10. Изучите схемы лабораторной диагностики чумы, туляремии, бруцеллеза и сибирской язвы.

Реакция Райта

Реакция Райта – один из основных методов диагностики бруцеллеза во всех странах мира. Она проста по технике постановки, достаточно чувствительна и специфична, становится положительной в начале заболевания, достигает диагностического титра на второй неделе и остается положительной в течение 1-4-х лет. А следовательно, ее можно использовать как для диагностики острого периода заболевания, так и для постановки ретроспективного диагноза. Реакцию ставят по классической схеме в пробирках методом одинаковых объемов.

Сыворотку больного и диагностикум разводят изотоническим раствором хлорида натрия, к которому предварительно добавляют 0,5 % фенола. При постановке реакции Райта используют бруцелллезный диагностикум, который является 10 млрд взвесью убитых нагреванием и фенолом бруцелл, окрашенных анилиновым красителем в синий цвет. Перед постановкой реакции его разводят в 10 раз. Пробирки встряхивают и ставят в термостат на 18-20 ч, потом еще выдерживают 2 ч при комнатной температуре.

Учитывают результаты обычным способом или по 50 % агглютинации (2+). Серийные разведения 50 % агглютинации 1:50, 1:100-1:800 свидетельствует о том, что 1 мл сыворотки больного содержит соответственно 50, 100 ... 800 МЕ антител. Интенсивность реакции оценивают по такой схеме: 50 МЕ – реакция сомнительная, 100-200 МЕ – положительная, 400-800 МЕ – резко положительная. Реакция Райта может быть положительной у переболевших ранее и у вакцинированных, поэтому при развитии заболевания ее ставят повторно и учитывают нарастание титра антител.

Реакция Хэддельсона.

При диагностике бруцеллеза часто используют микрометод реакции агглютинации на стекле – пластинчатую реакцию Хэддельсона, особенно при массовых обследованиях на бруцеллез. Для этого хорошо обезжиренную стеклянную пластинку 8*12 см разделяют восковым карандашом на 6 одинаковых квадратов. Неразведенную сыворотку больного и бруцеллезный диагностикум наносят при помощи пипетки в соответствии со схемой:

Компоненты	Номера квадратов
	1	2	3	4	5 КС	6 КД
Изотонический раствор					0,03	0,03
Сыворотка больного	0,08	0,04	0,02	0,01	0,02
Диагностикум	0,03	0,03	0,03	0,03		0,03

КС – контроль сыворотки, КД – контроль диагностикума.

К апли сыворотки и антигена смешивают аккуратным покачиванием пластины или стеклянной палочкой, слегка подогревают над пламенем горелки. Максимальный срок учета результатов – 8 минут. При положительной реакции в смешанных каплях появляются хлопья, а жидкость становится более-менее прозрачной.

Агглютинация во всех 4-х квадратах оценивается как резко положительная, в 3-й и 4-й дозах – положительной, во 2-й дозе – слабо положительной и лишь в 1-й дозе – сомнительной. Отсутствие агглютинации со всеми дозами сыворотки оценивается как отрицательная реакция.