Сорбенти для гідрофобної хроматографії.

При проведенні гідрофобної технології потрібно враховувати фізико-хімічні параметри сорбентів: пористість, питому поверхню, гідрофільні і гідрофобні властивості, хімічну стабільність, інертність, проникність. Всім цим вимогам відповідають оберненофазні гідрофобні сорбенти і макропористі гетерогенні полімерні сорбенти типу солоза К 30/40, К 20/40,

К 10/40, КГ 8/40, гідрофобні властивості яких виражені слабше, ніж в оберненофазних сорбентів.

Поверхня кремнеземних сорбентів містить велике число силанольних (SiОН) і силоксановbх груп (Si-О-Si), а також невелика кількість домішок оксидів металів (табл.2). Найбільшою хімічною однорідністю володіють аеросилогели (силохроми), що утворюються спіканням частинок непористого високодисперсного діоксиду кремнію - аеросилу.

Таблиця 2.

Деякі типи кремнеземних сорбентів для офх біологічно активних речовин

Найменування	Розмір пор, нм	Питома поверхня, м2/г	Об’єм пор, м3/г	Форма	Вміст
Макропористе скло	20 – 400	1 – 100	0,4 – 2,3	Гранули сфери-чної і неправи-льної форми, шарові гранули	90% SiO2 40% B2O3
Макропористі силікагелі	4 – 100	5 – 350	0,4 – 1,2	------//-------	99,7% SiO2, 0,3% Fe, Al, Ti
Аеросилогелі (силохроми) Макропориста кераміка	8 – 70 500 – 1500	100 – 30 0,4 – 1,6	0,8 – 2,0	------//------- Гранули непра-вильної форми	90% SiO2, Al2O3, K2O3, Na2O
Поверхнево-шарові кремнеземи	5 – 100	20 – 1	0,1	Гранули з пори-стим поверхневим шаром	–

Різні модифікації методів ОФХ широко використовують для очищення пептидів, таких, як окситоцин, ліпресин, АКРГ і його похідних, пептидного гормону росту - соматотропину, пептидннх антибіотиків, лейкоцитарного інтерферону, для поділу високомолекулярних білків (хімотрипсиногену, ферритину й ін.).

Використання гідрофобної хроматографії зручне і при роботі з висококонцентрованими розчинами. Так, розчин амонію сульфату в концентраціях, трохи нижче необхыдних для висолювання білка, сприяє зв’язуванню білків з гідрофобними гелями. Висока концентрація солі знижує розчинність білків і збільшує їх здатність взаємодіяти з неполярною поверхнею сорбенту. Фракціонування зв’язаних білків часто досягається зниженням полярності елюента (наприклад, за допомогою поліетиленгликоля).

При використанні іон-парних агентів досягається додаткове посилення селективност оберненофазних адсорбентів при поділі білків, олігопептидів і інших БАР.

Нижче приведений список катіонних і аніонних амфільних з'єднань, які використовуються в якості іон-парних агентів:

Катіонні Аніонні

R₄N⁺ Алкілсульфонат

R₃NH⁺ Толуолсульфонат

S₂NH₂ Нафтилінсульфонат

R - органічні радикали С₁-С₁₀ Бутилфосфат

Цитрат

Трифторацетат

При підборі умов поділу суміші білків при ОФХ обов'язково враховують рН розчину, в'язкість і температуру.