- •2.1 Определение активности амилазы ротовой жидкости по Вольгемуту.
- •2.2 Исследование амилазной активности мочи.
- •4. Определение концентрации глюкозы в сыворотке крови глюкозооксидазным методом.
- •6. Количественное определение содержания лецитина в сыворотке крови.
- •7. Определение активности уропепсина.
- •8. Колориметрический метод определения активности аспартат- и аланинаминотрансфераз в сыворотке крови.
- •10.0 Количественное определение мочевины в моче по Рашковану.
- •11.1 Количественное определение креатинина в моче по Яффе.
- •12. Количественное определение мочевой кислоты в сыворотке крови по методу Мюллера-Зейферта.
- •13. Общий анализ мочи: физико-химические свойства, химический состав мочи, определение патологических компонентов мочи 1.Определение показателей физико-химических свойств мочи.
- •2. Определение химических компонентов нормальной мочи.
- •3. Патологические компоненты мочи.
- •1. Качественное определение белка.
- •2. Качественное определение сахара в моче с помощью реактива Фелинга.
- •3. Качественное обнаружение сахара в моче при помощи индикаторной бумаги «Глюкотест».
- •4. Количественное определение белка в моче по методу Робертса-Стольникова.
- •5. Качественное определение кетоновых тел.
- •6. Качественная реакция на кровяные пигменты.
- •7. Качественное определение желчных пигментов.
- •8. Проба Петенкофера на желчные кислоты.
- •9. Проба Яффе на уробилин.
- •10. Качественное определение индикана в моче.
- •14. Определение кальция в сыворотке крови (метод Мойдина и Зака)
- •16. Определение содержания гемоглобина в крови цианметгемоглобиновым методом по Драбкину.
- •17. Количественное определение билирубина в сыворотке крови по методу Иендрашека.
- •18. Пробы коллоидоустойчивости белков сыворотки крови.
4. Количественное определение белка в моче по методу Робертса-Стольникова.
При наличии в моче белка, открытого качественными реакциями, его количество определяют методом Робертса-Стольникова. В основе метода лежит проба Геллера – денатурация белка азотной кислотой. Экспериментально установлено, что при наслаивании на азотную кислоту, растворы, содержащие 0,0033% белка, дают белое колечко в промежутке между второй и третьей минутами после наслаивания. Если колечко появляется непосредственно после наслаивания раствора белка на азотную кислоту, то путем последовательного разведения исследуемого материала достигают такого максимального разведения, при котором появляется кольцо между второй и третьей минутами. Умножая разведение на 0,0033%, получаем процентное содержание белка в моче.
5. Качественное определение кетоновых тел.
В нормальной моче кетоновые тела (ацетон, ацетоуксусная и -гидроксимасляная кислоты) содержатся в небольших количествах (0,02-0,05 г/сут, или 20-50 мг) и обычными качественными реакциями не обнаруживаются. Повышенная экскреция их с мочой (кетонурия) наблюдается при сахарном диабете (до 10-50 г/сут), голодании, инфекционных заболеваниях (туберкулезе и др.)
Проба с нитропруссидом натрия (Легаля) на ацетон
При взаимодействии ацетона с нитропруссидом натрия в щелочной среде появляется оранжево-красное окрашивание. После подкисления концентрированной уксусной кислотой оранжево-красное окрашивание переходит в вишневое.
Проба Либена на ацетон
Проба основана на образовании йодоформа СНI3 при взаимодействии ацетона с I2 в щелочной среде.
К 1 мл мочи добавить 3 - 4 капли 10% раствора КОН и по каплям - раствора йода в йодистом калии (раствор Люголя) до появления мути (слабо-желтый кристаллический осадок йодоформа) при наличии ацетона, обладающего специфическим «больничным» запахом.
СНз-С-СН3 + 2I2 + 4NаОН — СНI3 + CH3COONa + 3NaI + 3Н2О
О
К 1 мл мочи добавить 4 - 5 капель 5% раствора FеСl3. Наблюдается вишнево-красное окрашивание за счет комплексного соединения железа с енольной формой ацетоуксусной кислоты, постепенно бледнеющее при стоянии вследствие самопроизвольного декарбоксилирования ацетоуксусной кислоты:
СНз-С-СН2СООН — СН3-С-СН3 + СО2
О О
6. Качественная реакция на кровяные пигменты.
Появление в моче форменных элементов крови (гематурия) или кровяных пигментов (гемоглобинурия) относится к патологии и может быть обнаружено с помощью ряда проб (гваяковой, бензидиновой и др.). Гематурия имеет место при нарушении целостности кровеносных сосудов, повреждении мочеполовых путей (мочевые камни, рак мочевого пузыря); гемоглобинурия наблюдается при отравлении гемолитическими ядами, при ожогах происходит разрушение эритроцитов. Кровяные пигменты можно открыть бензидиновой пробой, которая основана на окислении бензидина атомарным кислородом, который образуется при разложении перекиси водорода кровяным пигментом, моча окрашивается в синий или зеленый цвет.
Проба с бензидином
В пробирку налить 1 мл прокипяченной мочи, добавить 4 капли 5% раствора бензидина в ледяной уксусной кислоте (свежеприготовленный) и 4 капли 3% раствора перекиси водорода. После перемешивания жидкость окрашивается в синий или зеленый цвет, что указывает на присутствие крови в моче.
Проба гваяковой смолой
Налить в пробирку 1 мл исследуемой мочи. В другую пробирку добавить 1 мл 2% раствора гваяковой смолы, туда же добавить 3 - 5 капель 1% раствора перекиси водорода и осторожно наслоить в пробирку раствор, содержащий мочу. При наличии кровяных пигментов отметить появление синего кольца на границе наслаивания.