2.2.Практичне значення

Антигени, знайдені на зовнішній мембрані P.mirabilis потенційно можуть служити як мішень для вакцин. Досі, з 37 виявлених імуно-реактивних антигенів, 23 є поверхнево-пов'язані білки. Дослідження показали, що 2 білки приєднання заліза (PMI0842 і PMI2596) збільшують вірулентність P.mirabilis в сечових шляхах. Оскільки обидва цих білки сприяють патогенезу, вони найбільш зручними мішенями для вакцин. Після того, як ефективна вакцина буде зроблена для цих антигенів, подальші дослідження будуть визначати , чи може бути використаний ці вакцини проти інших бактерій , які викликають складні інфекції сечовивідних шляхів, таких як Providencia і Morganella.

Штам Proteus mirabilis 2536 виділений від хворого з урологічної інфекцією в 1992 р., депонований в колекції Державного науково - дослідного інституту стандартизації та контролю медичних біологічних препаратів ім. Л. А. Тарасевича і має реєстраційний номер 237 . Генетичні особливості штаму : стійкий до пеніциліну, неоміцину, мономіцину, поліміксину, тетрацикліну, лінкоміцину, еритроміцину, ристоміцину, оксацилину, левоміцетину. Штам має підвищену токсинопродукуючу здатність.

Винахід відноситься до біотехнології і може бути використано для отримання термолабільного ентеротоксину (ЛТ- ентеротоксину і анатоксину Proteus mirabilis при виробництві вакцин).

Термолабільні ентеротоксини активізують клітинну аденілатциклазу, що призводить до порушення ентеросорбції та розвитку діарейного синдрому. Такі токсини також продукують холерний вібріон (холероген) та інші ентеротоксигенні кишкові палички

Метою винаходу є штам Proteus mirabilis 2536, що володіє підвищеною токсинопродукуючою здатністю.

Штам Proteus mirabilis ГИСК N 237 характеризується наступними ознаками:

Утворює фенілаланіндезаменозу, що не ферментує лактозу і ферментує з утворенням кислоту і газу глюкозу , ксилозу , салицин , мальтозу , сахарозу , розщеплює сечовину , не продукує орітіндекарбоксілазу.

Способи визначення активності ЛТ- ентеротоксину :

- Субплантарне введення мишам вагою 15-16 г 0,05 центрифугата 20 - 40 -годинної бульйонної культури викликає набряк лапки не менше 110 мг);

- Інтраназальне введення 0,05 мг 20-40 годинної бульонної культури викликає загибель 95 % мишей-самців вагою 15-16 г протягом 20 хвилин при явищах тонічних судом і асфіксії;

- Внутрішньом'язове введення 300 мл мікробних клітин до 20 -годинної бульонної культурі викликає некроз шкіри кролика діаметром більше 3,5 см;

- В досліді петля тонкої кишки кролика при введенні 500 млн м.т. 20 -годинний бульонной культури дає позитивний результат ;

- Грітий при 56̊C протягом 45 хвилин центрифугат 20 -годинної бульйонної культури викликає " набряк лапки" мишей до 30 мг ,але не викликає некрозів шкіри кролика. Гріта при 100̊C 20 - годинна бульйонна культура не викликає накопичення рідини в ізольованій петлі тонкого кишечника кролика (v / l 0,3 /).

Умови зберігання культури після леофільного сушіння,вирощеній на 0,3 %-вому МПА (pH 7,2-7,4): залити стерильним вазеліновим маслом , при 40̊C .

Середовища для розмноження - бульйон Хоттенгера (pH 7,2-7,4), що містить 5 % еритроцитів кролика при температурі 35 - 36̊C протягом 20 годин.