Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
МР ПФ студ. неспец.doc
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
164.35 Кб
Скачать

Определение опсонофагоцитарного показателя по методу и таблице Шриттер — Мурсаловой

Количество микробов, фагоцитированных одним фагоцитом (ФИ)

Оценка фагоцитоза по выраженности

Количество нейтрофилов с таким фагоцитозом

ОФИ

0

1-20

21-40

41 и более

0

+ /1/

++ /2/

+++ /3/

0

10

10

5

0

10

20

15

ИТОГО: 25 45

ОФИ, равный 10-24, характеризует слабоположительную реакцию, 25-49 — ясно выраженную, 50-75 резко положительную.

Кроме того, в отношении ОФИ по отношению к возбудителям некоторых инфекций (например, к бруцеллам) есть специальная оценочная шкала.

а) Оценка завершённости фагоцитарной реакции по индексу завершённости.

Кровяно — микробную взвесь инкубируют при +37Сº 2 часа. После этого из неё готовят мазок, высушивают и отдельно не фиксируют, окрашивают сначала раствором прочного зелёного 20 минут и докрашивают 0,1 % водным раствором азура П.

При этом жизнеспособные клетки окрашиваются в сине-сиреневый цвет.

Определяют ИЗФ – индекс завершённости фагоцитоза рассчитывается по формуле:

ИЗФ = Е 30 мин , где

Е 2 часа

Е 30 мин. – общее количество микробных клеток в 100 фагоцитах через 30 минут;

Е 2 часа – общее количество микробных клеток в 100 фагоцитах через 2 часа, то есть после окончания фагоцитоза.

Завершённым должен быть фагоцитоз с не менее 2/3 фагоцитов (~60 % и >).

Б) Оценка завершенности фагоцитоза ускоренным методом Мотавкиной н.С., Ховриной м.П. (1962).

Она осуществляется сразу после окончания опыта путем обработки микробо-кровяной (лейкоцитарной) взвеси раствором флюорохрома - акридина оранжевого 1:1000. Мёртвые особи под люминисцентным микроскопом оранжево-жёлтые, живые – зелёные. Расчёт завершённости делают по проценту фагоцитов с поглощёнными микроробами.

Приложение 2

А) определение титра лизоцима классическим методом

По лизису индикаторной культуры чувствительного микрококка M. lysodeikticus

Ингредиенты

Разведения сыворотки, слюны

1:10

1:20

1:40

1:80

1:160

1:320

1:640

К. к.

Физиологический 0,85% раствор поваренной соли

1

1

1

1

1

1

1

1

Субстрат (сыворотка) испытуемый

1

1

1

1

1

1

1

1

до 1 % р-р

Тест-культура микрококка (1 млрд мт в 1 мл) в каплях

2 к.

2 к.

2 к.

2 к.

2 к.

2 к.

2 к.

2 к.

Инкубировать 3 часа при +37С°

Учет результатов

Лизис тест-культуры

Отсутствие лизиса

Титр лизоцима в исследуемом субстрате равен 1:40 (максимальное разведение, или минимальное количество, давшее лизис культуры и просветление).