11.Мб диагностика эшерихиозов.

Лабораторная диагностика эшерихиозов основана на выделении чистой культуры возбудителя и его идентификации, а также на тестировании токсинов с помощью ПЦР. Возбудителя эшерихиозов идентифицируют с помощью набора поливалентных OK-сывороток и набора адсорбированных сывороток.. содержащнго антитела только к определенным антигенам. Для идентификации EIEC можно использовать кератоконъюнктивалъную пробу. Некоторые представители EIEC неподвижны, не ферментируют лактозы и салицина. Идентификации Е. coli 0157:Н7 помогает ее неспособность ферментировать сорбит (применяют среду Эндо с сорбитом вместо лактозы). Но лучше всего для идентификации и дифференциации возбудителеи ОКЗ (всех категории) использовать тест-системы ПЦР. При необходимости у выделенных возбудителей определяют чувствительность к антибиотикам.

12.Основные свойства возбудителя брюшного тифа.

Брюшной тиф — тяжелое острое инфекционное заболевание, характеризующееся глубокой общей интоксикацией, бактериемией у специфическим поражением лимфатического аппарата тонкого кишечника. Интоксикация проявляется сильной головной болыо, помрачением сознания, бредом.

Возбудитель брюшного тифа— Salmonella lyphi

Род Salmonella включает в себя большую группу бактерий, но только три из та — 5. lyphi, S. paratyphi A mS. paratyphi В — вызывают заболевание у человека с клинической картиной брюшного тифа.

Морей алогически они неразличимы — короткие грамотрицательные палочки с закругленными концами, длиной 1—3,5 мт-i. диаметром 0,5—0.8 мкм: спор и капал не образуют, обладают активной подвижностью (перитрихи). Содержание Г + Ц в ДНК составляет 50—52 мол %.

Культуральные свойства. Возбудители брюшного тифа и паратифов — факультативные анаэробы, температурный оптимум для роста 37 °С (но могут расти и диапазоне от 10 до 41 °С). pH 6.8—7.2; не требовательны к питательным средам. Рост на бульоне сопровождается помутнением, на МПА образуются нежные круглые, гладкие, полупрозрачные колонии диаметром 2—4 мм. Однако колонии S. lyphi. имеющие 13-антиген, мутные. Колонии S. paratyphi В более грубые, через несколько дней у них по периферии формируются своеобразные валики. На средах Эндо колонии всех трех сальмонелл бесцветны, на висмут-сульфит-агаре- черного цвета. В случае диссоциации на плотных средах вырастают колонии R- формы. Избирательной средой для возбудителей брюшного тифа и паратифов является желчь или желчный бульон.

Биохимические свойства. Возбудители брюшного тифа и паратифов дают положительную реакции с MR, не образуют индола, не разжижают желатин, восстанавливают нитраты в нитриты, не образуют ацетоина. S. lyphi не растет на голодном агаре с цитратом. Основные биохимические различия между возбудителями брюшного тифа и паратифов заключаются в том. что S. lyphi ферментирует глюкозу и некоторые другие углеводы с образованием только кислоты, и S. paratyphi А и S. paratyphi В — с образованием и кислоты, и газа.

13.Антигенные свойства возбудителя брюшного тифа.

Сальмонеллы имеют О- Н- антигены. По О-антигенам они разделяются на большое количество серогрупп,а по Н-антигенам- на серотипы. S. typhi, S.paratyphi A и S. paratyphi в отличии друг от друга как по О-антигенам(относятся к разным серогруппам), так и по Н-антигенам.

14. Vi-аитигеи брюшнотифозной палочки, природа, свойства.

S. typhi помимо О- и Н-антигенов имеет еще один поверхностный антиген, который они назвали антигеном вирулентности (Vi-антигеном). По химической природе Vi-антиген отличается от О- и Н-антигенов, он состоит из трех различных фракций, но его основу составляет сложный полимер N-ацетилгалактозаминоуроновая кислота см. м. 10 МД. Vi-антиген, как правило, обнаруживается у свежевыделенных культур, но он легко утрачивается под влиянием различных факторов (в частности, при выращивании при температуре выше 400С и ниже 20QC, на средах с карболовой кислотой u т. п.), при длительном хранении культур, разрушается при температуре 1000С в течение 10 мин. Поскольку он располагается более поверхностно, чем О-антиген, его наличие препятствует агглютинации культуры S. typhi О-специфической сывороткой, поэтому такую культуру обязательно проверяют в реакции агглютинации с Vi-сывороткой. Напротив, утрата Vi-антигена ведет к освобождению О-антигена и восстановлению О-агглютинации, но при этом утрачивается Vi-агглютинация. Количественное содержание Vi-антигена у S. typhi может сильно варьировать, поэтому Ф. Кауффманн предложил классифицировать S. typhi по содержанию Vi-антигена на три группы:

1. чистые v-формы (нем. vie! — много);

2. чистые v-формы (нем. wenig — мало);

3. промежуточные vw-формы.

Обнаружены 3 необычных мутанта S. typhi: Vi-1 — R-форма, клетки лишены Н- и О-антигенов, но стойко сохраняют Vi-антиген; 0-901 - лишен Н- и Vi-антигенов; В-901 — содержит О- и Н-антигены, но лишен Vi-антигена. Все три антигена: О-, Н- и Vi— имеют выраженные иммуногенные свойства. Наличие Vi-антигенов позволяет подвергать культуры S. typhi фаготипированию. Есть 2 типа фагов, лизирующих только те культуры, которые содержат Vi-антиген: Vi-1—универсальный фаг, лизирует большинство Vi-содержащш культур S. typhi; и набор Vi-Il-фагов, лизирующих избирательно культуры S. typhi. Впервые это было показано в 1938 г. Дж. Крейджем и К. Иеном. С помощью Vi-фагов II типа они разделили S. typhi на 11 фаготипов. К1987 г. было выявлено уже 106 различных Vi-фаготипов S. typhi. Чувствительность их к соответствующим фагам является стабильным признаком, поэтому фаготгтирование имеет важное эпидемиологическое значение.

Разработаны также схемы фаготипирования S. paratyphi А и S. paratyphi В, по которым они разделяются на десятки фаготипов. Существенно, что фаготипы сальмонелл могут ни по каким другим признакам не отличаться друг от друга.