Лабораторная работа № 4 Питательные среды и их приготовление.

Учебная цель работы: привить навыки приготовления питательных сред
Материальное обеспечение:
Мясная вода	100 мл
Пептон.	5 г
Агар-агар	10г
Поваренная соль	1 г
Сода, 1% р-р в бюретке
Красный лакмус	1 капельница
Набор пробирок	10 шт
Мерный цилиндр на 100 мл а на 10 мл	1 шт
Марля, вата пипетки, ножницы	1 шт
Машина для изготовления ватных пробок	1 шт
Весы с разновесами
Горелка	1 шт
Воронка водяная для разлива питательной среды	1 шт
Проволочная корзина	1 шт

Организация и методика выполнения работы

Для накопления выделения культивирования и сохранения микроорганизмов пользуются питательными средами, которые не только содержат необходимые питательные вещества но и являются средами обитания микроорганизмов Питательные среды это субстраты, на которых могут развиваться микроорганизмы Потребности м.о. в питательных веществах очень разнообразны. Так, молочнокислые бактерии требуют для своего развития сложных сред в состав которых входят белки, жиры и витамины, многие минеральные соединения. Нитрифицирующие бактерии в лабораторных условиях развиваются исключительно только на минеральных средах, поэтому нет универсальной среды, которая удовлетворяла бы пищевым потребностям микроорганизмов.

Но происхождению питательные среды бывают - естественными и искусственными.

Приготовление мясо-пептонного агара.

К 100 мл мясного бульона добавляют 1 % пептона Пептон- это продукт ферментативного гидролиза белков. Добавляют пептон в среду для увеличения ее питательности, для уплотнения среды в нее добавляют от 2 до 4 % агар-агара

Питательная среда д.б. слабокислой по отношению к цитоплазме микроорганизмов, которые будут выращиваться в ней. Для этого в среду добавляют 0,5% поваренной соли. Реакция среды от 7,0 до 7,4. После введения агар-агара смесь прогревают до неполного студнеобразования.

Приготовление мясо-пептонного желатина.

Эта среда готовится аналогично МПА, но для уплотнения ее применяют на агар-агар, желатин в количестве 10-12% . МПЖ имеет ряд преимуществ перед МПА. Он Лучше соединяется со стеклом, гнилостные бактерии образуют при росте на этой среде весьма характерные колонии, кроме того, некоторые из гнилостных бактерий обладают способностью разжижать желатин, что очень важно для определения вида бактерий. Но МПЖ' плавится при температуре 30-37 ⁰С, в этом его недостаток.

Дня изучения биохимических признаков микроорганизмов пользуются дифференциально-фагностическими средами. Примером таких сред могут служить среды Гисса. Их применяют для изучения способности м.о. ферментировать углеводы.

В состав сред Гисса входит 1% какого-либо углевода, 1% агар-агара и индикатор. Примером такой среды является и среда Эндо, применяемая для выделения Bact. coli. В состав этой среды входит, кроме МПА, насыщенный спиртовой раствор фуксина, 1% лактозы Na₂SO₃ , рН 7-7,2 Bact. coli дает на среде Эндо колонии с металлическим блеском. Для изучения плесневых грибов используют среду Сабуро, следующего состава: 1% глюкозы, 1% пептона, 2% агар-агара рН 5-5.6.