Физические свойства ликвора

Цвет. Желтый цвет (ксантохромия), а также буровато‑коричневый бывает следствием наличия продуктов распада гемоглобина. Различают застойную и геморрагическую ксантохромию. Застойная ксантохромия – результат замедления тока крови в сосудах мозга, что приводит к проникновению плазмы в ликвор. Геморрагическая ксантохромия обусловлена попаданием крови в ликворное пространство (старым кровоизлиянием) и сочетается с эритрохромией. Очень редко желтая окраска может быть обусловлена приемом лекарственных веществ, например пенициллина.

Красный цвет придает ликвору примесь неизмененной крови (эритрохромия), которая может быть результатом кровоизлияния.

Зеленоватая окраска ликвора может возникать при окислении билирубина в биливердин или при примеси гноя, в последнем случае ликвор становится мутным. Мутность спинномозговой жидкости зависит от присутствия большого количества форменных элементов, фибриногена, микроорганизмов.

Фибринозная пленка образуется в ликворе при большом содержании фибриногена. Следует иметь в виду, что фибриновая пленка выпадает только на поверхности жидкости, образуя мешочек, наполненный жидкостью. При микроскопическом исследовании в свернувшемся фибрине можно видеть клеточные элементы, а при туберкулезном менингите иногда обнаружить микобактерии туберкулеза (см. табл. 3).

Таблица 3

Биохимический состав ликвора

Определение белка в ликворе

Унифицированный метод определения белка с сульфосалициловой кислотой и сульфатом натрия

Принцип. Интенсивность помутнения при коагуляции белка сульфосалициловой кислотой пропорциональна его концентрации.

Реактивы:

1) 6 %‑ный раствор сульфосалициловой кислоты;

2) 14 %‑ный раствор безводного сульфата натрия. Для анализа используют свежеприготовленную смесь равных объемов этих реактивов (рабочий раствор);

3) стандартный раствор альбумина – 1 %‑ный раствор: 1 г лиофилизированного альбумина (из человеческой или бычьей сыворотки) растворяют в небольшом количестве 0,9 %‑ного раствора хлорида натрия в колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствором хлорида натрия до метки. Реактив нестойкий, поэтому для стабилизации к стандартному раствору прибавляют 1 мл 5 %‑ного раствора азида натрия (NaNз). При этом с условием хранения в холодильнике реактив годен к употреблению в течение 2 месяцев; 1 мл раствора содержит 10 мг альбумина;

4) 0,9 %‑ный раствор хлорида натрия.

Необходимое оборудование: фотоэлектроколориметр.

Ход реакции. В пробирку наливают 5 мл свежего рабочего раствора и 0,5 мл ликвора и перемешивают. Через 10 мин. интенсивность помутнения определяют на фотоэлектроколориметре в кювете с длиной оптического пути 1 см против контроля, длина волны 410–480 нм (сине‑фиолетовый светофильтр). В качестве контроля вместо реактива используется 0,9 %‑ный раствор хлорида натрия. Расчет ведется по калибровочному графику. Построение калибровочного графика: из стандартного раствора готовят разведения и обрабатывают их, как опыт. В 5 пробирок вносят соответственно 0,05; 0,1; 0,2; 0,5 и 1 мл стандартного раствора альбумина и в каждую из них добавляют до объема 10 мл 0,9 %‑ного раствора хлорида натрия. Концентрация белка в этих растворах составляет соответственно 0,05; 0,1; 0,2; 0,5 и 1 г/л.

Перед опытом рекомендуется поставить реакцию Панди (качественную пробу на белок), и если результат реакции характеризуется как 3+ или 4+ – значит, белка много. Нормальное содержание белка в ликворе из желудочков мозга 0,12– 0,2 г/л, из большой цистерны – от 0,1 до 0,22 г/л, при люмбальной пункции – от 0,22 до 0,33 г/л.

Повышение содержания белка отмечают при нарушении гемодинамики, органических поражениях ЦНС и оболочек мозга, воспалительных процессах. Наиболее характерно увеличение концентрации белка для экстрамедуллярно расположенных опухолей спинного мозга. Пониженное содержание белка в ликворе наблюдают при гиперсекреции ликвора и гидроцефалии.

Белок спинномозговой жидкости состоит из альбуминов и глобулинов, отношение глобулинов к альбуминам колеблется в пределах 0,2–0,3.

Унифицированный метод определения глобулинов осаждением карболовой кислотой (реакция Панди)

Принцип. Реакция основана на осаждении глобулинов насыщенным раствором карболовой кислоты.

При положительном результате в месте соприкосновения реактива со спинномозговой жидкостью возникает молочно‑белое облачко, переходящее в муть. Для обозначения результатов реакции Панди используется система четырех плюсов: слабая опалесценция – 1+, заметная опалесценция – 2+, умеренное помутнение – 3+, существенное помутнение – 4+.

Необходимо помнить, что реакция Панди осаждает такие белковые фракции, которые остаются не осажденными в реакции Ноне – Апельта, поэтому рекомендуется ставить обе реакции одновременно.

Способ Стольникова (см. табл. 4)

Таблица 4