7. Фотометрическое определение металлов. Анализ многокомпонентных поглощающих систем.

Если имеется смесь двух веществ или более и нет такой длины волны, при которой поглощается лишь одно вещество, то есть все компоненты смеси имеют близкую степень поглощения, то существует принципиальная возможность количественного анализа этой смеси. Для этого надо выбрать одну длину волны, при которой одно вещество поглощает хуже, а другое лучше и вторую длину волны, при которой наблюдается обратная картина. Если трехкомпонентная система, то надо выделить три длины волны, четырехкомпонентная – четыре и т.д.

Выбрав эти длины волн, определяют на каждой длине волны оптическую плотность вещества. Dλ1 и Dλ2, если три вещества, то и Dλ3. Чтобы проанализировать такую смесь, нам необходимо заранее знать  определяемых веществ при этих длинах волн. Далее составляется система двух или более уравнений, куда входят i. Это величина постоянная, то есть кюветы берут одинаковые, и концентрации первого и второго вещества также величины постоянные.

Таким образом, получаем систему двух уравнений с двумя неизвестными. Далее проводим расчет.

8. Фотометрические реакции и требования, предъявляемые к ним.

99 % Всех соединений в фотометрии переводят в окрашенные соединения с помощью химических реакций.

Для этой цели применяют ряд химических реакций:

• комплексообразования

• органические реакции различных типов

• экстракционно-фотометрические реакции

• окисления-восстановления

Фотометрические реакции должны протекать быстро, избирательно, количественно: их проводят в условиях (рН раствора, концентрации реагентов, время реакции, температура), обеспечивающих полноту превращения определяемого вещества. Кроме того, светопоглощение образующихся или разрушающихся в результате фотометрической реакции веществ должно подчиняться основному закону светопоглощения в широком интервале концентраций определяемого вещества и быть постоянным во времени. При выборе фотометрической реакции основное внимание уделяют таким характеристикам, как чувствительность и селективность определения.

9 . Устройство и принцип действия фотоэлектроколориметров и спектрофотометров.

колориметр. 1 – источник видимого излучения; 2 – экран со щелью; 3 – светофильтр; 4 – кювета с анализируемым раствором; 5 – фотоэлемент; 6 – фотоэлектронный усилитель,7- стрелочный прибор

С пектрофотометр:

1 – отражатель, 2 – источник света, 3 – светофильтр, 4 – подвижная щель, 5 – фотоэлемент сравнения, 6 – рабочий фотоэлемент

В приборе происходит сравнение окраски фонового раствора и анализируемого раствора. Связь между светопропусканием и оптической плотностью выражается законом Бугера Ламберта-Бера

D = lgI_о/I = Cl,

где I_о – интенсивность падающего света

I - интенсивность пропускаемого света

 – коэффициент молярного светопоглощения.

С – концентрация в моль/л

l – длина поглощающего слоя в см.

Все эти величины имеют размеры, но Cl – величина безразмерная

Это уравнение является основой для количественного анализа. Величины  табулированы, l – измерены (указан на кювете).

10. Молекулярно-абсорбционный анализ в биохимических исследованиях.

Современная клиническая диагностика базируется на различного рода исследованиях: биохимических, гематологических, иммунохимических, бактериологических.

В реализации первых трех направлений ведущая роль принадлежит химическим либо биохимическим методикам.

Биохимические исследования выполняются в лабораториях медицинских учреждений всех уровней и включают определение основных компонентов крови: глюкозы, мочевины, белка, билирубина, креатинина, холестерина, липидов, ферментов (аланина и аспарагин-аминотрасфераз и др.), ионов электролитов (хлоридов, фосфатов, калия, натрия, кальция, магния, железа и др.).

Осуществляются биохимические исследования преимущественно с помощью химических и физико-химических методов: фотометрия, ионометрии, титриметрии, атомно-эмиссионного анализа.

Гематологические исследования включают определение содержания гемоглобина (осуществляется при помощи фотометрирования цианида гемоглобина после соответствующего преобразования), а также ферментных элементов крови: эритроцитов, лейкоцитов, и.т.д.

Такие исследования осуществляются в современных медицинских учреждениях при помощи специальных анализаторов - счетчиков, в которых микропробы крови после химической пробоподготовки пропускаются через микрокапилляры, где и происходит отсчет. Такие определения в отличие от микроскопических исследований легко автоматизируются.