Билет 13

1. В условиях промышленного производства и в аптеках готовят лекарственные средства с лекарственным веществом следующей структуры:

При оценке качества лекарственного вещества в образцах одной серии показатель «Прозрачность и цветность раствора» не отвечал требованиям НД. Дайте обоснование причинам изменения его качества по данному показателю в соответствии со свойствами. Предложите испытания для характеристики его качества.

ОТВЕТ:

Sulfacetamide ( Sodium Sulfacylum solubile, Sulfacylum-natrium ). Сульфацил-натрий ( Сульфацетамид натрия ) фармакопейный препарат пара-Аминобензолсульфонилацетамид-натрий

Описание: белый кристаллический порошок без запаха.

Растворимость: легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте, эфире, хлороформе и ацетоне.

Подлинность: по ГФX 1) препарат даёт характерную реакцию на ароматические первичные амины ( см. Стрептоцид ) и 2) реакцию Б на натрий; 3) 0,1 г препарата растворяют в 3 мл воды и приливают 1 мл раствора сульфата меди; образуется осадок голубовато-зеленоватого цвета, который не изменяется при стоянии ( отличие от других сульфаниламидных препаратов ). ФС предлагает снять УФ-спектр 0,001% раствора препарата в воде, он должен иметь максимум поглощения при 256 нм и минимум при 227нм. При действии уксусной кислотой выделяется белый осадок сульфацетамида, который имеет характерную температуру плавления 1830 С:

Чистота: ГФX предлагает проводить определение прозрачности и цветности раствора, щёлочности. По ФС проверяют на потерю в массе при высушивании, методом ТСХ определяют примеси на пластинках “Силуфол УФ-254” в сравнении с веществом-свидетелем. Пятно должно быть одно. Устанавливается микробиологическая чистота препарата по ГФXI,

Допустимые примеси: хлориды, сульфаты и тяжёлые металлы в пределах эталона.

Количественное определение: по ГФX – нитритометрия. Нефармакопейно – методом нейтрализации как соль сильного основания и слабой кислоты ( титрант – хлороводородная кислота в спирто-ацетоновой среде для предотвращения гидролиза ). Сульфацила-натрия в препарате должно быть не менее 99,0%.

Хранение: список Б; в хорошо укупоренной таре, предохраняющей от действия влаги и света.

Применение: для лечения глазных заболеваний. В.р.д. внутрь – 2,0 г; в.с.д. внутрь 7,0 г.

Форма выпуска: порошок, 20; 30% растворы для закапывания в глаз, мази.

2) В соответствии с химическими свойствами предложите реакции идентификации и методы количественного определения. Напишите уравнения реакций.

ОТВЕТ:

Испытания на подлинность

Имеются групповые и частные реакции на препараты сульфаниламидов. Групповые: 1) Реакция образования азокрасителя – общая реакция на первичные ароматические амины. Если аминогруппа замещена, её гидролизуют кипячением с хлороводородной кислотой;

2) Реакции конденсации – образуют продукты конденсации с 2,4-динитрохлорбензолом в щелочной среде и в кислой среде окрашенные продукты конденсации с ванилином (жёлтое), формальдегидом ( розовое или жёлто-оранжевое ), пара-диметиламинобензальдегидом ( жёлтое );

3) Лигниновая проба – разновидность реакций образования шиффовых оснований; проводится на газетной бумаге или древесине. Первичный ароматический амин взаимодействует с находящимся в составе лигнина сиреневым альдегидом, или ванилином и даёт шиффово основание оранжево-жёлтого цвета;

4) Реакции галогенирования – основаны на активировании бензольного кольца донорской аминогруппой; галогены направляются в орто-положение от аминогруппы (пара-положение уже занято сульфамидной группой). Эти реакции могут использоваться как в качественном, так и количественном анализе;

5) Реакции с растворами солей тяжёлых металлов – некоторые ионы тяжёлых металлов могут замещать атом водорода в сульфамидной группе, и образуют внутрикомплексные соединения;

6) Реакция обнаружения серы – серу можно обнаружить после окисления органической части молекулы концентрированной азотной кислотой ( минерализация ). Далее сульфат-ион обнаруживают реакцией с хлоридом бария;

7) Реакции пиролиза – при термическом разложении в сухой пробирке плавы препаратов приобретают различную окраску, при этом выделяются газообразные продукты;

8) Реакции с нитропруссидом натрия – препараты взаимодействуют с 1% раствором нитропруссида натрия в щелочной среде, а после подкисления реакционной смеси минеральной кислотой дают продукт красно-коричневого цвета, или осадок;

9) Реакции окисления – при этом образуются окрашенные соединения хиноидной структуры (индофенолы). Частные реакции характеризуют строение конкретного препарата по группировкам, входящим в его состав. Например, у натриевых солей препаратов подтверждают наличие иона натрия.

Методы количественного определения

Фармакопея и ФС рекомендуют метод нитритометрии для препаратов. Титрант метода – 0,1 М раствор нитрита натрия; точка эквивалентности устанавливается 1) по внешнему индикатору – йодкрахмальная бумажка; 2) внутренний индикатор – тропеолин 00; смесь тропеолина 00 с метиленовым синим ); 3) потенциометрически.

Метод нейтрализации. Основан на способности сульфаниламидов образовывать соли со щелочами:

Образующаяся соль тотчас подвергается гидролизу, и результаты определения искажаются. Поэтому препараты с константой диссоциации 10-7-10-8 титруют в водно-ацетоновом растворе или в этаноле при индикаторе тимолфталеин, а с константой диссоциации 10-9 только в неводных растворителях. Натриевые соли сульфаниламидов можно оттитровать минеральной кислотой в спирто-ацетоновой среде с индикатором метиловым оранжевым.

Метод броматометрии. Основан на реакции галогенирования сульфаниламидов. Титрант – раствор бромата калия в присутствии бромида калия в кислой среде. При прямом титровании КТТ устанавливается по обесцвечиванию выделяющимся избытком брома индикатора – метилового оранжевого, а при обратном методе – избыток брома определяется йодометрически:

KBrO3 + 5KBr + 6HCl = 3Br2 + 6KCl + 3H2O

Br2 + 2KI = I2 + 2KBr

I2 + 2Na2S2O3 = 2NaI + Na2S4O6

Йодхлорметрия. Метод аналогичен броматометрическому, но йодирование проводят титрованным раствором йодмонохлорида. Его избыток устанавливают йодометрически:

ICl + KI = I2 + KCl

I2 + 2Na2S2O3 = 2NaI + Na2S4O6

Определение по сульфат-иону методом окисления. Минерализуют препарат нагреванием с 30% пероксидом водорода в присутствии следов хлорида железа (III). Образовавшийся раствор содержит в эквивалентном сульфаниламиду количестве сульфат-ион, который определяется гравиметрически или титриметрически раствором хлорида бария.

• Проведите сравнительную характеристику каллусных и суспензионных культур при использовании их в качестве субстрата для получения БАВ биотехнологическими методами.

Культура клеток,тканей и органов растений представляет собой части растений,выращиваемые в асептических условиях на исскуственных питательных средах,и включают:

-калусные культуры на гелеобразной питательной среде

-суспензионные культуры клеток в жидкой питательной среде

-культуру протопластов

-Изолированные органы растений

Твердофазный способ культивирования.Каллусные ультуры

При этом способе культивирования используются твердые питательные среды,содержащие гелеобразный компонент,чаще всего агар-агар как наиболее близкий по природе субстрат растительного происхождения.такая среда имеет вид твердого геля,и каллусные клетки находятся на ее поверхности.

Для получения каллусных культур небольшие фрагменты тканей разных органов высших растений помещают на поверхность питательной среды.через 4-6 недель культивирования экспланта образуется первичный каллус,который необходимо разделить и перенести на свежую питательную среду.каллусная ткань,на твердой питатльной среде,имеет рыхлую аморфную структуру в виде массы тонкостенных клеток белого или желтого цвета.качественнй химический состав каллусной ткани обычно незначительно отличается от соответствующего интактного растения.

При образовании каллуса в культуре IN VITRO происходит неорганизованный рост и их дедифференциация,т.е потеря первоначальной функции,свойственных ткани или органу,из которых был получен каллус. У клеток одиноковые функции,они существуют за счет питательной среды.однако при изменении условий культивирования модно вызвать вторичную дифференциацию и получить целое растение.по сравнению с клетками животных и человека растительные клетки обладают большим преимуществом.они способны в определенных условиях и на соответствующих питательных средах регенерировать целое растение.решающую роль во вторичном образовании органов из изолированных клеток и тканей играет соотношение фитогормонов(ауксинов и цитокинов) и их концентрация в питательной среде.

Глубинное суспензионное культивирование

Для посева в житкую питательную среду необходимо получить посевной материал в виде суспензии клеток.поэтому первичная каллусная ткань,которая используется в качестве посевного материала,должна быть более рыхлой и легко фрагментироваться на отдельные клетки.

В лаб. Условиях для культивирования тканей в жидких питательных средах используют колбы (100-50мл) с небольшим объемом питательной среды.сосуды с суспензией клеток помещают на качалки 100-120 об/мин.в таких условиях обеспечивается аэрация тканей и нарастающая масса клеточных агрегатов распадается на отдельные фрагменты.

Растительные клетки растут и распадаются медленнее,время их удвоения составляет 1-3 суток.поэтому даже при суспензионном культивировании стационарная фаза роста клеток наблюдается через 2-3 недели.истощение питательной среды и накопление продуктов жизнедеятельности клеток определяют необходимость обновления культуральной среды или пресева культуры на свежую питательную среду.

3. Обоснуйте требования к глазным лекарственным формам и условиям их промышленного производства. Укажите критерии выбора вспомогательных веществ, входящих в состав глазных капель, объясните их назначение, приведите примеры.