Глава 1. Материалы и методы

1. Характеристика объекта исследования

Эхинацея пурпурная (Echinacea purpurea L.) – один из трех наиболее распространенных видов рода эхинацея наряду с эхинацеей бледной (Echinacea pallida) и эхинацеей узколистной (Echinacea angustifolia). В различных видах эхинацеи обнаружено множество химических соединений, обладающих выраженной фармакологической активностью. Основными классами биологически активных веществ эхинацеи пурпурной являются: полисахариды и их мономеры, ГКК и их производные, флавоноиды, алкиламиды ненасыщенных кислот, полиацетилены, входящие в состав эфирного масла.

Комплекс биологически активных веществ эхинацеи оказывает противомикробное, противовоспалительное и иммуномодулирующее действие. Водорастворимый полисахаридный комплекс усиливает фагоцитоз, а также миграцию лейкоцитов в очаг воспаления, активирует Т-лимфоциты, стимулирует продукцию интерферона. Эхинакозид (глюкозид 2,3-О-дикофеилвинной кислоты), а также полисахариды эхинацеи пурпурной обладают противовирусной активностью, угнетая действие вирусов герпеса, везикулярного стоматита, гриппа, полиомиелита и др. в условиях in vitro и in vivo. Благодаря присутствию биофлавоноидов и производных кофейной (3,4-гидроксикоричной) кислоты препараты эхинацеи проявляют антиокисидантную и радиопротекторную активность. Декстрановые полисахариды и производные кофейной кислоты эхинацеи (2,3-O-дикофеилвинная кислота (цикориевая кислота), 2-O-кофеилвинная кислота (каффаровая кислота), 5-O-дикофеилхинная кислота (цинарин) и хлорогеновая кислота) способны ингибировать активность гиалуронидазы и тем самым снижать проницаемость соединительной ткани, препятствуя проникновению микроорганизмов. Перечисленные соединения являются активными скавенджерами свободных радикалов кислорода. Поскольку свободные радикалы, образующиеся в ходе цепных реакций перекисного окисления липидов, являются важными медиаторами воспалительной альтерации тканей, именно благодаря антиоксидантной активности проявляются противовоспалительные свойства эхинацеи. БАВ эхинацеи также проявляют противоопухолевые свойства. Уже имеется положительный опыт их применения при лечении пациентов с раком печени, толстой и прямой кишки. Учитывая стимулирующее влияние ВПС и фенольных соединений на лейкопоэз, препараты эхинацеи, несомненно, должны найти более широкое применение в клинической онкологии (Самородов и др., 1996; Середа и др., 1998). В целом лекарственные препараты эхинацеи широко используются в современной медицине, поэтому актуальной задачей является поиск альтернативных природному лекарственному сырью источников получения БАВ эхинацеи пурпурной.

Объектами исследований в настоящей работе служили свободные и иммобилизованные клетки суспензионной культуры эхинацеи пурпурной.

2. Питательные среды и физические условия культивирования

Для культивирования клеточных культур эхинацеи пурпурной были использованы 2 типа питательных сред: стандартная питательная среда по прописи Мурасиге-Скуга с добавлением фитогормонов (таблица 1.1) и модифицированная (продукционная) питательная среда (таблица 1.2). В качестве ауксинов стандартная питательная среда содержала 2,4-Д в концентрации 0,5 мг/л и ИУК в концентрации 2,0 мг/л, а в качестве цитокининов – 0,5 мг/л кинетина. Модифицированная питательная среда включала НУК в концентрации 1,0 мг/л и ИУК в концентрации 2,0 мг/л, а также 0,5 мг/л кинетина.

Таблица 1.1