Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
инфекции 2 зачет.doc
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
155.65 Кб
Скачать

29.Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций (общие принципы).

Вирусологический метод: материал: фекалии, носоглоточные смывы, ликвор, содержимое везикул, кровь. Заражают культуру клеток почек обезьян или однодневных мышей сосунков. Оказывают ЦПД, Коксаки выявляют по патологической картине погибших мышей. Идентификация: РН и ИФА.

РН. Компоненты: вируссодержащий. материал и диагностическая сыворотка. Готовят разведения сывороток, добавляют вирусод. материал, заражают смесью культуру клеток. Пол. результат: отсутствие ЦПД вируса, бляшкообразования и изменения цвета.

ИФА: Компоненты: специфические АТ, вируссод. материал, АТ той же специфичности, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают специфические АТ с пластиком лунки планшета, вносят вируссод. материал, вносят АТ той же специфичности, конъюгат и субстрат. Пол. результат: изменение окраски субстрата.

Серологический метод:

РН. Компоненты: сыворотка больного и диагностикум. Готовят разведения сывороток, добавляют диагностикум, заражают смесью культуру клеток. Пол. результат: отсутствие ЦПД вируса, бляшкообразования и изменения цвета.

РСК: Компоненты: 1 система – сыворотка больного, диагностикум, комплемент, ИХН; 2 система – гемолитическая сыворотка и взвесь эритроцитов барана. Готовят 1 систему, инкубируют 37С 1 ч. Добавляют вторую, инкубируют 37С 1 ч. Положительный результат – отсутствие гемолиза.

РТГА: Компоненты: сыворотка больного, диагностикум, ИХН. Готовят разведения сыворотки, добавляют диагностикум. Инкубируют 37С 30-60 мин. Добавляют взвесь эритроцитов. Инкубируют 30-45 мин. Пол. результат: образование пуговки, т.е. отсутствие агглютинации.

30.Лабораторная диагностика гепатита а.

Вирусологический метод: Материал: фекалии. Готовят экстракт из фекалий, заражают животных (шимпанзе, мармозеток), культуры клеток лимфоцитов. ЦПД не оказывает, выявляют с помощью РИФ - готовят препарат, окрашивают специфической меченной антисывороткой, наблюдают зеленое свечение. Идентификация: ИФА и РИА.

ИФА: Компоненты: специфические АТ, вируссод. материал, АТ той же специфичности, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают специфические АТ с пластиком лунки планшета, вносят вируссод. материал, вносят АТ той же специфичности, конъюгат и субстрат. Пол. результат: изменение окраски субстрата.

РИА: Компоненты: фекальный экстракт, диагностическая сыворотка, меченные изотопом АТ. Адсорбируют АТ из сыворотки на поливиниловой поверхности пробирок, добавляют фекальный экстракт, определяют адсорбировавшийся АГ с помощью меченных радиоактивным йодом АТ.

Серологический метод: выявляют IgM и IgG. Используют РСК, РИА, ИФА.

РСК: Компоненты: 1 система – сыворотка больного, диагностикум, комплемент, ИХН; 2 система – гемолитическая сыворотка и взвесь эритроцитов барана. Готовят 1 систему, инкубируют 37С 1 ч. Добавляют вторую, инкубируют 37С 1 ч. Положительный результат – отсутствие гемолиза.

ИФА: Компоненты: сыворотка больного, диагностикум, конъюгат, хромогенный субстрат. Связывают диагностикум с пластиком лунки планшета, вносят разведенную сыворотку, конъюгат и субстрат. Пол. результат: изменение окраски субстрата.

РИА: на лунках планшета сорбируют диагностикум, добавляют разведенную сыворотку больного. При наличии соответствующих АТ формирует комплекс АГ-АТ. Вносят меченную изотопом антивидовую сыворотку. Меченный АТ адсорбируются на комплексе АГ-АТ. Чем больше АТ в сыворотке больного, тем больше будет связана радиоактивная метка. Определение радиоактивности в жидкой фазе содержимого лунок позволяет судить о количестве АТ в сыворотке больного.