Министерство образования и науки Республики Казахстан

Костанайский государственный университет им. А. Байтурсынова

Кафедра ветеринарной гигиены и микробиологии

Айсина Рая Акылбековна

Ошакбаева Назым Мырзагалиевна

Токсикология и токсикологический анализ

Методические указания к лабораторным занятиям

Костанай, 2007

ББК 48.5 я 73

А 36

Авторы:

Айсина Рая Акылбековна, ст. преподаватель

Ошакбаева Назым Мырзагалиевна, преподаватель

Рецензенты:

Туякова Рауза Какеновна, кандидат ветеринарных наук, доцент

Кулакова Любовь Степановна, кандидат ветеринарных наук, доцент

Айсина Р.А. Ошакбаева Н.М.

А 36 Токсикология и токсикологический анализ -Костанай: КГУ им. А. Байтурсынова, 2007.- 90 с.

В методические указания включены основные разделы курса токсикологии и токсикологического анализа. Методические указания включают 46 тем, цель занятий, контрольные вопросы.

Предназначено для студентов очной и заочной формы обучения по ветеринарным специальностям.

ББК 48.5 я 73

Утверждено Научно-методическим советом Костанайского государственного университета им.А.Байтурсынова, протокол

от 13.06. 2007 г., № 7

© Костанайский государственный

университет им.А. Байтурсынова, 2007

СОДЕРЖАНИЕ

Введение 5

Тема: Правила безопасности в химико-токсикологических

лабораториях 6

Тема: Отбор, упаковка и посылка пат материала на исследование

Правила оформления сопроводительных документов 8

Тема: Правила взятия, упаковки и пересылки проб пат материала, кормов

и воды в лабораторию 10

Тема: Техника анализа зерновых кормов. Приготовление средней пробы.... 12 Тема: Техника анализа грубых кормов. Ботанический анализ сена на предмет определения кондиции соответствия требованиям

приготовления средней пробы ; 13

Тема: Общая схема и порядок химико-токсикологического исследования.. .15

Тема: Методы извлечения ядовитых веществ из корма и пат материала 17

Тема: Экспресс методы обнаружения токсичных металлов и мышьяка.

Обнаружения цинка, меди, ртути 18

Тема: Экспресс методы обнаружения токсичных металлов и мышьяка.

Обнаружения бария, свинца, мышьяка по Зингеру- Блеку 21

Тема: Тонкослойная хроматография (экстракция, очистка экстрактов,

концентрирование экстрактов) 23

Тема: Обнаружение и определение химических веществ изолируемых

специальными методами ...26

Тема: Определение содержание фтора в воде, биологическом материале и

минеральных веществах 29

Тема: Ферментный метод определения ФОС (по А.А. Покровскому в

модификации Д.Д. Полозова и В.А. Полецкого) 30

Тема: Определение ФОС в воде и кормах 31

Тема: Определение ХОС в воде, кормах и биологических объектах,

методом тонкослойной хроматографии 33

Тема: Определение гексахлорциклогексана в комбикормах. Определение полихлоппинена и полихлоркамфера в кормах, тканях животных и

молоке 36

Тема: Определение кельта в органах и тканях животных 37

Тема: Определение производных 2,4-Д 38

Тема: Методы обнаружение щелочей 39

Тема: Методы обнаружение кислот………………………………... 41

Тема: Обнаружение фенола 42

Тема: Обнаружение формальдегида 43

Тема: Определение поваренной соли и карбамида в пат материале 44

Тема: Методы качественного и количественного обнаружения нитратов и

нитритов 46

Тема: Микозы и микотоксикозы. Кормовые отравления 48

Тема: Токсикологический анализ при отравлениях алкалоидами 51

Тема: Токсикологический анализ при отравлениях сапонинами 54

Тема: Токсикологический анализ при отравлениях гликозидами 55

Тема: Токсикологический анализ при отравлениях соланином 56

Тема: Токсикологический анализ при отравлениях госсиполом 59

Тема: Токсикологический анализ при отравлениях полынью 60

Тема: Лабораторная диагностика отравлений растениями, содержащими

алкалоиды 61

Тема: Определение гликозидов и сапонинов 63

Тема: Качественное определение сапонинов в растительном материале 65

Тема: Обнаружение госсипола в кормах растительного происхождения (по

В.М.Серову) 66

Тема: Работа с гербарием ядовитых растений 67

Тема: Определение токсичности патогенных грибов 67

Тема: Определение токсичности фуражного зерна, его переработки и

комбикорма по конечной пробе на кроликах 70

Тема: Ветеринарно-санитарная экспертиза мяса вынужденно убитых

животных при отравлении 71

Тема: ВСЭ молока, жира, меда и рыбы ...72

Тема: Судебно-ветеринарное вскрытие 73

Тема: Токсикологический анализ при отравлениях крысидом 75

Тема: Токсикологический анализ при отравлениях ТМТД 76

Тема: Биологические методы обнаружения остатков пестицидов в кормах и

пат материале 77

Тема: Федеральные санитарные правила, нормы и гигиенические

нормативы 82

Тема: Ситуационные задачи 85

Список использованной литературы 89

ВВЕДЕНИЕ

В связи с возрастающим объемом поставок сельскому хозяйству химических средств защиты растений и животных, кормовых добавок увеличивается контакт с ними сельскохозяйственных животных, что может привести к возникновению случаев отравления. Определенную опасность в токсикологическом отношении имеют кормовые токсикозы.

В этой связи знание вопросов механизма действия ядов на животный организм, средств антидотной терапии, мер профилактики, методов экспрессов диагностики приобретают особое значение.

Настоящие методические указания предусматривают освоение студентами методов качественного и количественного анализа некоторых минеральных, растительных ядов, пестицидных средств. Для лучшего освоения лекционного и практического материала к каждому занятию даны контрольные вопросы. Элементы проблемного обучения изложены в форме решения ситуационных задач.

Тема: Правила безопасности работы в химико-токсикологических

лабораториях

Цель занятия: Изучить основные правила личной безопасности при работе в химико-токсикологических лабораториях, освоить их и руководствоваться ими при необходимости.

После изучения приведенных ниже правил и опроса, студенты получают зачет по технике безопасности и подтверждают это собственноручной подписью в журнале.

1 Прежде чем приступить к работе, внимательно ознакомьтесь с заданием, с правилами безопасности работы, оборудованием, материалами и аппаратурой.

2 Не трогайте, не включайте и не выключайте без разрешения руководителя рубильники и электроприборы.

3 Немедленно сообщайте руководителю о замеченных неисправностях и нарушениях правил безопасности.

4 Не загромождайте свое рабочее место оборудованием и вещами, не относящимися к выполняемой работе.

5 При работе в лаборатории выполняйте только ту работу, которая вам поручена. Категорически воспрещается производить другие работы.

6 Не входите в лабораторию без дела: этим вы отвлекаете внимание товарищей, оставляете без наблюдения свою работу, что может повлечь за собой несчастный случай.

7 Небрежное обращение с огнем и курение в запрещенных местах могут явиться причиной пожара.

8 Берегите государственное имущество, бережно относитесь к приборам, лабораторному и аудиторному оборудованию.

9 Запрещается оставаться в лаборатории одному. Необходимо присутствие второго лица в случае оказания первой помощи при пожаре или ином бедствии.

10 Запрещается в лабораториях находиться в пальто или развешивать верхнюю одежду на лабораторном оборудовании.

11 После окончания работы приведите в порядок рабочее место.

12 Химические реакции необходимо выполнять с такими количествами и концентрациями веществ и при таких условиях опытов, как это указано в соответствующих руководствах.

13 При выполнении задания работайте стоя, сидя производят такие работы, которые не вызывают опасности воспламенения, взрыва и разбрызгивания кислот.

14 При работах в вытяжном шкафу, в целях более эффективного действия вентиляции, приподнимите дверцу вытяжного шкафа на одну треть, или на одну четверть подъема. После окончания работ – плотно прикройте двери.

15 При переносе химического стакана с горячей жидкостью необходимо стакан держать вдали от себя, подложив под дно полотенце, во избежании ожогов.

16 Запрещается проведение опытов в грязной посуде.

17 Запрещается производить на рабочих местах работы, связанные с выделением летучих веществ, как аммиак, хлор, бром. Подобные работы производятся только в вытяжных шкафах или в отведенных этих целей помещениях.

18 Очень осторожно следует переливать кислоты и щелочи из бутылей в другие сосуды.

19 Запрещается пробовать на вкус или запах какие-либо вещества, а также пить воду из химических стаканов. Со всеми веществами в лаборатории надо обращаться как с ядами.

20 При постановке опытов, представляющих опасность самовоспламенения и взрыва, применяйте следующие меры предосторожности:

а) надевайте предохранительные очки.

б) надевайте шлем или маску из органического стекла.

в) ограждайте рабочее место толстостенными стеклянными экранами.

21 В случае воспламенения горячих жидкостей или других веществ:

а) быстро погасите горелку и выключите электромагнитные приборы.

б) оставьте посуду с огнеопасными веществами и примите меры к тушению

пламени.

в) горячие жидкости прикройте асбестовым стеклом или засыпьте мокрым песком или водой.

д) во всех случаях при необходимости пользуйтесь огнетушителями и вызывайте пожарную охрану.

22 Если загорится одежда:

а) не бегите.

б) гасите пламя обертыванием в одеяло, войлок, пальто.

Огнетушители в этих случаях использовать нельзя.

23 Если загорятся электропровода – обесточьте электроустановку выключением

рубильника и примите меры к тушению пожара.

24 В случае возгорания в вытяжном шкафу – немедленно выключите вентиляционные установки и приступите к пожаротушению.

25 Будьте осторожны при работе с концентрированными кислотами.

Концентрированная азотная кислота при контакте с органическими веществами (скипидар, промасленные тряпки, древесная стружка) вызывает их воспламенение и пожар.

26 Работая с кварцевыми лампами необходимо:

а) защищать глаза специальными очками со стеклами, поглощающими ультрафиолетовые лучи.

б) избегать длительного облучения открытых частей тела, ибо образовываются ожоги.

27 Пользуясь газом и газовыми горелками помните, что газ ядовит и взрывоопасен, а неправильное и небрежное обращение с ним вызывает отравление, пожары и взрывы.

Тема: Отбор, упаковка и посылка патматериала на исследование

Правила оформления сопроводительных документов

Цель занятия: Освоить и получить определенные технические навыки отбора, упаковки и посылки патматериала на химико-токсикологическое исследование. Правильно составить сопроводительный документ.

Необходимое оборудование и лабораторные животные:

На демонстрационный стол: 1 Кролик

2 75% раствор хлорофоса 100,0

3 Шприц 10,0-1

На столы студентам: 1 Концентрированные корма или зерно

2 Дистиллированная вода

3 Кювет с пинцетом и ножницами

4 Спирт для фиксации патматериала

5 Стеклянные банки на 100,0 по 4 штуки

6 Лигатуры для обвязки банок

7 Клей

8 Бумага для этикеток

9 Весы с разновесом

Техника проведения исследований.

Опыт №1.Получение патологического материала

Кролику вводят внутримышечно или внутривенно летальную дозу 15 мл раствора хлорофоса (3-5 мл на 1 кг веса животного). Наблюдают за состоянием животного вплоть до наступления летального исхода. Затем животное вскрывают и берут патматериал для химико-токсикологического анализа.

Для этой цели пригодны органы павших животных (печень, почки, сердце) содержимое желудка и кишок, рвотные массы, а также фураж, остатки корма, различные подозрительные вещества и удобрения. Пробу помещают в чистую стеклянную посуду, закрывают пробкой, обвязывают шпагатом и опечатывают сургучом. Затем наклеивают этикетку с указанием вида материала, его количества и времени взятия пробы.

В сопроводительной указывают адрес отправителя и получателя, название и количество материала, для какого исследования последний направляется.

Патматериал берут в количестве не менее 1 кг, а трупы мелких животных и рыб посылают целиком, не вскрывая животных.

Материал консервируют только спиртом – ректификатом. Среднюю пробу воды из водоёма берут в количестве 500 мл.

Вместе с пробами патматериала в лабораторию посылают:

1 Образец спирта – 30 мл.

2 Историю болезни (или копию) с указанием прижизненного диагноза.

3 Протокол вскрытия с указанием предполагаемой причины падежа.

4 Описание обстановки, при которой произошло отравление животного (в помещении, на пастбище, в какое время суток, вид корма, условия кормления).

ОБРАЗЕЦ СОПРОВОДИТЕЛЬНОЙ

В Костанайскую областную

ветеринарную лабораторию.

Химико-токсикологический отдел.

При этом направляются для химико-токсикологического анализа в четырех опечатанных банках внутренние органы теленка и проба оставшегося в кормушке корма.

Теленок пал 14.09.06г. принадлежал учхозу «Сары-Агаш» Денисовского района. Просим произвести исследование на наличие фосфорорганических соединений.

В банке № 1 – сердце, легкие, печень. Вес брутто 1,8 кг.

В банке № 2 - кишечник, содержимое желудка. Вес брутто 1,2 кг

В банке № 3 - остаток корма. Вес брутто 1,3 кг.

В банке № 4 - образец спирта (50 мл), которым законсервирован пат.материал.

Заключение по токсикологическому анализу просьба выслать по адресу : с.Денисовка, райветстанция.

Приложение: 1 Упомянутые 4 банки.

2 Копия истории болезни.

3 Протокол вскрытия павшего теленка.

4 Описание условий, при которых пало животное.

Зав. райветстанции,

ветврач Подпись