- •Лабораторная работа № 1 Правила работы и оборудование микробиологической лаборатории. Знакомство с устройством микроскопа.
- •Ход работы
- •Устройство микроскопа
- •Организация и методика выполнения работы Актиномицеты
- •Изучение подвижности бактерий
- •Лабораторная работа № 3 Способы окрашивания микроорганизмов. Определение основных форм бактерий
- •Организация и методика выполнения работы
- •Лабораторная работа № 4 Питательные среды и их приготовление.
- •Организация и методика выполнения работы
- •Порядок выполнения работы: Приготовить 100 мл мпа:
- •Классификация питательных сред
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 5 Подготовка и основные методы стерилизации сред, посуды, инвентаря
- •Организация и методика выполнения работы
- •Вопросы для самоконтроля.
- •Лабораторная работа № 6 Влияние условий внешней среды: температуры, влажности, рН среды и др. Факторов на развитие микроорганизмов.
- •План проведения работы.
- •Организация и методика выполнения работы.
- •4. Влияние осмотического давления на развитие микроорганизмов ,
- •Лабораторная работа № 7, 8 Микроорганизмы, вызывающие различные виды брожения .
- •Ход урока.
- •Спиртовое брожение.
- •Проведение занятия.
- •Проведение задания.
- •Возбудители гниения и их культивирование (картофельная палочка, сенная палочка, палочка Протея и др.)
- •Организация и методика выполнения работы .
- •1. Аэробные гнилостные микробы :
- •2. Факультативно - анаэробные гнилостные микробы :
- •3. Анаэробные гнилостные микробы :
- •Лабораторная работа № 10 Посев микроорганизмов почвы, воздуха и воды для санитарно-бактериального исследования.
- •Определение титра двухэтапным бродильным методом
- •1 Этап:
- •2 Этап:
- •Определение микробного числа воды.
- •Определение титра Coli способом мембранных ультрафильтров.
- •3. Определение микробного числа воздуха.
- •4. Посев микроорганизмов почвы.
- •Вопросы для закрепления:
- •Лабораторная работа № 11 Санитарно-бактериологические исследования почвы, воздуха, воды.
- •Организация и методика выполнения работы
- •1. Подсчет количества микроорганизмов в посевах воды.
- •Определение титра Coli методом мембранных ультрафильтров.
- •Подготовка мембранных фильтров к анализу
- •Подсчет количества микроорганизмов в водопроводной воде.
- •Подсчет количества микроорганизмов в посевах воздуха.
- •Приготовление почвенной болтушки для посева микроорганизмов.
- •Подсчет количества микроорганизмов в почве.
- •Вопросы для закрепления:
Лабораторная работа № 11 Санитарно-бактериологические исследования почвы, воздуха, воды.
Учебная цель работы: привить навыки санитарно-бактериологических исследований почвы, воздуха и воды, подсчета выросших колоний микроорганизмов.
Материальное обеспечение: чашки Петри; пинцеты; пробы воды; микроскоп; бактериологические петли; лупа; предметные стела; покровные стекла; набор красителей для окраски по Грамму.
Организация и методика выполнения работы
1. Подсчет количества микроорганизмов в посевах воды.
После проведения посевов почвы, воздуха и воды, а также термостатировая посевов, проводим подсчет выросших колоний микроорганизмов, делаем мазки из наиболее характерных колоний и приступаем к подсчету, микроскопированию.
Отдельно подсчитывают колонии аэробных микроорганизмов на поверхности агара и анаэробных в его толще. Если колоний в чашке выросло много, можно для подсчета воспользоваться автоматическим счетчиком. Можно просчитать колонии в 20 квадратах сетки и определив среднее арифметическое количество колоний в 1 см2 пересчитать на всю чашку по формуле:
М= Пr2n
где n - количество колоний бактерий в 1 см 2;
Пr2- площадь чашки Петри.
Колонии просчитывают в 2 чашках с посевом одной пробы воды и выводят среднее арифметическое. Определение микробного числа этим способом позволяет выявить лить те микроорганизмы, которые используют дня питания органический углерод и азот, и способны расти при указанных температурах. В основном это аэробные и факультативно-анаэробные гнилостные микроорганизмы. Могут быть обнаружены колонии актиномицетов, плесневых и дрожжевых грибов. Но этим способом совершенно не выделяются облигатно-анаэробные формы и микроорганизмы, способные к хемо- и фотосинтезу.
Определение титра Coli методом мембранных ультрафильтров.
Титр Coli - количество воды, выраженное в мл. в котором обнаружена 1 бактерия Coli. Титр Coli - показатель фекального загрязнения воды. Для водопроводной воды он не менее 300, для воды таких городов как Москва - не менее 500 , для воды родников грунтовых вод Титр Coli не менее 100, а для чистых открытых водоемов не менее 100. Определение Титр Coli удобно проводить методом мембранных ультрафильтров, этот метод дает возможность получить результат через 48 часов после высева воды, экономя среды. Метод учета бактерий - Coli на мембранных ультрафильтрах разработан Барсовым на Рублевской водопроводной станции.
Мембранные ультрафильтры представляют собой нитроцеллюлозные пленки. Фильтры выпускают 5 номеров. Каждый номер имеет определенный диаметр пор.
Характеристика мембранных ультрафильтров
№ фильтра |
Средняя скорость фильтрования 500 мл. воды |
Средний d пор в мк. |
1 |
9,0 |
0,35 |
2 |
4,5 |
0,50 |
3 |
2,5 |
0,70 |
4 |
1,2 |
0,90 |
5 |
0,5 |
1,20 |
Все 5 номеров ультрафильтров задерживают содержащихся в воде бактерий. Для санитарного анализа воды наиболее пригодны фильтры № 3. При наличии в воде большого количества взвешенных частиц, воду пропускают через предварительный мембранный фильтр с диаметром пор 5 мк.