19.Патогенез гриппозной инфекции.

Входные ворота – верхние дыхательные пути. Первичная репродукция происходит в клетках эпителия респираторного тракта. Инфицированные клетки вырабатывают интерферон, оказывающий неспецифическое противовирусное действие. Развиваются воспаление, отек, набухание базальной мембраны, десквамация эпителия. Через поврежденный эпителиальный барьер вирус гриппа приникает в кровоток и вызывает виремию. Всасывание продуктов распада клеток также оказывает токсическое действие. Вирус активирует систему протеолиза и вызывает повреждение эндотелия капилляров. Это повышает проницаемость сосудов, возникают геморрагии и нарушение гемодинамики с расстройством микроциркуляции. Также развивается транзиторный вторичный иммунодефицит, что предрасполагает к развитию вторичной бактериальной инфекции.

20.Лабораторная диагностика: методы диагностики вирусных инфекций.

1. Вирусоскопический метод – делаем мазок, окрашиваем по Романовскому-Гимзе, ищем включения в клетке.

2. Вирусологический метод – выделение вируса из исследуемого материала и его идентификация

3. Серологический – определение нарастания титра антител, используются парные сыворотки

4. Молекулярно-биологический – обнаружение в материале фрагментов нуклеиновых кислот вируса

21.Лабораторная диагностика полиомиелита – серологический метод, особенности.

Серологическая диагностика основана на использовании парных сывороток больных с применением эталонных штаммов вируса в качестве диагностикума. Проводят РН, РСК и РТГА. Определяют нарастание титра АТ для взрослых в 4 раза, для детей – в 2.

РН. Компоненты: сыворотка больного и диагностикум. Готовят разведения сывороток, добавляют диагностикум, заражают смесью культуру клеток. Пол. результат: отсутствие ЦПД вируса, бляшкообразования и изменения цвета.

РСК: Компоненты: 1 система – сыворотка больного, диагностикум, комплемент, ИХН; 2 система – гемолитическая сыворотка и взвесь эритроцитов барана. Готовят 1 систему, инкубируют 37С 1 ч. Добавляют вторую, инкубируют 37С 1 ч. Положительный результат – отсутствие гемолиза.

РТГА: Компоненты: сыворотка больного, диагностикум, ИХН. Готовят разведения сыворотки, добавляют диагностикум. Инкубируют 37С 30-60 мин. Добавляют взвесь эритроцитов. Инкубируют 30-45 мин. Пол. результат: образование пуговки, т.е. отсутствие агглютинации.

Содержание сывороточных иммуноглобулинов классов IgG, IgA, IgM определяют методом радиальной иммунодиффузии по Манчини. Метод основан на реакции образования нерастворимого комплекса (преципитата) выявляемого белка со специфическими антителами в тонком слое агара. Преципитат имеет форму визуально видимого кольца.

22.Лабораторная диагностика и патогенез гепатита в.

Патогенез: Вирус передается путем гемоконтакта. Вирус связывает с рецептором на поверхности гепатоцита и путем эндоцитоза проникает в клетку. Нуклеокапсид достигает ядра, где высвобождается геном. В ядре формируется двунитевая суперспирализованная циркулярная вирусная ДНК. Далее возможно развитие интегративной и продуктивной инфекции. Интегративная: ДНК вируса интегрирует в геном клетки с образованием провируса. Наблюдается синтез НВs-антигена. Клинически проявляется вирусоносительством. Продуктивная: на минус-цепи вирусной ДНК кодируются 4 вирусных РНК разной длины. Субгеномные РНК транспортируется в цитоплазму, где транслируются с образованием оболочечных большого (L), среднего (M) и малого (S) белков и продукта гена Х. Они внедряются в липидную мембрану ЭПС. Прегеномная РНК является и-РНК для синтеза белков сердцевины (pre core) и служит матрицей для синтеза полноценной минус-цепи ДНК. В ядре формируется нуклеокапсид, который достигает тоннелей ЭПС и в дальнейшем секретируется через аппарат Гольджи из клетки. Pre core полипептид также проходит через каналы ЭПС и секретируется в виде НВе-антигена. Клинически продуктивная инфекция проявляется в виде острого или хронического гепатита. Особенностью ВГВ является то, что повреждение гепатоцитов опосредуется цитотоксическими СD8 T-лимфоцитами.

Диагностика: Используют серологический метод и ПЦР. Методами ИФА и РНГА в крови определяют маркеры гепатита В: антигены (HBs и HBe) и антитела (анти-HBc-IgM, анти-HBc-IgG, анти-HBs, анти-HBe-IgM). ПЦР определяют наличие вирусной ДНК в крови и биоптатах печени. Для острого гепатита в поджелтушном и начальной стадии желтушного периода характерно обнаружение HBs антигена, HBe антигена и анти-HBc-IgM антитела. В период реконвалесценции – анти-HBe-IgM, анти-HBc-IgG, анти-HBs антител.