Вынимать камеру из установки, для промывания и других действий можно только к крайних случаях, лучше всего согласовать с преподавателем!

После промывания полезно проконтролировать чистоту камеры микроскопированием - на сухих рабочих поверхностях не должно быть видно посторонних частиц, а сетка должна быть четко видна (иногда студенты ее не видят из-за неправильно настроенного освещения микроскопа.

Поэтому перед началом работы также надо:

1. Настроить правильно освещение микроскопа.

2. Произвести градуировку окулярной шкалы или сетки.

2.Перед началом измерений камеру подготавливают с учетом специфики объекта.

Если предстоит измерять подвижность клеток крови, то перед измерением целесообразно дно камеры и нижнюю грань покровного стекла промыть безтромбоцитарной плазмой. Названная процедура устраняет адгезию клеток к стеклянным поверхностям плоского капилляра приблизительно на 20 минут. Для более длительных измерений одного образца камеру следует силиконировать. (Аэрозольный баллончик для силиконирования находится у преподавателя. Предмет довольно дифицитный, цена 1 баллончика - около 50$ ).

Если предстоит работать со сперматозоидами, то вместо безтромбоцитарной плазмы крови, нужно использовать плазму спермы разбавленную изотоническим раствором хлористого натрия (разбавление в 2-5 раз).

При работе с дрожжами - использовать раствор белка (1%,годится любой доступный) или силиконировать.

При работе с одноклеточными водорослями обработка не нужна.

3.Устанавливают покровное стекло и прижимают его пластинами (14).Если имеется возможность " притирания" покровного стекла до появления колец Ньютона. то лучше всего так и сделать.

4. Камеру, включая канавки и колодцы заполняют электролитом, в котором будет проводиться измерение. Заполнение нужно провести тщательно, до образования мениска в каждом углублении. Переполнять камеру не рекомендуется.

5. На поверхности между поперечными канавками с измерительными электродами нанести по капле (0.1 - 0.2мл) изучаемой суспензии клеток. Через 20 - 30 секунд суспензия окажется в измерительном плоском капилляре, вследствие эффекта капиллярности.

Если камера излишне силиконирована или использовано излишне другое антиадгезионное покрытие, то эффект капиллярности может исчезнуть. Заполнять камеру в этом случае надо, сняв покровное стекло.

Концентрацию суспензии выбирают заранее - так чтобы удобно было наблюдать за каждой клеткой в отдельности. Но если слишком разбавить суспензию - клеток вовсе не будет. А ежели мало разбавишь - то так густо будет, как в толпе, какой уж тут индивидуальный подход.

6.Тубус микроскопа устанавливают на уровень требуемого " оптического среза" и дожидаются успокоения системы 50 - 70 с.

Требуемый оптический срез - тот уровень в капилляре, где клетки могут двигаться свободно в любую сторону, а при смене полярности напряжения на электродах, подвижность клеток меняется (по абсолютной величине) наименьшим образом. Все это легко находится экспериментально.

Рабочая зона в капилляре лежит примерно в середине его зазора.

7. После успокоения системы, глядя в микроскоп выбирают какую либо клетку для наблюдения и подают необходимое напряжение на камеру нажатием кнопки "ПУСК" (3Б). При этом автоматически включается таймер.