8. Дайте характеристику общеприменимым питательным средам?

Мясопептонный бульон (МПБ) - жидкая питательная среда, прозрачная. Исходным материалом для данной среды служит мясная вода: свежее (парное) нежирное говяжье мясо освобождают от костей, жира, фасций и сухожилий, пропускают через мясорубку или нарезают мелкими кусочками, заливают дистиллированной водой в соотношении 1:2 (на 1 кг мяса 2л воды); экстрагируют 20-24 ч, затем варят 1,5 - 2 ч, выкипающее количество жидкости доливают дистиллированной водой до первоначального объема, фильтруют в бутыли или колбы, закрывают ватно - марлевыми пробками и стерилизуют в автоклаве при 1 атм 30 мин. Стерилизованная мясная вода может сохранятся длительное время в сухом, темном прохладном месте.

Для приготовления МПБ к 1 л мясной воды добавляют 1 % пептона и 0,5 % х.ч. NaCl. Для культивирования многих групп бактерий требуется слабощелочная среда (рН 7,2-7,6). Так как мясная вода имеет слабокислую реакцию, при изготовлении МПБ после кипячения (растворения) пептона и NaCl бульон подщелачивают (добавляют небольшое количество 10 - 15% - ного раствора КОН или NaОН), кипятят 2 - 3 мин, проверяют рН электропотенциометром или колориметрически компаратором Михаэлиса.

Мясопептонный агар (МПА) - плотная питательная среда. К МПА добавляют 2-3 % промытого мелко нарезанного агар-агара (безазотистое органическое вещество, получаемое из морских водорослей), нагревают до расплавления агара, доводят до кипения, в горячем виде проверяют рН, затем, если необходимо, устанавливают до нужного уровня, фильтруют через ватно-марлевый фильтр. Чтобы агар не уплотнился, фильтрацию проводят в аппарате Коха при 100 0Сили пользуются специальной металической двустенной воронкой, внутр которой (между стенками) заливается горячая вода. Фильтрованный горячий агар разливают по пробиркам и колбам, стерилизуют 20-30 мин в автоклаве при 1 атм. После стерилизации пробирки с расплавленным МПА раскладывают в наклонном положении, чтобы конец с пробиркой был выше другого, оставляют при комнатной температуре, среда уплотняется, становится твердой. Получается скошенная поверхностьагара, удобная для посева бактерий. Полужидкий мясо-пептонный агар (ПМПА) готовят так же, как МПА, лишь с той разницей, что к МПБ добавляют 0,25 % агара. Кипятят при помешивании до полного расплавления, устанавливают Рн 7,4-7,6, фильтруют в горячем виде, стерилизуют в автоклаве.

9. Дайте характеристику специальным питательным средам?

Мясопептонная желатина (МПЖ) к МПБ добавляют 10-20 % желатины, расплавляют ее и в горячем виде устанавливают реакцию среды, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, разливают в стерильные пробирки, стерилизуют текучим паром дробно.

Сахарный (глюкозный) МПБ. К обычному МПБ добавляют 1-2 % глюкозы, разливают в стерильные пробирки и колбочки, стерилизуют текучим паром дробно или автоклавируют при 0,5 атм. 20 мин.

Сахарный МПА. К расплавленному и остуженному МПА добавляют 1-2 % глюкозы, разливают в горячем виде, стерилизуют так же, как и глюкозный МПБ.

Кровяной МПА. Асептично полученную дефибринированную кровь лошади (или барана) добавляют к расплавленному и остуженному МПА, осторожно перемешивают врашением колбочки, затем разливают в стерильные чашки Петри. Агар, остывая, уплотняется, чашки ставят в термостат дном вверх для подсыхания. Чтобы получить дефибринированную кровь, кровь берут из яремной вены иглой в стерильный флакон (или колбочку) со стеклянными (фарфоровыми) бусами или шариками, встряхивают осторожно вращательными (круговыми) движениями 15-20 мин, предотвращая свертывание. Фибрин осаждается на бусах.