48. Признаки, отличающие вирусы от прокариот.

Признаки, отличающие вирусы от прокариот, следующие:

Вирусы не имеют клеточного строения

Вирусы имеют ультрамикроскопические размеры- видны только в электронном микроскопе.

Вирусы не имеют собственной белоксинтезирующей системы, используют систему хозяина.

Вирусы имеют только один тип нуклеиновой кислоты: ДНК или РНК.

Вирусы являются строгими облигатными внутриклеточными паразитами, т.к. они не воспроизводятся самостоятельно, а могут размножаться только внутри клетки хозяина, используя его белоксинтезирующую систему.

Вирусы имеют 2 формы: внеклеточная (вирион) и внутриклеточная (представлена ДНК или РНК вируса)

Вирусы обладают особым дизъюнктивным (разобщенным) способом репродукции.

Вирусы обладают свойством фильтруемости.

Отличаются от прокариотов патогенностью, специфичностью, иммуногенностью.

49.Убитые вакцины для профилактики вирусных инфекций.

Убитые вакцины в качестве действующего начала включают убитые химическим или физическим методом вирусы (цельновирионные вакцины) или же извлеченные протективные антигены (субвирионные вакцины). Для инактивации вирусов применяют формальдегид, спирт, фенол, УФО и т.д.

Получают инактивированные вирусы путем выращивания в клеточных культурах, куриных эмбрионах, которые затем подвергают инактивации, разрушению, выделению антигенных комплексов, очистке, конструированию препарата. Дозируют вакцины в антигенных единицах.

Примерами убитых вирусных вакцин могут быть: гриппозная, против клещевого энцефалита. Используются для специфической профилактики вирусных инфекций.

50. Принцип постановки реакций га и ртга.

1.Реакцию гемагглютинации (РГА) применяют для обнаружения гумагглютинирующих вирусов в культуральной жидкости зараженной культуры клеток либо хорионаллантоисной или амниотической жидкости куриного эмбриона. Концентрация вирусных частиц соответствует гемагглютинирующему титру (максимальное разведение вируссодержащей жидкости, вызывающее агглютинацию эритроцитов). РГА ставят в пробирках, на специальных полистироловых планшетах, в аппарате Такачи. Для постановки РГА к исследуемому материалу добавляют взвесь эритроцитов. В присутствие вирусов происходит агглютинация эритроцитов. Результаты реакции учитывают через

40 минут после оседания эритроцитов:

(+) - выраженная гемагглютинация-тонкая пленка склеившихся эритроцитов на дне пробирки, имеющая вид зонтика,

(-) – резко очерченный осадок эритроцитов.

РНГА- реакция, в которой антитела взаимодействуют с антигенами, предварительно адсорбированными на инертных частицах, в данном случае- на эритроцитах. Реакция основана на способности гемагглютинирующих вирусов склеивать эритроциты животных или человека. За агглютинацию отвечают поверхностные структуры вирусов-гемагглютинины гликопротеидной природы. Нагруженные антигеном эритроциты склеиваются в присутствии специфических антител к данному антигену и выпадают в осадок.

Постановка.

В лунках полистироловых планшетов готовят ряд последовательных разведений сыворотки. В предпоследнюю лунку вносят - 0,5 мл заведомо положительной сыворотки и в последнюю 0,5 мл физиологического раствора (контроли). Затем во все лунки добавляют по 0,1 мл разведенного эритроцитарного диагностикума, встряхивают и помещают в термостат на 2 часа при 37, 20 или 4 градусах- в зависимости от свойств изучаемого вируса.

Учет. Положительный результат: эритроциты оседают на дне лунки в виде ровного слоя клеток со складчатым или зазубренным краем (перевернутый зонтик). Отрицательный результат- оседают в виде пуговки или колечка.

2.РТГА: Принцип реакции основан на способности АТ связывать различные вирусы и нейтрализовать их, лишая возможности агглютинировать эритроциты. Визуально этот эффект и проявляется в «торможении» гемагглютинации. РТГА применяют при диагностике вирусных инфекций для выявления специфических антигемагглютининов и идентификации различных вирусов по их гемагглютининам, проявляющим свойства Аг.

Феномен РТГА проявляется образованием компактного осадка эритроцитов вместо зонтика гемагглютинации.

Постановка.

Реакцию проводят на полистироловых пластинах и оценивают по отсутствию склеивания эритроцитов, добавленных к смеси вируса и специфической сыворотки. Для удаления неспецифических ингибиторов гемагглютинации сыворотку обрабатывают ацетоном или др. веществами. В полистироловых пластинках готовят двукратные разведения сыворотки в ИХН и к каждому разведению добавляют равное количество вируссодержащей жидкости. Смесь инкубируют 30-60 мин, при 0, 4, 20, 37 градусах, в зависимости от типа вируса. Затем добавляют равный объем 0.5% взвесь эритроцитов. Смесь инкубируют 45 мин.

Титр сыворотки- её наибольшее разведение, которое тормозит гемагглютинацию.

Учет. Положительный результат: компактный диск- пуговка- отсутствие гемагглютинации, отрицательный результат: зонтик гемагглютинации.