
- •Н.П. Братилова, к.В. Шестак культура ткани
- •Содержание
- •Лабораторное занятие 1 – Знакомство с культуральной лабораторией и оборудованием
- •Посуда для приготовления и хранения питательных сред
- •Усвоить правила работы с культуральными инструментами;
- •Лабораторное занятие 2 - Стерилизация
- •Культуральное оборудование и инструменты перед стерилизацией тщательно подготавливают:
- •Способы стерилизации
- •Задание 2 – Освоить методы стерилизации исходного растительного материала Пояснение к заданию:
- •Лабораторное занятие 3 - Изолирование тканей растений
- •Пояснение к заданию:
- •Лабораторное занятие 4 – Приготовление питательных сред
- •Бидистиллированная вода
- •Какие основные вещества входят в состав питательных сред?
- •Лабораторное занятие 5 – Техника выращивания изолированных тканей растений Задание 1 – Освоить технику выращивания изолированных тканей растений
- •Выбор подходящего для решения поставленных задач сорта (генотипа) и нужной части растений для закладки культуры.
- •Регенерация жизнеспособных растений
- •Лабораторное занятие 6 - Методы оценки результатов микроразмножения
- •2. Определение сухого веса
- •3. Подсчет числа клеток
- •Лабораторное занятие № 7 - Деловая игра «Культивирование тканей растений при микроразмножении»
- •Приложение а (справочное) Состав питательных сред, мг/л
- •Приложение б (справочное) Питательные среды для культуры тканей разных видов древесных растений
- •Приложение в
- •Использование культуры in vitro в теоретической и практической селекции
- •Приложение г (справочное) Термины и определения, используемые в культуре ткани
- •Приложение д (обязательное)
- •Приложение е Перечень тем рефератов по дисциплине
- •Приложение ж Рейтинговая система оценки знаний студентов
- •Приложение з Образец кроссворда по культуре ткани
- •Приложение и Тестовые задания по дисциплине
- •Перечень задач по определению роста ткани при микроклонировании различными методами
- •Библиографический список
Приложение в
(справочное)
Использование культуры in vitro в теоретической и практической селекции
Части растения, культивируемые in vitro |
Постановка задачи |
Верхушки побегов |
- Размножение в стерильных условиях отдельных растений (клонирование). Получение линий в селекции на гетерозис. - Получение безвирусного материала у сортов и селекционных форм. |
Цветочные почки, завязи, семяпочки |
- Преодоление половой несовместимости при межвидовых и межродовых скрещиваниях путем оплодотворения in vitro. |
Зародыши |
- Преодоление постгамной несовместимости при отдаленной гибридизации и размножение гибридных растений. Прерывание покоя семян. - Размножение в стерильных условиях при соматическом эмбриогенезе, полиэмбрионии. |
Пыльники, пыльца |
- Получение гаплоидных тканей и растений. - Получение и отбор мутантов на гаплоидном уровне. |
Клетки |
- Генетические и физиологические исследования. - Мутации и отбор на клеточном уровне. - Получение суспензионных культур. - Производство протопластов и их изоляция. - Преодоление про- и постгамной несовместимости путем соматической гибридизации. - Генетически идентичное размножение. |
Приложение г (справочное) Термины и определения, используемые в культуре ткани
Агар - полисахарид - вытяжка из морских водорослей, чаще всего входит в состав питательной среды.
Адвентивный орган – почки, побеги, возникшие из тканей и клеток обычно их не образующих.
Андрогенез – развитие яйца, имеющего только отцовские хромосомы – мужской партеногенез.
Ауксины – вещества, влияющие на деление, растяжение и дифференциацию клеток; стимулируют образование корней.
Бластомеры – клетки, образующиеся при дроблении яйца животных.
Бластопор – отверстие, с помощью которого внутренняя полость зародыша на стадиигаструлы сообщается с внешней средой.
Бластоцель – полость внутри зародыша, образующаяся на стадии бластулы.
Бластула – стадия в развитии зародыша, на которой он представляет собой полый шар из одного слоя клеток, стадия завершает процесс дробления яйца.
Вегетативное размножение – образование нового организма из части материнского растения без участи полового процесса.
Витрификация – появление аномальных побегов.
Гастроцель – полость внутри зародыша, образующаяся на стадии гаструлы.
Гаструла – стадия в развитии зародыша, на которой он характеризуется наличием двухслойной стенки и полости, сообщающейся с внешней средой.
Гиббереллины – вещества, способствующие развитию надземной части растений; усиливают рост и вытягивание стебля, листьев, сформировавшихся почек.
Ген – участок хромосомы, обладающий определенной биохимической функцией и оказывающий специфическое влияние на свойства особи. Функционально неделимая единица наследственного материала.
Гиногенез – развитие яйца без участия сперматозоида – женский партеногенез.
Дегидратация - обезвоживание
Декапитация – метод повышения урожайности древесных растений, основанный на ограничении вегетативного роста.
Индукция – побуждение, активация.
Исходный растительный материал - любая часть растения, используемая для извлечения экспланта.
Каллюс – раневая ткань, возникающая на месте повреждения тканей, клеток, выполняет функцию защиты и заживления ран, обладает ярко выраженной регенерационной способностью.
Клон – совокупность клеток или организмов, генетически идентичных одной родоначальной клетке. Вегетативное потомство одной особи.
Клональное микроразмножение – массовое бесполое размножение растений в культуре тканей и клеток, при котором возникшие формы растений генетически идентичны исходному экземпляру.
Криопроектор – вещество, затрудняющее кристализацию, уменьшающее обезвоживание и ослабляющее различные токсические эффекты.
Криосохранение – глубокое замораживание и хранение культур при температуре ниже 140 0С.
Культура ткани - сохранение жизнеспособности и выращивание клеток, тканей, органов растений или животных вне организма на (в) специальной питательной среде.
Меристема - образовательная ткань растений долго сохраняющая способность к делению и образованию новых клеток, отличающаяся высокой метаболической активностью. Точка роста стебля.
Микроразмножение – метод развития новых растений в искусственной среде при асептических условиях.
Морула – стадия в развитии зародыша, на этой стадии он напоминает по внешнему виду малину, без особой обособленной полости.
Онтогенез – развитие особи от рождения до смерти.
Органогенез – процесс возникновения, формирования и развития органов. Образование в культуре ткани из каллюса придаточных побегов и корней.
Партеногенез – развитие зародыша из неоплодотворенной клетки.
Пассаж – однократный перенос экспланта на свежую питательную среду.
Пассирование – неоднократная пересадка экспланта на свежую питательную среду.
Питательная среда - включает такой набор веществ и в таких пропорциях, которые обеспечивают деление, рост и дифференциацию размножаемой ткани.
Пролиферация – тип уродливости у растений, прорастание сформировавшегося органа другим. Многократное деление живых клеток, в результате чего образуется каллюс.
Протопласты - клетки, лишенные клеточной стенки.
Растительная опухоль – масса ткани, лишенная определенной строгой организации, в которой клетки интенсивно делятся.
Регенерация – восстановление целого организма из его части.
Реювенилизация – омоложение организма.
Ризогенез – образование в культуре тканей корней.
Соматический эмбриогенез – восстановление целого организма из его части. Образование в культуре ткани из каллюса зародыша, а затем развитием целого растения.
Суспензия – смесь питательных веществ, воды и кислорода.
Термолабильные соединения - (белковые компоненты, витамины, углекислые соли, растительные экстракты и др.) входят в состав питательной среды, под воздействием высоких температур и давления разрушаются или превращаются в другие вещества.
Тотипотентность клетки – свойство клетки реализовать генетическую информацию ядра, обеспечивающую развитие до целостного организма.
Тотипотентная клетка – клетка, способная дифференцироваться в любую ткань или специализированную клетку.
Цитокинины – вещества, нарушающие покой и стимулирующие рост покоящихся органов; регулируют рост соматических зародышей и формирование растений, необходимы для дифференциации стеблевых почек в культуре каллюсных клеток и при регенерации побегов из клеток эксплантов.
Эксплант – фрагмент ткани или органа, выделенный из материнского организма, культивируемый вне его (на искусственной питательной среде).
Эмбриокультура – выращивание в культуре ткани зародышей.
Энуклеация – метод размножения, основанный на полном удалении ядерного материала из яйцеклетки.