2. Определение скорости хемосинтеза

Аппаратура, материалы, реактивы:

1. Раствор азида натрия;

2. Раствор ¹⁴С-бикарбоната натрия;

3. Раствор ¹⁴С-бикарбонат натрия с активностью 0,5-5 мкКи;

4. 40% формалин;

5. Шприцы 10мл -10шт;

6. Раствор диурона;

7. Мембранный фильтр с диаметром пор 0,20 мкм;

8. Фильтровальная бумага;

9. 1-3% раствор HCl;

10. Сцинтилляционные флаконы;

11. Сцинтилляционная жидкость ЖС-106;

12. Сцинтилляционная смесь (толуол : метанол - 85 : 25, 2,5-дифенилоксазол (ППО) - 6 г/л, 1,4-бис-2-(5-фенилоксазол) бензол (ПОПОП) - 100 мг/л).

Радиоизотопный метод. В пробу вводят 0,1 мл рабочего раствора азида натрия на 15-20 мл пробы для ингибирования автотрофной фиксации углекислоты. Затем вводят 0,1 мл раствора ¹⁴С-бикарбоната натрия.

Инкубацию от 2 до 72 ч проводят в водоеме в месте отбора проб. Затем фиксируют 0,2 мл 40% формалина.

Обработку пробы проводят в лаборатории, где определяют радиоактивность биомассы и экзометаболитов. По разнице между общей темновой и автотрофной фиксацией радиомеченого бикарбоната определяют скорость хемосинтеза.

3. Определение скорости темновой фиксации со2

Аппаратура, материалы, реактивы:

1. Раствор ¹⁴С-бикарбонат натрия с активностью 0,5-5 мкКи;

2. 40% формалин;

3. Шприцы 10мл -10шт;

4. Раствор диурона;

5. Мембранный фильтр с диаметром пор 0,20 мкм;

6. Фильтровальная бумага;

7. 1-3% раствор HCl;

8. Сцинтилляционные флаконы;

9. Сцинтилляционная жидкость ЖС-106;

10. Сцинтилляционная смесь (толуол : метанол - 85 : 25, 2,5-дифенилоксазол (ППО) - 6 г/л, 1,4-бис-2-(5-фенилоксазол) бензол (ПОПОП) - 100 мг/л);

11. склянки объемом 50-200 мл с притертой пробкой;

12. темный мешок.

Титриметрический метод. В склянки объемом 50-200 мл набирают воду доверху, плотно закрывают притертой пробкой и помещают в темный мешок. Параллельно в этой же воде сразу определяют содержание углекислоты.

Флаконы с водой устанавливают на горизонтах отбора проб и, привязав к тросу, инкубируют 1-10 суток. Затем в опытных флаконах определяют содержание углекислоты.

По формуле (табл.1) определяют скорость темновой фиксации углекислоты.

Радиоизотопный метод. 0,1 мл раствора ¹⁴С-бикарбонат натрия вводят в пенициллиновый флакон с пробой. Инкубацию от 2 до 72 ч проводят на месте отбора проб. Затем фиксируют 0,2 мл 40% формалином.

Обработку пробы проводят в лаборатории, где определяют радиоактивность биомассы и экзометаболитов.

4. Определение скорости аэробной деструкции

Аппаратура, материалы, реактивы:

1. склянки объемом 50-200 мл с притертой пробкой;

2. темный мешок;

3. Веревка;

Определение скорости аэробной деструкции в воде. В склянки объемом 50-200 мл набирают воду доверху, плотно закрывают притертой пробкой и помещают в темный мешок.

Параллельно в этой же воде сразу определяют содержание растворенного кислорода.

Склянки с водой устанавливают на горизонтах отбора проб и, привязав к тросу, инкубируют 1-10 суток. Затем в опытных склянках определяют содержание кислорода. По формуле (табл. 1) определяют скорость аэробной деструкции.

Определение скорости аэробной деструкции в осадках. В 4 стеклянные трубки набирают донные осадки (5-10 см) с водой. Трубку затыкают с двух сторон резиновыми пробками. В воде одной трубки сразу определяют содержание растворенного кислорода. Остальные трубки закладывают в водоем (желательно) на место отбора проб. Инкубируют 2-10 суток и определяют в воде над илом содержание растворенного кислорода. По разнице содержания кислорода до и после инкубации определяют скорость аэробной деструкции.