Вопросы для самоконтроля.

1. Что называют стерилизацией '?

2. Какие виды стерилизации вам известны ?

1. Какой вид стерилизации наиболее широко применяется в микробиологической практике ?

3. Какие методы тепловой обработки вам известны ?

4. Как стерилизуют посуду ? Как ее готовят к стерилизации ?

5. Каким образом удобнее стерилизовать питательные среды ?

6. Что называют стерилизацией ? В чем сущность метода стерилизации '?

7. Зачем вводят фильтры в пипетки перед стерилизацией ?

2. Как готовить биологическую пробку ? Какие требования предъявляются к биологическим пробкам ?

10 .Каково назначение аппаратов . автоклава кипятильника Коха сушильного шкафа ?

Домашнее задание:

1. Оформление отчета по лабораторному занятию.

2. Подготовиться к защите лабораторного занятия.

Лабораторная работа № 6 Влияние условий внешней среды: температуры, влажности, рН среды и др. Факторов на развитие микроорганизмов.

Учебная цель: Познакомить с методикой постановки некоторых опытов, выясняющих влияние отдельных факторов среды на развитие микроорганизмов

Материальное обеспечение:

1. Ломтики белого хлеба 3 шт.

2. Чашки Петри 3 шт.

3. Микробиологическая петля 1 шт.

4. Культура бактерий 1 пробирка

5. Культура плесневых грибов 1 чашка

6. Предметные стекла 10 шт.

7. Спиртовка 1 шт.

8. Водяная баня 1 шт.

9. Чашки Петри с МПА 9 шт.

10. Раствор пенициллина 1 флакон

11. Красители 1 комплект

12. Большая пробирка 1 шт.

План проведения работы.

1. Определить влияние влажности на развитие микроорганизмов (бактерий и грибов).

2. Определить влияние температуры на развитие микроорганизмов .

3. Определить влияние антибиотиков на микроорганизмы .

4. Определить влияние натрий хлор на развитие микроорганизмов .

5. Определить влияние осмотического давления на развитие микроорганизмов .

Организация и методика выполнения работы.

1. Влияние влажности на развитие микроорганизмов.

Взять несколько ломтиков белого хлеба, имеющих разную влажность (один подсушивают, другие смачивают водой ), помещают их в чашки Петри и стерилизуют при 1атм в течение 20 мин. На поверхность одних, после стерилизации вносят профламбированной петлей чистые культуры каких-либо сапрофитных бактерий , на другие ломтики - споры плесневых грибов . Чашки оставляют в теплом месте комнаты или термостате при температуре 25 С.

На следующий день занятий отмечают степень роста бактерий и грибов на субсгракте разной влажности. После просмотра выросших микроорганизмов , делают вывод о большой устойчивости к влиянию влажности на развитие микроорганизмов .

2. Влияние температуры на развитие микроорганизмов.

Чашку Петри с МПА расчерчивают со стороны дна на 3 сектора , на которых обозначают цифры 0, 10, 30. Заготовленную взвесь бесспоровых бактерий посеять бактериологической петлей на сектор 0 т.е. без прогрева.. Посев произвести методом штриха на поверхность агара . Пробирку с культурой поместить в водяную баню и прогреть 10 мин., после чего произвести посев в сектор 10 , снова поместить пробирку с культурой в водяную баню и прогреть ее дополнительно 20 мин. Сделать высев культуры на сектор 30 ( общее время прогрева ). Чашки поставить в термостат дня выращивания при температуре 3 г С. После роста бактерий произвести просмотр секторов , выявить отсутствие или наличие роста ( визуально ), по плотности слоя , его площади выразив обозначениями :

отсутствие роста или слабый рост (-)

умеренный рост (++)

обильный рост (+++)

Приготовить препарат простого окрашивания на одном предметном стекле несколько мазков из разных колонии, промикроскопировать и зарисовать. Результаты опыта оформить в отчете по форме:

Название бактерий	Рост микроорганизмов после нагревания до 800 С			Заключение по опыту
	0 мин	10 мин	30 мин

3. Влияние антибиотиков на развитие микроорганизмов.

1. Чашку Петри с застывшим МПА перевернуть вверх дном и надписать номер группы.

2. Чашку положить на стол крышкой к верх у . соблюдая правила стерильности нанести на поверхность агаровой пластинки каплю взвеси бактерий и тщательно растереть ее по всей поверхности среды при помощи специального шпателя.

3. Профламбированной петлей нанести на поверхность агара диски пропитанные одним из антибиотиков (пенициллином, стрептомицином, левомицетином , биомицином…). Поместить их от края чашки на 1,5 - 2 см. по кругу и в центре .

4. Перевернуть чашки вверх дном и поставить в термостат при температуре 37° С

5. После проращивания чашки Петри с посевом рассмотреть и оценить антибактериальное действие антибиотиков.

6. Измерить с помощью линейки зону задержки роста вокруг каждого диска. При зонах диаметром до 15 мм. - микроб обладает малой чувствительностью к данному антибиотику , диаметром более 25 мм. - высокой чувствительностью и отсутствие зоны роста указывает на устойчивость к данному антибиотику .

Результаты оформить.

Название бактерий	Величина зоны задержки роста (мм .) при действии				Заключение о степени стерильности
	псници-лнна	оиомн-пина	стрепто­мицина	левоми-нетина