
- •Лабораторная работа № 1 Правила работы и оборудование микробиологической лаборатории. Знакомство с устройством микроскопа.
- •Ход работы
- •Устройство микроскопа
- •Организация и методика выполнения работы Актиномицеты
- •Изучение подвижности бактерий
- •Лабораторная работа № 3 Способы окрашивания микроорганизмов. Определение основных форм бактерий
- •Организация и методика выполнения работы
- •Лабораторная работа № 4 Питательные среды и их приготовление.
- •Организация и методика выполнения работы
- •Порядок выполнения работы: Приготовить 100 мл мпа:
- •Классификация питательных сред
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 5 Подготовка и основные методы стерилизации сред, посуды, инвентаря
- •Организация и методика выполнения работы
- •Вопросы для самоконтроля.
- •Лабораторная работа № 6 Влияние условий внешней среды: температуры, влажности, рН среды и др. Факторов на развитие микроорганизмов.
- •План проведения работы.
- •Организация и методика выполнения работы.
- •4. Влияние осмотического давления на развитие микроорганизмов ,
- •Лабораторная работа № 7, 8 Микроорганизмы, вызывающие различные виды брожения .
- •Ход урока.
- •Спиртовое брожение.
- •Проведение занятия.
- •Проведение задания.
- •Возбудители гниения и их культивирование (картофельная палочка, сенная палочка, палочка Протея и др.)
- •Организация и методика выполнения работы .
- •1. Аэробные гнилостные микробы :
- •2. Факультативно - анаэробные гнилостные микробы :
- •3. Анаэробные гнилостные микробы :
- •Лабораторная работа № 10 Посев микроорганизмов почвы, воздуха и воды для санитарно-бактериального исследования.
- •Определение титра двухэтапным бродильным методом
- •1 Этап:
- •2 Этап:
- •Определение микробного числа воды.
- •Определение титра Coli способом мембранных ультрафильтров.
- •3. Определение микробного числа воздуха.
- •4. Посев микроорганизмов почвы.
- •Вопросы для закрепления:
- •Лабораторная работа № 11 Санитарно-бактериологические исследования почвы, воздуха, воды.
- •Организация и методика выполнения работы
- •1. Подсчет количества микроорганизмов в посевах воды.
- •Определение титра Coli методом мембранных ультрафильтров.
- •Подготовка мембранных фильтров к анализу
- •Подсчет количества микроорганизмов в водопроводной воде.
- •Подсчет количества микроорганизмов в посевах воздуха.
- •Приготовление почвенной болтушки для посева микроорганизмов.
- •Подсчет количества микроорганизмов в почве.
- •Вопросы для закрепления:
Устройство микроскопа
Механическая часть микроскопа МБР -1 включает штатив с предметным столиком я тубус . Предметный столик может перемещаться в горизонтальной плоскости на 8 мм с помощью двух винтов находящихся справа и слева. Столик может вращаться и вокруг своей оси. На поверхности столика имеются две клемы, зажимающие препарат . Под предметным столиком на штативе укреплен кронштейн конденсора , который может перемещаться в пределах 20 мм специальным винтом, расположенным справа Верхняя часть штатива тубусодержатель имеет форму Дуги и может перемещаться на 50 мм с помощью механизма , смонтированного на основании штатива . Этот механизм приводится в действие вращением макрометрического и микрометрического винтов . предназначенных для трубой и тонкой фокусировки препарата . При вращении этих винтов по часовой стрелке тубусодержатель микроскопа опускается при вращении, против часовой поднимается. В верхней части тубусодержателя находится вращающийся вокруг своей оси револьвер, в отверстия которого ввинчиваются объективы и гнездо для крепления наклонного или прямого тубуса в верхний конец тубуса вставляется окуляр.
Оптическая часть состоит из осветительного аппарата, объектива и окуляра. Осветительный аппарат состоит из зеркала и конденсора и является существенной пястью оптической системы микроскопа табулирующее зеркало закреплено v основания штатива и имеет две стороны: вогнутую и плоскую. Конденсор, укрепленный непосредственно под зеркалом, состоит из нескольких линз и предназначен для собирания параллельных лучей света. Под конденсором имеется ирисовая диафрагма и откидная оправа для светофильтра. Объектив состоит из системы линз, заключенных в металлическую оправу. В микроскопе МБР -1 используются объективы, дающие увеличение в х 8, х 40, х 90 раз. Самой главной линзой объектива является передняя (фронтальная). Чем больше увеличения дает объектив, тем ниже следует опускать его над плоскостью препарата. Другие линзы объектива расположены выше фронтальной и называются коррекционными. Они предназначены для получения боле четкого изображения. Объектив содержит две линзы. глазную {верхнюю ) и собирательную ( нижнюю ). Окуляры могут давать увеличение в х 5 , х 7 , х 10. х 12, х 15, и в х 20 раз, что указано на их оправе. Увеличение, которое дает микроскоп, определяется произведением увеличения объектива на увеличение окуляра Так, например, используя окуляр х 15 и объектив х 90 , можно получить увеличение изображения в 1350 раз.
Отчетливость получаемого изображения определяется разрешающей способностью микроскопа - минимальное расстояние между двумя точками, когда они еще не сливаются в одну. Таким образом, чем больше разрешающая способность микроскопа, тем меньшей величины объект можно увидеть Разрешающая способность невооруженного глаза составляет 200 мк, т.е. 0,2 мм.
Приведенные примеры позволяют говорить о двух функциях микроскопа. увеличении и разрешении. Разрешение определяет отчетливость получаемою изображения, а увеличение - это получение изображения, увеличенного в той или иной степени.
Свободное расстояние от объекта до объектива :
объектив х 8 9 мм
объектив х 40 1-2 мм
объектив х 90 0,2 мм
Различают следующие системы микроскопирования ;
Сухая (воздушная) - когда между объективом и объектом воздух. Пользуемся объективом х 8 , х 40.
Иммерсионная (погруженная) - пользуемся объективом х 90. На препарат капаем кедровое или касторовое масло.
Чем больше степень увеличения, тем меньше резкость изображения.
Правила работы с микроскопом.
Микроскоп удобно устанавливается и затем в течение всей работы не перемещается. Работать следует с одним и тем же микроскопом (его номер записывается в тетрадь ).
Вращая револьвер, ставят объектив с малым увеличением х 8.
Работая зеркалом, необходимо поймать луч света и направить в отверстие предметного столика
Вращая ручку конденсора и пользуясь диафрагмой, создают наилучшее освещение.
Приготовленный препарат помещают на предметный столик и закрепляют при помощи зажимов.
Наблюдая с боку, опускают объектив при помощи макровинта почти до препарата ( 5 мм ).
Затем тубус медленно поднимают при одновременном наблюдении до появления в поле зрения отчетливых контуров препарата.
Фокус уточняют при помощи микровинта.
Для получения большого увеличения на препарат наносят каплю кедрового масла и устанавливают объектив х 90.
Наблюдая с боку, объектив погружают в каплю масла
Микроскопируют и делают зарисовки в тетрадь.
Примечание.
Опускать иммерсионный объектив и погружать его в масло следует с помощью кремальеры, наблюдая с боку затем, чтобы объектив не коснулся препарат и не получил повреждения.
Микроскопировать надлежит попеременно то правым . то левым глазом, оставляя свободный глаз открытым , что предупреждает утомление.
После работы с иммерсионным объективом кедровое масло удаляют с объектива фильтровальной бумагой или батистовой тряпочкой , смоченной бензином.
Последовательность выполнения задания.
Ознакомиться с устройством биологического микроскопа и правилами обращения с ним.
Изучить приемы микроскопирования микроорганизмов.
Рассмотреть с помощью иммерсионного объектива фиксированный препарат окрашенных бактерий в такой последовательности :
поставить микроскоп на стол и найти наилучшее освещение ,
поместить на предметный столик и закрепить зажимами фиксированный препарат,
рассмотреть препарат при сухих объективах и отыскать лучшее место для детального исследования,
поднять тубус микроскопа при помощи револьвера, поставить иммерсионный объектив и нанести каплю кедрового масла на препарат ,
погрузить в кедровое масло нижнюю фронтальную линзу иммерсионного объектива, смотря на препарат с боку,
глядя в окуляр, медленно поднять тубус микроскопа до появления в поле зрения изучаемого объекта
уточнить фокус с помощью микрометрического винта. изучить а зарисовать препарат,
поднять тубус , удалить кедровое масло с иммерсионного объектива .
поставить микроскоп в футляр.
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОПРОВЕРКИ :
Из каких частей состоит биологический микроскоп ?
Что относится к механической части микроскопа ?
Что входит в оптическую часть микроскопа?
Назначение отдельных частей оптики.
Какие марки биологических микроскопов различают ?
Что такое «разрешающая» способность микроскопа ?
Какие системы микроскопирования различают ?
Особенности работы с электронным микроскопом.
Правила работы с биологическим микроскопом.
Устройство бак. лаборатории.
Основные приборы бак. лаборатории.
Домашнее задание:
Оформление отчета по лабораторному занятию.
Подготовиться к защите лабораторного занятия.
Лабораторная работа № 2
Приготовление препаратов из живых микроорганизмов
(бактерий, плесеней, дрожжей, актиномицетов).
Изучение подвижности бактерий.
Учебная цель работы: Ознакомиться с морфологией грибов и техникой их микроскопического исследования. Ознакомиться с исследованием на подвижность бактерий.
Материальное обеспечение: культуры актиномицетов, плесневых грибов (мукор, ризопус, спергиллус, пенициллиум, молочная плесень, кладоспориум, катенулярия, альтернария); пробирки со взвесью дрожжей; предметные и покровные стекла; препаровальные иглы, смесь равных объемов этилового спирта и глицерина; микроскопы; стекла с луночкой; культура сенной палочки; молочнокислые палочки; вазелин; бактериальные петли; иммерсионное масло.