Вопрос 2

Диагностика болезней.

Методы диагностики неинфекционных болезней. Макроскопический, микроскопический биологический методы диагностики инфекционных болезней. Методы диагностики грибных, бактериальных болезней растений. Методы диагностики вирусных и микоплазменных болезней растений (серологический, электронно-микроскопический, молекулярно-биологические методы, метод растений-индикаторов и др.). Методы учета болезней и оценка их вредоносности.

Тест-системы для диагностики инфекционных заболеваний растений методом ПЦР

при определении заболевания наряду с внешним осмотром необходимы допюлнительные методы, уточняющие (или опровергающие) предварительный диагноз.

Применяют следующие методы диагностики вирусных заболеваний и вызывающих их вирусов: 1) установление инфекционности заболевания; 2) серологический метод; 3) метод растений-индикаторов; 4) электронная микроскопия; 5) метод внутриклеточных включений; 6) метод люминесцентного анализа; 7) анатомический метод; 8) химический метод. Основными из них являются первые четыре метода.

Для всех вирусов, которые удается передать соком на травянистые индикаторы, очень важными показателями при диагностике вирусов являются определение таких физических свойств вируса, как температура инактивации вируса (предельно высокая температура, при которой вирус инактивируется in vitro в течение 10 мин); границы разведения (степень предельного разведения сока больного растения, при которой еще сохраняется его инфекционность); длительность сохранения инфекционности сока при 20 °С.

Так, для огуречного вируса 2 (Cucumis virus 2) температура инактивации 90 °С, предельное разведение сока 1 : 1 000 000, длительность сохранения инфекционности сока при комнатной температуре более года, а для огуречного вируса 1 (Cucumis virus 1) температура инактивации 60—73 °С, граница разведения сока 1 : 1000, длительность сохранения инфекционности сока 3—6 дней.

Установление инфекционности заболевания. Все вирусные заболевания заразны, инфекционны. В зависимости от вида вируса как причины заболевания и его свойств (стойкости вируса, способов его распространения в естественных условиях и т. д.) для установления инфекционности применяют следующие способы заражения растений.

Макроскопический метод - распознавание болезни по внешним признакам, видимым невооруженным глазом или при помощи лупы, бинокля в полевых условиях. Необходимое условие применения метода - тщательное обследование большого количества растений, т. к. совокупность всех признаков болезни может встречаться не на всех растениях, или симптомы болезней могут быть не всегда хорошо выражены. К макроскопическим признакам относятся анатомо-морфологические изменения больного растения (раны, трещины, опухоли, изменения окраски коры, древесины или сосудов, деформация различных органов, гниль тканей, смолотечение), мицелий грибов и его видоизменения (шнуры, ризоморфы, склероции, стромы, пленки), спороношения и плодовые тела грибов; экссудат и колонии бактерий; цветковые растения-паразиты; нарушения нормального состояния растений (увядание и полегание всходов, снижение прироста, частичное или полное усыхание кроны, куртинное или сплошное усыхание насаждений).

Микроскопический метод - обнаружение спороношений возбудителей или пораженных тканей растений при исследовании под микроскопом. Он применяется для определения вида возбудителя или установления патогена в тканях растения для обнаружения характерных признаков, присущих патогену (цвет, размер спор, форма и размер сумок и т. д.). По совокупности обнаруженных признаков с помощью определителя устанавливают систематическое положение и вид возбудителя. В некоторых случаях достаточно только установить наличие возбудителя в тканях растения. Для этого под микроскопом исследуют пораженные ткани и по наличию мицелия в клетках или межклеточных пространствах определяют характер болезни (инфекционный или неинфекционньтй). Если спороношения грибов отсутствуют, для постановки точного диагноза используют метод влажной камеры. Он основан на способности мицелия, находящегося внутри тканей растений, во влажных условиях прорастать наружу и образовывать спороношения. Этот метод позволяет в довольно короткий срок получать спороношения возбудителей.

Для выявления скрытой гнили древесины применяют звуковую пробу: при простукивании здоровых и фаутных стволов получается разный звук. Этот метод используют как при определении фаутности деревьев, так и при обследовании зданий на зараженность домовыми грибами. Однако способ простукивания не дает точных результатов, т. к. характер звука зависит не только от наличия гнилей в древесине, но и от др. факторов. В более редких случаях для диагностики болезней древесных растений используют люминисцентный, индикаторный или серологический методы, биофизические исследования.

билет 9