1.6 Обнаружение отпечатков пальцев на бумаге

Кожа человека практически всегда покрыта тонким слоем пота и кожного сала, выполняющим защитную функцию и усиливающие барьерные свойства кожи. Так же кожа (а именно её наружный слой – эпидермис) покрыта слоем омертвевших клеток, содержащих большое количество белка. При контакте кожи человека с окружающими предметами небольшие количества пота, кожного сала и омертвевших клеток неизбежно остаются на них. Обнаружение таких следов, оставленных пальцами рук человека, широко используется в криминалистике.

Для обнаружения отпечатков пальцев на бумаге и документах с успехом может быть использована нингидриновая реакция. В результате которой следовые количества белков кожи окрашиваются в синий цвет.

Ход работы:

Вытянуть большой палец (или любой другой по выбору) правой руки испытуемого, согнув остальные пальцы руки в кулак. Помощник, тремя пальцами левой руки (большим, указательным, средним) берет нужный палец руки испытуемого у основания (ближе к ладони), а одноименными пальцами своей правой руки берет верхнюю фалангу этого же пальца испытуемого. Затем палец испытуемого боковой стороной ногтевой фаланги пальца руки кладется на край листа бумаги (использовать бумагу для принтера) и прокатывается по ней слева направо, от одной кромки ногтя до другой.

Бумагу с отпечатками пальцев обрызгивают 0,5 %-ным раствором нингидрина в ацетоне из пульверизатора до полного увлажнения. Обрызганный лист поместить в поток теплого (60-80С) воздуха на 5 мин до появления синих отпечатков пальцев.

1.7 Биуретовая реакция

Биуретовая реакция открывает наличие пептидной (амидной) связи. Так как аминокислоты в белках соединены пептидными связями, все белки дают положительную биуретовую реакцию. В результате прибавления к раствору белка едкой щелочи и солей меди (II) раствор приобретает фиолетовый цвет с красным или синим оттенком, зависящим от количества пептидных связей в молекуле белка. Такую реакцию дают все белки, а также продукт их неполного гидролиза – пептоны и полипептиды, содержащие не менее двух пептидных связей.

Группа, образующая пептидную связь (-CO-NH-), в щелочной среде претерпевает таутомерные превращения и присутствует в своей енольной форме (тогда как в кислой и нейтральной среде пептидная связь находится в кето-форме).

Ионы меди образуют ковалентные и дополнительные координационные связи с атомами азота, находящимися в составе пептидной связи, путем использования их не поделенных электронных пар. Возникающий таким образом комплекс очень стабилен и окрашен в интенсивный синий цвет. По другой гипотезе при избытке щелочи происходит диссоциация ОН-группы, появляется отрицательный заряд, с помощью которого кислород взаимодействует с медью, возникает солеобразная связь. Правда, вероятно, лежит где-то посередине.

Схематично реакцию можно представить так:

Интенсивность синей окраски зависит от концентрации белка и количества медной соли в растворе. По этой причине биуретовая реакция используется для количественного определения белков.

Ход работы:

В одну пробирку добавляют 0,5 мл 1%-ного раствора яичного белка, в другую – 0,5 мл 1%-ного раствора желатина. В каждую пробирку добавляют по 1 мл 10%-ного раствора гидроксида натрия и по 100 мкл 1%-ного раствора сульфата меди. В той и другой пробирке появляется красно-фиолетовое (или сине-фиолетовое) окрашивание.

Вопросы для самоподготовки

В чем суть биуретовой реакции, что она позволяет обнаружить?

Каково практическое значение биуретовой реакции?

Что обнаруживают с помощью нингидриновой реакции?

Практическое значение нингидриновой реакции?

В основе каких качественных реакций лежит реакция нитрования ароматических аминокислот?

Что обнаруживается с помощью реакции Сакагучи?

С помощью каких реакций можно обнаружить ароматическую аминокислоту триптофан?

Что открывают с помощью реакции Фоля?

Почему разные белки по разному ведут себя в реакции Фоля?