
- •Методичні вказівки до виконання лабораторної роботи № 1 мікроскоп та техніка мікроскопіювання. Препарати мікроорганізмів
- •Загальні правила роботи в мікробіологічній лабораторії
- •Лабораторна робота № 1 тема: мікроскоп та техніка мікроскопіювання. Препарати мікроорганізмів
- •1. Мета роботи:
- •2. Самостійна підготовка до заняття
- •4. Запитання та завдання для самоперевірки.
- •5. Теоретичне обґрунтування мікроскоп і техніка мікроскопування
- •Світлооптична мікроскопія Пристрій мікроскопа
- •Основні правила роботи з мікроскопом (загальні положення).
- •Мікроскопія у темному полі
- •Фазово-контрастна мікроскопія
- •Люмінесцентна (флуоресцентна) мікроскопія
- •Методи дослідження мікроорганізмів у светлопольному мікроскопі
- •7. Практичні завдання
- •8. Завдання до виконання лабораторної роботи
- •9. Література
- •Методичні вказівки до виконання лабораторної роботи № 1 мікроскоп та техніка мікроскопіювання. Препарати мікроорганізмів
Основні правила роботи з мікроскопом (загальні положення).
Місце для мікроскопа вибирається подалі від прямого сонячного світла. Робота на столі з темною поверхнею сприяє меншому втомлению очей.
Рекомендується дивитися в окуляр лівим оком, не закриваючи правого. У разі роботи з бінокулярної насадкою спочатку регулюється відстань між окулярами відповідно до відстані між очима спостерігача так, щоб поля зору обох окулярів злилися в одне.
Переносити мікроскоп необхідно двома руками: однією тримати штатив, інший - підставку мікроскопа. Слід оберігати мікроскоп від поштовхів, зіткнення з сильнодіючими речовинами типу кислот, лугів. Не рекомендовано виймати окуляр з труби, щоб не забруднювати пилом трубу і об'єктиви. Під час роботи бажано захищати мікроскоп від дихання, так як конденсація парів веде до його псування.
Зауваження до роботи з імерсійною системою мікроскопа. При роботі з імерсійним об'єктивом (V = 90х *. А = 1,25) необхідно встановити дзеркало плоскою стороною і підняти конденсор.
Треба наносити краплю імерсійною рідини (кедрової олії) на препарат не розмазуючи її по склу. Занурювати у іммерсійну рідину можна тільки імерсійні об'єктиви (не сухі!). За зануренням фронтальної лінзи в іммерсійну рідину слід спостерігати збоку.
Після орієнтовної установки на фокус макрометрічним гвинтом в процесі роботи необхідно завжди користуватися мікрометричним гвинтом.
Іммерсійну рідину (кедрова олія) рекомендується зберігати в спеціальних маслянках, що складаються з флаконів, герметично вставлених один в іншій. У зовнішній флакон наливають ксилол або очищений бензин для очищення об'єктивів від масла (по закінченні роботи), у внутрішній - кедрове масло. Флакон з маслом закривається герметичною довгою (до дна флакона) скляною паличкою, якою наносять краплю олії на препарат.
Установка освітлення. Зручніше користуватися штучним джерелом світла - він більш постійний, ніж денний, і краще висвітлює об'єкт, що важливо при роботі з сильними об'єктивами (90х).
Мікроскопія у темному полі
Метод спостереження в темному полі, розроблений австрійським ученим Зігмонді, дає можливість підвищити роздільну здатність мікроскопа в 10 разів. В основі методу лежить явище Тіндаля - освітлення об'єкта косими променями світла. Ці промені, не потрапляючи в об'єктив, залишаються невидимими для ока, тому поле зору виглядає темним. У той же час оптично неоднорідні клітини, які знаходяться в полі зору і потрапляють в сферу проходження променів, відхиляють їх в такій мірі, що промені потрапляють в об'єктив. Тоді спостерігач бачить в темному полі інтенсивно світяться об'єкти, оскільки промені світла йдуть саме від них.
Метод використовується з метою дослідження живих клітин мікроорганізмів. Особливо він цінний для функціонально-морфологічного вивчення великих об'єктів типу дріжджів. Цитоплазма дріжджових організмів (за умови яскравого джерела світла і гарного апохроматичного иммерсионного об'єктива) слабо і рівномірно сяє. На її тлі чітко розрізняються чорні оптично порожні вакуолі. Краплі жиру виділяються як сильно блискучі гранули. Протопласт клітин, що гинуть, сяє молочно-білим кольором.