Интерпретация теста Барра

Число телец Барра = числу хромосом X -1

В норме тельце Барра представлено в одном экземпляре в клетках женщин и отсутствует у мужчин, так как мужчины имеют в кариотипе только одну хромосому X, которая является активной, в то время как в кариотипе женщин 2 хромосомы X, одна из которых инактивируется путем гетерохроматинизации, образуя тельце Барра.

Хотя теоретическая частота хроматина X в клетках слизистой полости рта составляет 100%, практически можно выявить тельце Барра только в 30-40% клеток. Это обусловлено следующими факторами:

- исключением из подсчета центрально расположенных хромоцентров;

- наложением некоторых клеток друг на друга, что затрудняет точный анализ;

- дефектами окрашивания;

- наличием Барр-отрицательных клеток, как следствие нарушений в конденсации хромосомы X;

- другими причинами: возрастом, овариальным циклом, болезнями, приемом некоторых лекарственных препаратов.

В патологических случаях, связанных с нарушением числа хромосом X (дисгенезия гонад), тельце Барра может: выявляться у мужчин (47ДХУ), отсутствовать у женщин (45,Х) или присутствовать в дополнительных экземплярах у обоих полов (полисомии X).

Величина тельца Барра зависит от размеров инактивированной хромосомы X;

Анализ полового хроматина X в мазках периферической крови

Хроматин X можно также выявить в ядрах полиморфноядерных нейтрофилов на препарах окрашенных по MAY-GRUNWALD-GIEMSA, в виде ядерных придатков. Ядерные придатки типа А имеют форму барабанных палочек соединенных нитевидным образованием с одной из долей ядра полиморфноядерного нейтрофила; ядерные придатки типа В, или "сидячие узелки" имеют сходные с барабанными палочками размеры и форму, но связаны непосредственно с ядром.

В норме частота ядерных структур варьирует, в среднем, составляет 38%. На практике на одном препарате должно быть выявлено не менее 6 типичных ядерных придатков для заключения о наличии хроматина X (положительный результат). Вывод об отрицательном тесте на хроматин X делается, если просмотрено не менее 500 нейтрофилов и не выявлено ни одного ядерного придатка.

Интерпретация результатов основана на тех же правилах, что и тест Барра:

Число ядерных придатков = числу хромосом Х – 1

Хроматин Y представляет 2/3 дистального плеча q хромосомы Y и в норме выявляется в интерфазных клетках мужчин. Для окрашивания используется флуоресцентный краситель куинакрин. Микроскопический анализ проводят в ультрафиолетовом свете, используя люминесцентный микроскоп. Хроматин Y выявляется в виде светящегося (флюоресцирующего) образования, в связи, с чем и был назван тельцем F. Тельце может быть расположено свободно или прикреплено к ядерной мембране;

Интерпретация результатов теста F:

Число телец F = числу хромосом Y

Тельце F представлено исключительно только у мужчин: в норме - в одном экземпляре, у лиц с кариотипом 47,XYY - в двух.

Вопрос 18. Тест Барра. Практическое значение теста.

Тест хроматина X относится к экспресс тестам,

1. Показания:

a) в пренатальном периоде: для установления генетического пола плода в случае, когда женщина является носителем Х-сцепленного патологического гена (например, гена гемофилии или мышечной дистрофии Дюшенна); проводится с использованием клеток амниотической жидкости;

b) у новорожденных: в случае интерсексуальности новорожденных (у новорожденного не выражены признаки пола и не пальпируется яичко) - для уточнения генетического пола и приведения его в соответствие с гражданским полом, последний имеет особое значение для формирования в дальнейшем соответствующего полового самосознания и поведения;

c) в постнатальный период: при различных нарушениях половой дифференцировки и уточнения генетического пола, для диагностики дисгенезии гонад, как следствия аномалий по числу и структуре половых хромосом;

d) в судебной медицине и криминалистике: для установления половой принадлежности фрагментов тканей, пятен крови, волос и т.д.