16. Механизм размножения бактерий.

Скорость роста и размножения бактерий и других микроорганизмов зависит от условий окружающей среды. Температура, свет, наличие кислорода, влажность и рН - фактор (уровень кислотности или щелочности) наряду с наличием питания влияют на скорость развития бактерий.

Бактерии размножаются простым делением (вегетативное размножение) и способны к половому процессу. Бесполое размножение сводится к образованию двух одинаковых дочерних клеток (бинарное деление). Скорость роста и размножения клеток различна для разных видов бактерий и зависит от температуры, питательной среды (доступности питательных веществ), концентрации ионов водорода и других ионов. Важным фактором является концентрация кислорода и углекислого газа.

17. Методы выделения чистых культур аэробных бактерий. Этапы выделения

17.Выделение чистой культуры аэробных бактерий используется в лабораторной практике для микробиологической диагностики инфекционных заболеваний. Чистой культурой называется популяция бактерий одного вида, выращенная на питательной среде. Выделение чистой культуры аэробных бактерий достигается механическим разобщением исследуемого материала при посеве на питательные среды в присутствии кислорода. Для выделения чистых культур аэробов используется метод Дригальского, Шукевича и биологический метод.

Метод Дригальского включает три этапа. Первый этап: из исследуемого материала готовят мазок, окрашивают его по Граму и др. методом и микроскопируют. Материал наносят петлей на всю поверхность питательной среды. После посева петлю стерилизуют, чашку подписывают на донышке и ставят вверх дном в термостат при температуре 37 на 18-24 часа. Второй этап: на следующий день посевы изучают на изолированные колонии и описывают характер роста. Изучают морфологию бактерий путем приготовления мазка, окрашенного по Граму. Далее для выделения чистой культуры производят пересев колонии в пробирку со скошенным МПА. Пробирки помещают термостат при температуре 37 на 18-24 часа. Третий этап: отмечают рост выделенной чистой культуры. При микроскопическом исследовании мазка из чистой культуры в нем обнаруживаются морфологически и тинкториально однородные клетки.

Метод Шукевича осуществляется путем засевания исследуемого материала в конденсационную воду со скошенным МПА. Бактерии ,обладающие ползучим ростом из конденсационной воды выползают на поверхность агара. На следующий день проверяют на чистоту выделенной культуры. Из верхнего налета делают мазок, окрашивают его по Граму и микроскопируют.

Для выделения чистой культуры микробов с трудом культивируемых на питательных средах используют биологический метод-заражение наиболее восприимчивых к данному виду возбудителя животных. После гибели или появления признаков заболевания животных забивают и производят посев крови и органов на питательные среды. Далее исследование проводят по методу Дригальского.

18. Методы выделения чистых культур анаэробных бактерий. Этапы выделения

Выделение чистых культур анаэробны бактерий

В практических лабораториях обычно для. выделения чистых культур анаэробов используются методы Цейселера или Вейнберга. Процесс выделения чистой культуры можно разделить на несколько этапов.

Метод Цейселера. Первый этап: из исследуемого материала готовят мазок, окрашивают по Граму и микроскопируют. При обнаружении подозрительных на анаэробы микробов исследуемый материал засевают на среду Китта-Тароцци. Пробирки заливают вазелиновым маслом или парафином и ставят в термостат на 18-24 часа при температуре 37 гр. Далее разводят в пробирках с расплавленным и остуженным сахарным МПА. Засеянные пробирки охлаждают, агар застывает и фиксирует микробы в глубине столбика. Пробирки помещают в термостат на 18-24 часа при температуре 37 гр.Второй этап: при обнаружении подозрительных колоний в столбике ,делают распил пробирки, колонию отбирают и делают пересев на среду Китта-Тароцци. после чего пробирки помещают в термостат на 18-24 часа при температуре 37 гр. Третий этап: через сутки проверяют на чистоту выделенной культуры.

Метод Вейнберга

Первый этап проводят так же, как и при методе Цейселера. Затем исследуемый материал, подращенный на среде Китга-Гаронци, последовательно разводят в пробирках с расплавленным и остуженным сахарным МПА. После чего его переносят в 3-5 пастеровских пипетки (трубки Виньяла). Засеянные пробирки быстро охлаждают холодной водой, при этом агар застывает и фиксирует разобщенное положение отдельных микробных клеток в глубине столбика агара Пробирки термостатируют при температуре 37 "С 18-24 ч.

Второй этап. Выросшие в узких пробирках колонии изучают с помощью лупы. На месте отобранной подозрительной колонии делают распил оробирки. колонию отбирают и пересевают на среду Китта-Тароцци. 5 (робиркн культивируют в термостате 18-24 ч при температуре 37 "С

Третий этап. Через сутки проверяют чистоту выделенной культуры.