3. Завдання для закріплення засвоєного матеріалу:

1. Замалювати схематично процеси трансформації, трансдукції і кон’югації.

4. Завдання для самостійної роботи на занятті:

1. Виконати досліди по рекомбінативній мінливості мікроорганізмів (трансформації, трансдукції, кон’югації).

2. Врахувати результати дослідів по вивченню дії високої температури і фенолу на мікроорганізми.

4. Інструкція до практичної роботи:

1. Дослід трансформації.

Чашка з середовищем Ендо умовно ділиться на дві частини. На одну части­ну чашки бактеріологічною петлею висівають бульйонну культуру E. coli, не здатної розщеплювати лактозу (E. coli lac^-). До пробірки з бульйонною культурою E. coli lac^- додається вільна ДНК E. coli лактозопозитивної (E. coli lac⁺). Цю суміш поміщають на 30 хв. в термостат при 37°С, після чого виконують посів на другу половину чашки. Результат враховують після інкубації чашки в термостаті при 37°С протягом 24 годин.

2. Дослід трансдукції.

Чашка з середовищем Ендо умовно ділиться на дві частини. На одну части­ну чашки бактеріологічною петлею висівають бульйонну культуру E. coli, не здатної розщеплювати лактозу (E. coli lac^-). До пробірки з бульйонною культурою E. coli lac^- додається колі-фаг, що містить lac-ген (ген лактази) кишкової палички. Цю суміш поміщають на 30 хв. в термостат при 37°С, після чого виконують посів на другу половину чашки. Результат врахо­вують після інкубації чашки в термостаті при 37°С протягом 24 годин.

3. Дослід кон’югації.

Для проведення досліду необхідно:

1. Селективне середовище з стрептоміцином у чашці Петрі.

2. Бульйонна культура E. coli Hfr⁺, стрептоміциночутлива прототроф (донор).

3. Бульйонна культура E. coli F^-, стрептоміцинорезистентна ауксотроф (реципієнт).

Чашка з селективним поживним середовищем із стрептоміцином ділиться на три сектори. На два сектори виконують посів первинних культур (E. coli Hfr⁺ і E. coli F^-). Культури зливають в одну пробірку і поміщають на 30 хв. в термостат при 37°С, після чого виконують посів на третій сектор. Результат враховують після інкубації чашки в термостаті при 37°С протягом 24 годин.

6. Матеріальне забезпечення, наглядність заняття:

1. Таблиці.

2. Чашки з середовищем Ендо.

3. Чашки з селективним середовищем із стрептоміцином.

4. Культура E. coli lac^.

5. ДНК E. coli lac⁺.

6. Бактеріофаг E. coli з геном лактази.

7. Культура E. coli Hfr⁺, стрептоміциночутлива прототроф.

8. Культура E. coli F^, стрептоміцинорезистентна ауксотроф.

9. Термостат.

10. Посіви, виконані на попередньому занятті.

VIІ. Джерела навчальної інформації.

1. Література теоретична:

1. Медична мікробіологія, вірусологія, імунологія / За ред. В.П.Широбокова.-Вінниця: Нова книга, 2011.

2. Пяткін К.Д., Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія.-Київ: Вища школа, 1992.

3. Крок-1. Загальна лікарська підготовка.-Київ: Медицина, 2004.

4. Конспекти лекцій.

2. Література практична:

1. Климнюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С., Широбоков В.П. Практична мікробіологія.-Тернопіль: Укрмедкнига, 2004.

2. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии / Под ред. Л.Б.Борисова.-Москва: Медицина, 1984.

МЕТОДИЧНУ ВКАЗІВКУ ПІДГОТУВАЛА ас. Янків О.О.

МЕТОДИЧНА ВКАЗІВКА ЗАТВЕРДЖЕНА

НА ЗАСІДАННІ КАФЕДРИ МІКРОБІОЛОГІЇ

ПРОТОКОЛ № 8 від 04.01.2012 р.

Завідувач кафедри мікробіології

д.мед.наук Р.В.Куцик