Организация и методика выполнения работы Актиномицеты

Актиномицеты Actmomycetes (или лучистые грибы) - от греч. actis - луч и mycos- гриб - по сво­ему строению сходны с бактериями, низшими грибами и занимают промежуточное положение меж­ду бактериями и плесневыми грибами.

Красятся грамположительно, образуют одноклеточный несептированный, ветвящийся мице­лий (или грибницу), состоящий из сплетения тонких нитей - гифов различной длины, с диаметром, не превышающим диаметр бактерий 0,5 -1 мкм. При определенных условиях роста некоторые виды лучистых грибов образуют в мицелии поперечные перегородки. Актиномицеты хорошо растут при температуре 32-37°С (рН 6,8-7,4). На питательных средах размножаются в виде длинных нитей. Ветвистый мицелий частью погружен в питательную среду, другая часть поднимается вверх в виде воздушного мицелия, ветви которого формируются в стебель - спороносцы. Форма спороносцев у разных видов различна: спиральная или штопорообразная. Спирали могут быть длинными со мно­гими завитками, растянутыми или плотно сжатыми. У других видов спирали могут быть короткими, имеют 1 -2 завитка, растянутые или плотно сжатые в клубок.

Многие актиномицеты дают пигмент разных цветов: розовый, красный, зеленый, бурый, чер­ный. Хорошо красятся анилиновыми красками, большинство грамположительно. Среди актиноми­цетов встречаются кислотоустойчивые виды. Отдельные виды актиномицетов используются для приготовления антибиотиков (стрептомицина, тетрациклина и др.).

На питательных средах актиномицеты образуют пушистые бархатистые мучнистые, преимуще­ственно плотные кожистые колонии, срастающиеся с субстрактом, с характерным землистым запа­хом.

Задание 1

Приготовить препарат актиномицетов. Просмотреть под микроскопом и зарисовать.

Приготовление препарата:

Сначала следует рассмотреть их при малом увеличении непосредственно на питательной среде при малом увеличении на чашках Петри, или по краю колонии в пробирке.

Гифы мицелия частично внедряются в субстракт, частично стелются по поверхности и припод­нимаются над ней. На концах нитей воздушного мицелия хорошо просматриваются спороносцы со спорами.

На чистое предметное стекло наносят этилового спирта или смеси равных объемов этилового спирта и глицерина. В эту каплю вносят кусочек мицелия актиномицетов с органами размножения. Каплю накрывают покровным стеклом и слегка придавливают.

Плесневые грибы:

Плесневые грибы представляют обширную группу растительных организмов, лишенных хролофила. Тело плесневых грибков состоит из множества переплетающихся нитей - гифов, которые густой сетью сплетаются на поверхности питательного субстракта. От этого ветвистого мицелия от­ходят плодоносящие гифы - спорангии и - конидиеносцы, плодовые образования.

Мукоровая плесень / Мисог/

Грибы рода Мукор имеют мицелий, состоящий из одной сильно разветвленной клетки, от ко­торой отходит плодоносящий гифспорангиеносец. На конце гифа вырастает круглое цилиндрическое утолщение - колумелла, на ней находится спорангий со спорами. Оболочка спорангия с мелкоиголь­чатой шероховатой наружной поверхностью густо усеяна игольчатыми кристаллами щавелевокисло­го кальция. На спорангиеносце после освобождения спорангия от спор остается колонка, а в нижней ее части воротник. Мукоровые грибы растут на влажных зернах, кормах, стенках сырых помещений в виде сероватого пушистого налета

Некоторые виды Мукоровых грибов обладают свойством вызывать спиртовое брожение или окисление. Используются в промышленности для производства различных органических кислот, спирта, ферментативных препаратов.

Ризопус /Rhizopus/

Плесневые грибы, имеющие подобие корневых волосков, отличаются от мукоров тем, что от их мицелия отходят побеги столоны, напоминающие усы клубники, при помощи этих побегов, гриб поднимается вверх по стенкам стеклянных сосудов, к которым они прикрепляются своими нитями ризоидами. При развитии волосков образуется узел из которого вскоре отходят спорангиеносцы. В спорангии формируется большое количество опор. У большинства грибов споры имеют яйцевидную иди бочковидную форму, оболочка их имеет складки.

Расположенные пучком стволы спорангиев расширяются на конце и образуют так называемую апофизу. Образование апофизы служит характерным признаком для рода ризопов. Спорангия внача­ле белоснежны, а в зрелом состоянии совершенно черны. При бурном развитии грибное сплетение представляется густо усеянными черными точками.

Аспергилловая плесень / Aspergillus /

В семействе аспергилловых грибов насчитывается около 200 видов. Мицелий септирован (разделен поперечными перегородками) конидиеносцы (у некоторых видов) не септированны, на вершине образуют расширение в виде головки, от которой отходят ответвления - стеригмы с отшнуровывающимися от них конидиями. Конидии располагаются по радиусам шара, напоминают струи воды, выливающейся из лейки, поэтому эти грибы иногда называют леечной плесенью. У разных видов плесеней конидии окрашены различно: черные, светло-зеленые, и др. часто покрыты тонкими щетинками. Гриб принимает участие в минерализации различных органических веществ. Некоторые виды, например Aspergillus niger (конидии гриба имеют черный цвет), применяются в промышленности для получения лимонной кислоты.

Пенициллиум /Penicillium/

Плесневые грибы имеющие ветвящийся мицелий, септированный (толщина нитей 2-3 мкм.) От мицелия отходят септированный конндненосцы, которые на конце разветвляются в виде отростки (стеригм), напоминающих кисть руки. От них отчленяются расположенные в виде цепочек споры -конидии гладкой шаровидной формы. У разных видов гриба споры неодинакового цвета: белые, зеленые... перед прорастанием конидии значительно увеличиваются в объеме.

К роду Peniciliuim относятся большое количество видов, принимающих участие в созревании сыров и получивших название «благородных» плесеней. Отдельные виды гриба, например Peniciliuim notatum, используют для приготовления пенициллина

ЗАДАНИЕ 2

Приготовить препарат Aspergillus. Просмотреть под микроскопом и зарисовать.

При просмотре строения конидиеносцев препаровальной иглой вырезают кусочек мицелия на границе его зеленого и белого участка (в чашке Петри). Если он старый и мицелий уже весь зеленый, просмотр будет неудачным. Осторожно при помощи 2 препаровальных игл, кусочек снимают со среды и помещают в каплю воды, на предметное стекло. Сверху стеклянной палочкой или иглой покровное стекло осторожно надавливают в центре. Препарат рассматривают при малом увеличении; уделяя основное внимание его краям, те хорошо видны кисти конидиеносцев. Затем рассматривают кисточки х 40.

ЗАДАНИЕ 3

Приготовить препарат Aspergillus. Просмотреть под микроскопом и зарисовать.

Для ознакомления со строением конидиеносцев аспергилла препаровальной иглой берут небольшое количество мицелия гриба на границе между коричнево-бурым и черным участком колонии, вносят каплю воды, на стерильном предметном стекле. Далее поступают также как и в случае просмотра пенициллиума

ЗАДАНИЕ 4

Приготовить препарат Мuсor. Просмотреть под микроскопом и зарисовать.

При просмотре мукора осторожно взять препаровальной иглой небольшое количество мицелия и другой препаровальной иглой снять его на сухое предметное стекло. Сначала рассматривают без покровного стекла, при малом увеличении микроскопа Видны спороангненосцы и круглые темные шарики на их концах - спорангии. Они покрыты тонкими шипами из кристаллов щавелевокислого кальция. Затем на поверхность препарата наносят каплю воды , накрывают его покровным стеклом и рассматривают последовательно при х 8, 40. Оболочка спорангия при -этом разрушается и споры вываливаются приготовить препарат из дрожжей. Просмотреть под микроскопом и зарисовать.

Для лабораторных занятий могут быть использованы обычные дрожжи. Небольшой кусочек дрожжевой массы помещают за несколько часов до начала занятий теплую подсахаренную воду и ставят' в теплое место. Образуется

беловатая мутная жидкость. На предметное стекло наносят каплю этой жидкости . закрывают покровным стеклом наносят на него кедровое масло и рассматривают с объективом на х 90.