4.3. Токсиколого-гигиеническиеисследования

Целью исследованийявляется выявление возможного неблагоприятного действия на организмлабораторных животных и биологические модели веществ, выделяющихся изполимерных материалов.

Выделенияхимических веществ из полимерных строительных материалов в условиях жилища, какправило, характеризуются низкими концентрациями, поэтому они являются факторомвредности малой интенсивности.

Токсикологическомуисследованию подлежат материалы, предназначенные для строительства и отделкипомещений, получившие положительную гигиеническую оценку по результатам санитарно-химическихи одориметрических исследований, которые:

а) выделяют хотябы одно вещество, не имеющее гигиенического регламента (ПДК сс.атм.).

Примечание: если выделяется одно вещество,можно ограничиться исследованием альтернативным методом.

б) выделяют 5 иболее различных химических соединений, даже если все они имеют гигиеническийрегламент;

в)токсикологические исследования должны проводиться также в тех случаях, когдаимеется необходимость дать оценку комплексу материалов, предназначенных дляприменения в строительстве и отделке объекта.

Постановкаэкспериментальных исследований

Для проведениятоксикологических исследований необходимо соблюдение следующих условий.

Условияпостановки эксперимента:

 заданныевеличины насыщенности для емкости, в которую помещается исследуемый материал;

 предполагаемыйуровень концентраций (порядок величин) летучих веществ при экспериментальнойзатравке животных;

 срокипроведения эксперимента и общая продолжительность затравки, длительность ежедневнойэкспозиции;

 выборэкспериментальных животных (вид, количество, возраст);

 выбор наиболеечувствительных методик и тестов, позволяющих наиболее полно выявить возможноетоксическое воздействие исследуемого комплекса летучих веществ на организм теплокровныхживотных;

 возможностьиспользования альтернативных моделей для определения токсичности материалов.

Сроки проведенияэксперимента

 все животные доначала исследований должны быть подвергнуты карантину в течение не менее 2недель;

 длительностьхронического эксперимента по изучению материалов, предназначенных для жилищногостроительства, должна быть 3 месяца круглосуточно с момента начала затравки.При наличии к концу периода воздействия на организм отдельных изменений,которые могут расцениваться как функциональные, либо выявленные прифункциональных нагрузках, наблюдения продолжаются в восстановительном периодедо 1 месяца;

 длительностьэксперимента по выявлению раздражающего действия на кожу и слизистые оболочки иаллергенного действия определяется методикой исследования;

 при выявленииявно выраженных изменений со стороны исследуемых показателей у подавляющегобольшинства животных эксперимент может быть прекращен раньше намеченного срока.

Выбор подопытныхживотных

Учитываянеобходимость постановки одновременно нескольких серий опытов, а такжецелесообразность проведения эксперимента на разных видах животных,рекомендуется использовать преимущественно мелких лабораторных животных (белыемыши, крысы) либо, когда в этом имеется необходимость, также кроликов.

При выбореколичества животных в зависимости от их вида необходимо использоватьсуществующие методы статистического расчета, на основе которых должноопределяться число животных, обладающее достаточной репрезентативностью.

Требования кустройству и эксплуатации камер. Воспроизведение условий эксперимента.

 Особенностипостановки эксперимента требуют дифференцированного подхода к выборуоригинальной конструкции затравочных камер, приспособленных для постоянногопребывания в них животных.

 Работа можетпроизводиться как в герметичных, так и в негерметичных камерах в зависимости отусловий опыта.

 Конструкциякамеры должна обеспечивать быструю уборку, смену корма, воды.

 В камеренеобходимо предусмотреть регулировку и регистрацию температуры, воздухообмена,влажности воздуха и барометрического давления, а по возможности содержаниекислорода и углекислоты. Это позволит моделировать в различных серияхэксперимента условия вентилируемых помещений. Постановка эксперимента вусловиях вентилируемой емкости требует, чтобы создаваемый в каждой камеревоздухообмен был не ниже допустимых гигиенических норм.

 Сроки выдержкиобразцов материалов от момента изготовления до начала исследования должны бытьне менее 1 месяца и не более 6 месяцев. Перед исследованием поверхностьобразцов следует тщательно очистить от пыли, влаги и случайных примесей.

 При проведенииэксперимента с моделированием условий исследуемый материал должен помещатьсялибо в затравочную камеру и размещаться с животными, либо в климатическуюкамеру с последующей подачей газовоздушной смеси в камеры с животными.Аналогично следует поступать при изучении комплексов материалов. При размещенииотдельных материалов или комплексов в камерах с животными, необходимопредусмотреть их размещение, исключающее контакт с животными и ихэкскрементами.

 Отбор пробвоздуха из затравочной камеры для химических анализов производится дляопределения основных компонентов исследуемой смеси не менее одного раза внеделю с соблюдением общих правил. Результаты заносятся в регистрационныйжурнал учета концентраций.

 Оценку типовыхкомплексов ПСМ следует проводить в стендовых условиях. В качестве стендов могутбыть использованы специальные камеры, объемом 18 - 20 м³,изготовленные из инертных материалов, имеющие автономную систему вентиляции ирегулировку температуры. При отсутствии таких возможностей для этих целей могутбыть использованы помещения, имитирующие жилую комнату, в которых должныотсутствовать источники выделения токсичных веществ. Аналогичная комната должнабыть для размещения животных контрольной группы.

Исследованиякомплексов ПСМ должны проводиться в хроническом круглосуточном эксперименте.

Методы выявленияизменений, возникающих в организме под влиянием вдыхания летучих компонентовполимерных композиций

Выборсоответствующих показателей и методов, а также объем планируемых исследований вкаждом конкретном случае определяется особенностями токсического действияисследуемого комплекса летучих веществ и необходимостью применения общепринятыхинтегральных тестов и некоторых специфических показателей.

Определениепоказателей должно быть начато за 2 - 3 недели до началаэксперимента. В зависимости от их характера следует строго дифференцироватьсроки определения каждого. После установления исходных величин должны бытьнамечены сроки определения соответствующих показателей в процессе последующихопытов.

При выборепоказателей и тестов, а также при последующей оценке полученных сдвиговнеобходимо учитывать характер и диапазон «физиологических колебаний» того илииного показателя. При этом не может быть однотипного подхода к оценкеанализируемых сдвигов, т.к. в одних случаях даже чрезвычайно широкие колебанияисследуемого показателя укладываются в «физиологическую норму», а в других -даже весьма незначительные уже свидетельствуют о развитии патологическогопроцесса. При изучении факторов малой интенсивности получаемый статистическизначимый полиморфизм данных следует трактовать как результат токсическоговоздействия.

В экспериментемогут быть применены различные функциональные нагрузки: длительная мышечнаяработа, вращение в центрифуге, гипоксия, воздействие некоторыхфармакологических агентов и др. Если при функциональной нагрузке в организмеживотного возникает патологическое состояние, значит достигнутое притоксическом воздействии «равновесие», обусловленное напряжением компенсаторныхзащитных механизмов, находится на грани «повреждения». Если же прифункциональной нагрузке реакции организма не отличаются от таковых уконтрольных животных или от сдвигов, наблюдавшихся у животных до нагрузки, тоследует полагать, что регистрируемые сдвиги находятся в пределахфизиологических норм защиты.

Схемыисследований влияния газовыделений из полимерных материалов на организм вхроническом эксперименте (прилож. 2)на всех схемах значком (*) обозначены тесты, исследования которых не являютсяобязательными, проводятся при наличии экспериментальной базы, а необходимостьпроведения определяется экспериментаторами.

Схема № 1 - Изучение общего состояния организма.Используются общепринятые методы определения.

Схема № 2 - Изучение функционального состоянияцентральной нервной системы (ЦНС).

Схемапредусматривает изучение корковых, подкорковых и обменных процессов.

Для изученияэнергетического обмена - ферментный состав цикла трикарбоновых кислот, биосинтез аскорбиновой кислоты в гомогенатах мозга.

Схема № 3 - Изучение неспецифической реактивностиорганизма. Схема включает, в основном, оценку влияния токсических газовыделенийна гипофизадреналовую систему, фагоцитарную активность нейтрофилов крови, активность лизоцима, фракционный составбелков крови и др.

Схема № 4 - Изучение функциональногосостояния печени. Рекомендуется исследовать белковый, липидный,углеводный и энергетический виды обмена, специфическую ферментативнуюактивность, биосинтез аскорбиновой кислоты.

Схема № 5 - Изучение функционального состояниясердца. Определяющими могут быть показатели ЭКГ не менее 100 кардиоциклов, артериальное давление, специфическая ферментативнаяактивность, энергетический и липидный обмены.

Схема № 6 - Изучение функционального состоянияпочек. Схема предусматривает определение показателей выделительной функции, фильтрационнойспособности, энергетического обмена.

Схема № 7 - Изучение функциональной способности кроветворной системы.Предусматривается определение форменных элементов крови, лейкоцитограмма,биосинтез аскорбиновой кислоты в селезенке.

Схема № 8 - Изучение гонадотропногодействия. Включает функциональное состояние сперматозоидов, морфологическиепоказатели, белковый и энергетический обмены, окислительно-восстановительныепроцессы. Для характеристики функционального состояния сперматозоидов можетприменяться определение индекса токсичности на сперматозоидах крупного скота.

Схема № 9 - Изучениеаллергенной активности производится в тех случаях, когда к этому есть прямыепоказания. Предусматривается использование одного из методов определения аллергенности в моделированныхусловиях вне организма и коньюнктивальной пробы на морских свинках.

Схема № 10 - Морфологическое и гистохимическоеисследование внутренних органов.

Помимо основныхпредложенных схем по показаниям должны проводиться исследования отдаленныхпоследствий: мутагенное действие, тератогенное действие и изучение генеративнойфункции.

Рекомендуемыесхемы исследований не являются строго обязательными во всех случаях. Выбортестов должен производиться в зависимости от цели исследования, а такжевозможности лаборатории.

Притоксиколого-гигиенической оценке ПСМ могут быть использованы так называемыеальтернативные методы, т.е. исследования на биологических моделях in vitro. Такие исследования позволяют дать оценкуинтегральной токсичности в короткие сроки и без существенных материальныхзатрат. Эти методы хорошо применимы при скрининговыхисследованиях и позволяют получить предварительные результаты исследованиятоксичности. Выполнение исследований должно проводиться по методическим указаниямили рекомендациям, утвержденным в установленном порядке (см. методическоепособие «Альтернативные методы исследований (Эспресс-методы) для токсиколого-гигиенической оценки материалов, изделийи объектов окружающей среды»).