Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
основы Биотех. крутой.docx
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
1.23 Mб
Скачать

3’ Тагтатцггц-5’.

. 3’ААГЦУЦАУГГУА-5’.

. 5’УУУЦУАГУГАУААГАЦААУГАУ-3’.

393

. 5’ГУУЦУГУАУАГЦААУГА-3’ Тест 2

Ниже приведены 5 правильных ответов для 10 задач (11 –0).

Поставьте в ответах те номера задач, которые им соответствуют.

. Пролин –пролин –пролин –пролин.

. Лейцин –лейцин –изолейцин –валин –изолейцин – триптофан–лейцин –лейцин.

. Аланин, аспарагин, цистеин, глицин.

. Один из вариантов решения: УУУ, УГА, ЦЦА, ЦАА, ГЦА.

. После удаления из ДНК шестого нуклеотида аминокислоты в

молекуле белка имеют следующий порядок: треонин –глутамин – тирозин.

. Один из вариантов решения: АУУ, ГАУ, ЦАГ, ААА, ГЦА,

ГАЦ.

Тест 3

Ниже приведены 5 правильных ответов для 9 последних задач (21

29). Поставьте в ответах те номера задач, которые им

соответствуют.

. После вставки тимина белок имеет вид: серин –треонин – лейцин –глицин.

. После воздействия азотистой кислотой цепь белка будет иметь

следующее строение: цистеин –глутаминовая кислота –серин – изолейцин –глицин –серин. Это один из вариантов ответа.

. Один из вариантов ответа: 3’- ГЦААЦЦАТАГТАААА-5’ 5’ ЦГТ ТГГ ТАТЦАТТТТ-3’.

. Один из возможных вариантов решения:

3’Ааацаацтаг т тгтагааацаццатцагта-5’ 5’т т тгтг гатцаацатцтт тгтг г тагт цат-3’ –. Один из вариантов решения: 3’гцаггагаацаагцг-5’ 5’цгтццтцтtг т тцгц-3’ Тест 4

Ниже приведены 5 правильных ответов для 10 первых задач(1 – 10). Поставьте в ответах те номера задач, которые им соответствуют.

. 3’АГЦТАААТГЦ-5’.

. 3’АТЦЦГАТТАТЦГ-5’.

. 3’УААЦГАГУУУ-5’.

. 3’ГУГЦУАГГААГА-5’.

394

. 3’ЦГЦТГТААААГЦГЦАТЦАТЦТТАА-__________5’.

. 3’АУУЦУГУАУАГЦААУГА-5’ Тест 5

Ниже приведены 5 правильных ответов для 10 следующих задач

(11 –0). Поставьте в ответах те номера задач, которые им

соответствуют.

. Серин –аргинин –фенилаланин –фенилаланин.

. Лейцин –валин –лейцин.

. Один из возможных вариантов ответа: АГА, АУА, АГГ, УАЦ.

. После удаления из гена первого нуклеотида белок имеет вид:

аргинин –валин –лейцин.

. При удалении из молекулы ДНК второго нуклеотида строение

белка таково: глицин –фенилаланин –серин.

. Один из возможных вариантов ответа: АГУ, ГУА, ГГГ, УАЦ.

Тест 6

Ниже приведены 4 правильных ответа для 9 последних задач (21

9). Поставьте в ответах те номера задач, которые им соответствуют.

. После облучения начало цепочки белка: глицин –треонин – глицин.

. Один из возможных вариантов решения: АЦУ-УГГ-УАУ-ГУУ.

Один из вариантов решения:

и-РНК: 5’ГЦУ АГА АЦУ ААА-3’ ДНК : 3’ЦГА ТЦТ Т ГА ТТТ -5’ 5’ГЦТ АГА АЦТ ААА-3’.

. Один из возможных вариантов решения:

3’ЦЦА ТАА ЦАА ГТТ ГТЦ-5’ 5’Г ГТ АТТ ГТТ ЦАА ЦАГ-3’ –. Один из возможных вариантов решения: ГЦУ-УГА-УАУ-ГГУ.

Тест 7

1. Что такое ген?

а) участок молекулы РНК, несущий информацию об одной

полипептидной цепи;

б) участок молекулы ДНК, несущий информацию об одной

полипептидной цепи;

в) участок молекулы ДНК, несущий информацию о двух

полипептидных цепочках.

2. Что является единицей генетической или наследственной

информации?

а) аминокислота;

395

б) белок;

в) ген.

3. Сколько различных аминокислот входит в состав белков?

а) 10;

б) 20;

в) 30;

г) 27.

4*. Выберите нуклеотиды, входящие в состав молекулы РНК.

а) аденин;

б) цитозин;

в) урацил;

г) тимин;

д) гуанин.

5*. Назовите компоненты нуклеотидов ДНК:

а) аминокислота;

б) рибоза;

в) дезоксирибоза;

г) остаток азотной кислоты;

д) азотистое основание;

е) остаток фосфорной кислоты.

6. Чему равен коэффициент специфичности ДНК у животных?

а) варьирует от 0,45 до 2,57;

б) варьирует от 0,54 до 0,81;

в) варьирует от 0,58 до 0,81.

7. Что называется репликацией?

а) синтез полипептидной цепи белков по матрице и-РНК;

б) процесс удвоения молекулы ДНК;

в) процесс считывания информации и-РНК с ДНК.

8. Какой тип РНК участвует в процессе транскрипции?

а) т-РНК;

б) и-РНК;

в) р-РНК.

9. Где протекает процесс трансляции?

а) в ядре;

б) на рибосомах;

в) на АГ.

10. Какой кодон называется инициирующим?

а) кодон, с которого начинается синтез полипептидной цепи;

б) кодон, определяющий вторую аминокислоту в полипептидной

цепи;

в) кодон, терминирующий синтез белка. 11*. Из нижеприведенных выберите стоп-кодоны:

396

а) УАА;

б) ААГ;

в) АУГ;

г) ГАА;

д) УГА;

е) УАГ. 12. Сколько аминокислот кодируется только одним кодоном?

а) 1;

б) 2;

в) 3;

г) 5;

д) 7.

13*. Из нижеприведенных назовите аминокислоты, которые

кодируются шестью триплетами:

а) серин;

б) лейцин;

в) пролин;

г) аргенин;

д) треонин.

14. Какой связью связаны между собой в цепи ДНК нуклеотиды?

а) металлической;

б) водородной;

в) фосфодиэфирной;

г) пептидной.

З ан ят ие5. Ф ЕР МЕ НТ Ы Р ЕС ТР ИК ЦИ И (Р ЕС ТР ИК ТА ЗЫI, II

Т ИП ОВ, Д НКЛ ИГ АЗ Ы

Цель занятия: ознакомиться с ферментами рестрикции и

способами получения гибридной ДНК от различных организмов,

освоить методы гибридизации ДНК на примере решения типовых

задач.

1 Принцип действия и функция рестриктаз.

Тематика рефератов

1. История открытия рестриктаз.

2. Характеристика рестриктаз I и II типов.

3. Принцип действия и функция ДНК-лигаз.

397

Вопросы для самоконтроля

1. Какую функцию выполняют лигазы?

2. Что такое распознаваемые участки?

3. Приведите примеры известных вам рестриктаз.

4. Каким образом осуществляет разрезание фермент рестрикции

EcoRI?

5. Что такое конструирование гибридных (рекомбинантных)

ДНК?

Задание 1. Разобрать понятия: ферменты рестрикции,

распознаваемые участки, липкие концы, ровные (тупые) концы,

EcoRI, Sma I, Hind III, конструирование ДНК.

Задание 2. Решите предлагаемые задачи:

1. Имеется последовательность из 27 нуклеотидных пар

двухцепочечной ДНК следующего состава:

5`- ЦТГААТТАГГАТЦЦАГГЦААТАГТГТГ -3`

3`-ГАЦТТААТЦЦТАГГТЦЦГТТАТЦАЦАЦ-5`

Каким способом и на сколько частей можно разрезать эту ДНК?

2. Имеется последовательность из 24 нуклеотидных пар

двухцепочечной ДНК следующего состава:

5`-ТЦАГААТГЦТГГЦЦААГТАЦТТАГ-3`

3`-АГТЦТТАЦГАЦЦГГТТЦАТГААТЦ-5`

Каким способом и на сколько частей можно разрезать эту ДНК?

3. Ниже приведены две последовательности одноцепочечных

молекул ДНК. Какую из них в двухцепочечной форме могут разрезать

известные вам рестриктазы?

а) 5`-АЦТЦЦАГААТТЦАЦТЦЦГ-3`

б) 5`-ГЦЦТЦАТТЦГААГЦЦТГА-3`

4. Ниже приведены три последовательности одноцепочечных

молекул ДНК. Какую из них в двухцепочечной форме могут разрезать

известные вам рестриктазы?

а) 5`-ТАГГЦТААГЦТТАЦЦГАТ-3`

б) 5`-ЦГААТАТТТЦЦГГАТГАА-3`

в) 5`-АГГТЦЦТТАТЦЦГАТААТТ-3`

5. Рестрикционный фермент Hpa II разрезает ДНК по

398

последовательности ЦЦГГ. Какова средняя длина фрагментов

разрезанной ДНК?

6. Рестрикционный фермент EcoRI разрезает ДНК по

последовательности ГААТТЦ. Насколько часто этот фермент будет

разрезать двухцепочечную ДНК?

7. Если последовательность нуклеотидов в молекуле ДНК

распределяется случайным образом, то какова будет средняя длина

фрагмента при разрезании ДНК рестриктазами, узнающими

последовательность из восьми нуклеотидов?

8. Гаплоидный геном человека содержит около 3×109

нуклеотидных пар ДНК. Сколько различных рестрикционных

фрагментов будет получено при разрезании человеческой ДНК

рестрикционным ферментом NotI, узнающим октамерную

последовательность ГЦГГ- ЦЦГЦ?

9. Сколько различных рестрикционных фрагментов будет

получено при разрезании человеческой ДНК рестикционным

ферментом Sma I?

10. Гаплоидный геном дрожжевого грибка Saccharomyces

cerevisiae, состоящий из одной хромосомы, содержит около 13,5 ×106

нуклеотидных пар ДНК. Если вы порежете эту ДНК ферментом

EcoRI, то сколько различных рестрикционных фрагментов будет

получено?

11. Гаплоидный геном Saccharomyces cerevisiae (13,5 ×106 н. п.)

разрезали ферментом HaeIII. Сколько различных рестрикционных

фрагментов будет получено?

12. Геном кишечной палочки Escherichia coli, представляющий

собой одну кольцевую хромосому, содержит около 4,7 ×106 н. п. Его

разрезали ферментом HaeIII. Сколько различных рестрикционных

фрагментов будет получено?

13. Геном Drosophila melanogaster, состоящий из четырёх

хромосом, содержит около 108 нуклеотидных пар ДНК. Если вы

порежете эту ДНК ферментом EcoRI, то сколько различных

рестрикционных фрагментов будет получено?

14. Ниже приведены последовательности двух фрагментов ДНК,

выделенных из организмов разных видов.

5`-АААГЦТТЦТГААТЦЦГАТЦГ-3`

3`-ТТТЦГААГАЦТТАГГЦТАГЦ-5`

5`-ГТАЦТЦАГАТЦЦТАГГАТААГЦТТА-3`

3`-ЦАТГАГТЦТАГГАТЦЦТАТТЦГААТ-5`

399

С помощью каких ферментов можно получить гибридную

молекулу ДНК из этих фрагментов? Опишите последовательные

этапы получения гибридной молекулы.

15. Опишите последовательные этапы получения гибридной ДНК

из представленных ниже фрагментов.

5`-ТАЦТАТЦЦГГАГТАГГАТЦЦТ-3`

3`-АТГАТАГГЦЦТЦАТЦЦТАГГА-5`

5`-ЦГГАТЦЦТАГАТТЦЦАТА-3`

3`-ГЦЦТАГГАТЦТААГГТАТ-5`

Задание 3. Объяснить следующие термины: рестриктазы, сайт

рестрикции, ДНК-лигаза, гибридные (рекомбинантные) ДНК.

Тест 1

Ниже приведены 4 правильных ответа для 8 задач (1–).

Поставьте в ответах те номера задач, которые им соответствуют.

. В приведенной ДНК имеется один участок распознавания:

ГГАТЦЦ для рестриктазы Bam I (см. таблицу на стр. 18). Поэтому

ДНК может быть разрезана в одном месте с образованием двух

фрагментов.

. Рестриктаза EcoR I может разрезать фрагмент а.

. Частота встречаемости четырехнуклеотидного фрагмента

ЦЦГГ составит (1/4)4 = 1/256. Таким образом, средняя длина

фрагментов ДНК при разрезании Hpa II составит 256 нуклеотидных

пар.

. Средняя длина фрагментов ДНК при разрезании

рестриктазами, узнающими восьминуклеотидную

последовательность, составит 65536 нуклеотидных пар.

. Средняя длина фрагментов при разрезании рестриктазами

составит 53637 нуклеотидных пар.

Тест 2

Ниже приведены 4 правильных ответа для 7 задач (9–5).

Поставьте в ответах те номера задач, которые им соответствуют.

. Должно получиться 732422 + 23 =732445 рестрикционных

фрагментов.

. 52734 + 1 =52735 фрагментов.

. 24414 + 4.

. Bam I может разрезать фрагменты с образованием липких

400

концов, а ДНК-лигаза скрепит их в одну молекулу.

. 52734 фрагментов.

Тест 3

Ниже приведены 4 правильных ответа для 8 задач (1–).

Поставьте в ответах те номера задач, которые им соответствуют.

. ДНК может быть разрезана в одном месте рестриктазой Hae III

с образованием двух фрагментов.

. Фрагменты а и б могут быть разрезаны рестриктазами Hind III

и Hpa II соответственно.

. Средняя длина фрагментов ДНК при разрезании EcoRI

составит 4096 нуклеотидных пар.

. В результате полного расщепления человеческой ДНК

рестриктазой Not I должно получиться 45776 + 23 = 45799

фрагментов.

. Средняя длина фрагментов ДНК при разрезании EcoRI

составит 2055 нуклеотидных пар.

Тест 4

Ниже приведены 3 правильных ответа для 7 задач (9–5).

Поставьте в ответах те номера задач, которые им соответствуют.

. 3296 + 1 = 3297 фрагментов.

. 18359 рестрикционных фрагментов.

. С помощью Hind III можно разрезать оба фрагмента ДНК с

образованием липких концов АГЦТ. Затем при смешении фрагментов

липкие концы скрепятся между собой за счет водородных связей, а

окончательную сшивку в единую гибридную молекулу произведет

ДНК-лигаза.

. 22575 рестрикционных фрагментов.

Тест 5

1. Назовите функцию, которую выполняют ДНК-лигазы:

а) доставка чужеродной ДНК в клетку;

б) разрезание ДНК;

в) сшивание двух фрагментов ДНК с образованием полной

структуры.

2. Рестриктазы действуют на:

а) одноцепочечную ДНК;

б) одноцепочечную РНК;

в) двуцепочечную ДНК.

3. Какова длина распознаваемых рестриктазами участков ДНК?

401

а) 2-3 пары нуклеотидов;

б) 4-8 пар нуклеотидов;

в) более 8 пар нуклеотидов.

4*. Как называется место, в котором рестриктаза разрезает ДНК?

а) сайт рестрикции;

б) сайт узнавания;

в) сайт расщепления;

г) распознаваемые участки.

5. Назовите бактерию, из которой была выделена рестриктаза

EcoR I:

а) Bacillus amyloliquefaciens;

б) Escherichia coli;

в) Haemophilus haemolyticus;

д) Bacillus subtilis.

6. Рестриктазы действуют:

а) только на ДНК бактерий;

б) только на ДНК вирусов;

в) на ДНК растений и животных;

г) им безразлично, чью ДНК разрезать.

7*. Выберите рестриктазы, которые разрезают ДНК с

образованием тупых концов:

а) Bam I;

б) Sma I;

в) Hae III;

г) Hind III;

д) Hpa II.

8. Назовите сайт узнавания для рестриктазы EcoR I:

а) 5`-Г-А-А-Т-Т-Ц-3`

3`-Ц-Т-Т-А-А-Г-5`

б) 5`-Г- Г-А-Т-Ц-Ц-3`

3`-Ц-Ц-Т-А-Г-Г-5`

в) 5`-Ц-Ц-Ц -Г-Г- Г-3`

3`-Г-Г- Г- Ц-Ц-Ц-5`

г) 5`-Ц-Ц-Г-Г-3`

3`-Г-Г-Ц-Ц-5`.

9. Какая из нижеприведенных рестриктаз узнает

последовательность ДНК 5`-Ц-Ц-Ц-Г-Г-Г-3`

402

3`-Г-Г-Г-Ц-Ц-Ц-5`?

а) Hae III;

б) Hind III;

в) Hpa II;

г) Bam I;

д) Sma I.

10. Сколько рестриктаз известно в настоящее время?

а) более 120;

б) более 300;

в) более 500;

г) около 1000.

11. Какую связь лигируют ДНК-лигазы?

а) водородную;

б) фосфодиэфирную;

в) пептидную.

12. На сколько частей рестриктаза EcoR I разрежет предлагаемую

последовательность ДНК из 23 нуклеотидов:

5΄ ГГТТЦАГАГААТТЦАЦГТААТЦЦ-3΄

3΄ ЦЦААГТЦТЦТТААГТГЦАТТАГГ-5΄ а) на 2 части;

б) на 3 части;

в) на 4 части;

г) не разрежет.

13. Какая из нижеприведенных рестриктаз может разрезать

данную последовательность ДНК:

5΄- ЦГГЦАТТГЦАТГТТАГЦЦГГТАГЦЦ-3΄ 3΄-ГЦЦГТААЦГТАЦААТЦГГЦЦАТЦГГ-5΄ а) Sma I;

б) Hae III;

в) Bam I;

г) Hpa II;

д) Hind III.

14. Назовите нуклеотиды, образующие липкие концы при

разрезании молекулы ДНК рестриктазой EcoR I:

а) ААТТ

ТТАА

б) ГААТТ

ЦТТАА

403

в) ГААТ

ЦТТА

г) ГААТТЦ

ЦТТААГ.

З ан ят ие6. В ЕК ТО РН ЫЕС ИС ТЕ МЫ П РИ МЕ НЯ ЕМ ЫЕД ЛЯ К ЛО НИ РО ВА НИ Я ВК ЛЕ ТК АХП РО КА РИ ОТИЭ УК АР ИО Т.

Цель занятия: ознакомиться с плазмидными, фаговыми и

космидными векторами, освоить методы введения и клонирования

чужеродных ДНК с помощью векторов на примере решения типовых

задач, получить представление о геномных библиотеках и способах

их создания на примере решения типовых задач.

1 Векторы и их применение.

2 Простейшие плазмидные векторы pSC101 и pBR322.

3 Плазмидные векторы усложненной конструкции.

4 Получение векторов с использованием фага λ.

5 Строение космид.

6 Создание генных библиотек и их использование.

Тематика рефератов

1. Векторы прокариот и методы их введения в клетки.

2. Плазмидные векторы и принципы клонирования в космидах.

3. Векторы на основе бактериофагов, принципы клонирования.

Вопросы для самоконтроля

1. Что такое векторы и какое применение они находят в генной

инженерии?

2. Что такое плазмида?

3. Какими свойствами должны обладать плазмиды как векторы?

4. Дайте характеристику плазмидам pSC101 и pBR322.

5. Опишите строение и свойства плазмиды типа pUC.

6. Назовите виды векторов.

7. Каков недостаток плазмид как векторов?

8. Как конструируются специальные штаммы λ?

9. Назовите этапы клонирования фрагмента ДНК.

404

10.Что называют космидами и каково их строение?

11.Что такое cos-сайты.

12. Как происходит составление геномных библиотек?

Задание 1. Разобрать понятия: маркер для селекции,

реципиентный организм, трансформированные организмы, гены

устойчивости, участок множественного клонирования, кольцевая

молекула ДНК, чужеродная ДНК, самостоятельная репликация.

Задание 2. Решить предлагаемые задачи:

1. Ниже приведён фрагмент ДНК, можно ли встроить его в

плазмиду pSC101?

5`-АГГЦЦТГААТТААГГЦААТАГТГТГААТЦА-3`

3`-ТЦЦГГАЦТТААТТЦЦГТТАТЦАЦАЦТТАГТ-5`

2. Ниже приведены два одноцепочечных фрагмента ДНК. Какой

из них в двухцепочечном варианте можно использовать для

встраивания в плазмиду pSC101?

а) 5`-ГГЦЦТГААТТЦААГЦАТАГТГТГААТТЦАА-3`

б) 5`-ТЦЦГГАЦТТААТТГТТАТЦАЦАЦТТАГТ-5`

3. Кольцевая плазмида pBR322 имеет участки расщепления

различными рестриктазами. Какой из ниже приведённых фрагментов

двухцепочечной ДНК можно встроить в данную плазмиду?

5`-ЦЦГАТТЦАГАТГТААГГЦААТАГТГТГАТТЦАЦА-3`

3`-ГГЦТААГТЦТАЦАТТЦЦГТТАТЦАЦАЦТААГТГТ-5`

5`-ЦЦТТААГЦТТАГГЦТААГГЦААТАГААГЦТТТЦААТГ-3`

3`-ГГААТТЦГААТЦЦГАТТЦЦГТТАТЦТТЦГАААГТТАЦ-5`

4. Какой из ниже приведённых фрагментов двухцепочечной ДНК

можно встроить в плазмиду pBR322?

5`-ЦЦГААТТЦАГАТГТААГГЦААТАГТГТГААТТЦАЦА-3`

3`-ГГЦТТААГТЦТАЦАТТЦЦГТТАТЦАЦАЦТТААГТГТ-5`

5`-ЦЦТТААГЦТТАГГЦТААГГЦААТАГААГЦТТЦАЦАТГ-3`

3`-ГГААТТЦГААТЦЦГАТТЦЦГТТАТЦ ТТЦГААГТГТАЦ-5`

5. В плазмиде pUC18 имеется полилинкерный участок, который

содержит сайты рестрикции для 10 различных рестриктаз. Можно ли

встроить в эту плазмиду приведённые ниже фрагменты

405

7 kb

6 kb

4 kb

2 kb

1 kb

HindIII

SmaI

Смесь

Рис. 2. Электрофореграмма

фрагментов ДНК

двухцепочечной ДНК?

5`-

ЦЦГААТТЦАГАТГТААГГЦААТАГТГ

ТГААТТЦАЦА-3`

3`-

ГГЦТТААГТЦТАЦАТТЦЦГТТАТЦАЦ

АЦТТААГТГТ-5`

5`-

ЦЦТТААГЦТТАГГЦТААГГЦААТАГА

АГЦТТТЦААТГ-3`

3`-

ГГААТТЦГААТЦЦГАТТЦЦГТТАТЦТ

ТЦГАААГТТАЦ-5`

6. Имеется фрагмент двухцепочечной ДНК следующего состава:

5`- ТАГГАТЦЦАТТАААТАГТГГАТЦЦГТ -3`

3`-

АТЦЦТАГГТААТТТАТЦАЦЦТАГГЦА-

5`

Можно ли встроить данный фрагмент

в плазмиду pBR322? Как подтвердить,

что фрагмент чужеродной ДНК встроен в

плазмиду pBR322?

7. В плазмиду pBR322 вставлен

фрагмент чужеродной ДНК.

Трансформированные такой плазмидой бактерии растут на

питательной среде с ампициллином, но не растут на питательной

среде, содержащей тетрациклин. Какой известной вам рестриктазой

можно вырезать чужеродную ДНК из плазмиды?

8. Ген Ms находится в кольцевой плазмиде величиной 5 000

нуклеотидных пар (5 000 нп). Разрезание плазмиды рестрикционным

ферментом Hind III дает фрагменты 1, 2 и 3, как показано на рисунке

1 (H - Hind III рестрикционные сайты):

Тандемная копия гена Ms содержится только в одном Hind III

фрагменте. Если ген Ms кодирует регуляторный белок MSS4,

состоящий из 300 аминокислот, то укажите, в каком фрагменте

плазмиды расположены копии гена Ms?

9. Фрагмент ДНК мыши величиной 4 кб, имеющий на концах

сайты рестрикции для EcoRI, содержит ген М. Этот фрагмент был

1400 нп

800 нп

2800 нп

Н

Н

Н

2

3

1

Рис. 1. Рестрикционная карта

кольцевой плазмиды с

указанием сайтов

рестрикций для фермента

Hind III.

406

9 kb

8 kb

4 kb

2 kb

1 kb

SmaI

HindIII

Смесь

Рис. 4. Электрофореграмма

фрагментов ДНК.

3 kb

встроен в плазмиду pBR322 по EcoRI сайту. Полученная

рекомбинантная плазмида была разрезана двумя рестриктазами,

электрофоретический спектр полученных рестрикционных

фрагментов, окрашенных этидиум бромидом, представлен на рисунке