламенем спиртовки и вставляют тампон (подписывают «зев»);

• для взятия мазка из носа вращательным движением вводят в чистый носовой ход, затем в носовой ход, в котором имеется патологическое содержимое, обжигают пробирку над пламенем спиртовки и вставляют тампон (подписывают «нос»);

• транспортируют взятый материал в биксе в бактериологическую лабораторию не позже 2-х часов после взятия материала.

Примечание:

• мазок из зева необходимо брать натощак до приема антибиотиков и других лекарственных препаратов, рот не полоскать;

• заполнить форму № 204 –У

Задание 4

Проведите первый этап бактериолоческого исследования материала при выделении коринебактерий дифтерии:

1. Проведите забор (слизь из зева друг у друга) при помощи стерильного дифтерийного тампона без пробки и сделайте посев на чашку Петри с 20% - ым сывороточным агаром по следующей методике: производят посев тампоном на четверть чашки Петри (сектор1); далее стерильной петлей производят рассев, как показано на схеме, и чашки инкубируют при температуре 37⁰С в течение 18-24 часов.

С хема первичного посева материала для выделения коринебактерий:

Сектор 1 Сектор 2 Сектор 3 Сектор 4

2. а) произведите забор материала (слизь из зева) у того обследуемого при помощи второго дифтерийного тампона с пробкой;

б) сделайте два мазка – отпечатка с этого тампона, высушите на воздухе, зафиксируйте над пламенем спиртовки и окрасьте по методу Леффлера, а второй – по методу Грама – Синева ( что позволяет определить другие возбудители ангины, кроме дифтерийных палочек – спирохеты, веретенообразные палочки, стрептококки и др.).

в) исследуемый материал на этом тампоне засейте на полужидкую среду обогощения, опустив в пробирку со средой, которую ставят в термостат при при температуре 37⁰С в течение 18-24 часов.

Задание 5

Изучите правила сбора патологического материала (мокроты) от больных туберкулезом легких.

Бактериологическому обследованию подлежат в медучреждение лица:

• с явными симптомами туберкулеза органов дыхания;

• с наличием продолжительного (более 3- х недель) кашля, сопровождающегося выделением мокроты, особенно с кровью, и жалобами на боли в груди;

• контактировавшие с больными, имеющими положительный результат бактериоскопического исследования и соответствующие симптомы заболевания;

• имеющие рентгенологические изменения в легких, подозрительных в отношении туберкулеза.

Для сбора мокроты применяются плевательницы из темного стекла с герметически завинчивающимися крышками емкостью 100 мл, которые получают из баклаборатории, оформляют направление на исследование и приклеивают на плевательницу. На исследование направляют три пробы от каждого пациента, которые собирают в течение 1-2 дней. Перед сбором мокроты необходимо почистить зубы и прополоскать полость рта кипяченной водой, собрать мокроту и хранить в холодильнике.

1 проба – пациент приходит в больницу или поликлинику и под наблюдением медработника собирает мокроту, накопившуюся в течение 1- 2 часов после сна.

2 проба – мокрота собирается больным в тот день через некоторое время после взятия 1 –ой пробы.

3 проба – мокрота собирается самим больным утром следующего дня и доставляется им в медицинское учреждение.

Забор мокроты следует проводить в отсутствии посторонних людей в отдельной хорошо проветриваемой комнате. Медработник обязан быть в маске, клеенчатом фартуке и резиновых перчатках. Пациенту следует откашливать мокроту из более глубоких отделов легких.

Во время забора мокроты медработник должен стоять за спиной больного. Для исследования необходимо получить 3- 5 мл мокроты, содержащей плотные гнойные частицы, а не слюну. Если мокроту получить не удалось, плевательница считается использованной и подлежит обеззараживанию. Собранная мокрота доставляется в транспортировочных коробах или биксах в лабораторию на исследование.

Задание 6

Изучить показания для постановки пробы Манту, оценку результатов пробы Манту.

Показания:

• отбор контингента, подлежащего ревакцинации против туберкулеза;

• проведение вакцинации детям старше 2-х месяцев жизни;

• ранее выявление и диагностика туберкулеза;

• определение показателя инфицированности населения туберкулезом.

Примечание:

• для проведения пробы Манту, используется очищенный туберкулин в стандартном разведении (0,1 мл препарата содержит две туберкулиновые единицы);

• не допускается замораживание, перегревание препарата, хранение вскрытой ампулы в асептических условиях более 2 –х часов:

• пробу Манту проводят ежедневно детям с 2-х месячного возраста и подросткам до 17 лет внутрикожно (в четный год – на правом предплечье, в нечетный год – на левом предплечье);

• результат пробы оценивается через 72 часа, размер папулы определяют прозрачной линейкой, регистрируют поперечный (по отношению к оси руки) диаметр папулы.

Оценка результата:

• анергия (отрицательный результат) – 0-1 мм уколочная реакция;

• нормергическая реакция (положительный результат) – папула от 5 до 16 мм у детей и подростков, от 5 до 20 мм у взрослых;

• нормергическая реакция папула от 5 до 11 мм – низкая, папула от 5 до 16 мм – высокая (если папула более 12 мм необходима консультация у фтизиатра).

Задание 7

Заполните таблицу, указав средства специфической профилактики и терапии дифтерии, туберкулеза.

Заболевания	Средства специфической профилактики	Средства специфической терапии
Дифтерия
Туберкулез

ПРАВИЛА ЗАБОРА МАТЕРИАЛА ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Общие требования.

1. Биоматериал должен отбираться:

• до начала антибиотикотерапии терапии или перед введением следующей дозы антибиотика с учетом времени его элиминации;

• непосредственно из очага инфекций либо биопробы, отражающих процесс в тех или иных органах и системах (бронхиальный секрет при пневмониях, моча при инфекциях МВП и др.);

• с соблюдением асептики, избегая контаминации посторонней флорой;

• в достаточном количестве для проведения исследования и помещаться в стерильную посуду.

2. Доставляться в максимально короткие сроки (1,5-2 часа либо с применением транспортных сред),

3. Необходимо правильно заполнять сопроводительные документы (направления).