7.3.5.1.Определение диастазной активности
Диастазная (амилазная) активность очень низка у некоторых видов натурального меда (белоакациевый, кипрейный, клеверный, липовый, подсолнечниковый). При нагревании меда выше 50°С и длительном хранении (более года) диастаза частично или полностью инактивируется. Фальсификация меда также ведет к ослаблению активности фермента.
Определение активности диастазы основано на способности этого фермента расщеплять крахмал на амилодекстрины. Количественно данный показатель выражается диастазными числами (ед. Готе), которые обозначают количество мл 1%-ного раствора крахмала, расщепляемого диастазой (амилазой), содержащейся в 1г меда (в пересчете на сухие вещества) в течение одного часа при температуре 40°С до веществ, не окрашиваемых йодом в синий цвет.
В 11 пробирок разливают 10%-ный раствор меда и другие компоненты согласно таблице 9.
Таблица 9. Компоненты для определения диастазного числа, мл
Компо- ненты |
Номер пробирок |
||||||||||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
|
Раствор меда,10%,, см³ |
1,0 |
1,3 |
1,7 |
2,1 |
2,8 |
3,6 |
4,6 |
6,0 |
7,7 |
11,1 |
15,0 |
Дист.вода, см³ |
9,0 |
8,7 |
8,3 |
7,9 |
7,2 |
6,4 |
5,4 |
4,0 |
2,3 |
- |
- |
№аCl, 0,58%, см³ |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
1% р-р крах- мала, см³ |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
5,0 |
Водяная баня при температуре ( 40±1°С) |
|||||||||||
Раствор йода |
по одной капли |
||||||||||
Диастазное число, ед Готе |
50,0 |
38,0 |
29,4 |
23,8 |
17,9 |
13,9 |
10,9 |
8,0 |
6,5 |
4,4 |
3,3 |
Пробирки закрывают пробками, тщательно взбалтывают и ставят в водяную баню на час при 40°С. Затем в охлажденные до комнатной температуры пробирки приливают по одной капле раствора йода.
В пробирках, где крахмал остался нерасщепленным, содержимое окрашивается в синий цвет - диастазы нет. При содержании небольшого количества диастазы содержимое приобретает фиолетовый цвет, при большом количестве -темноватый.
Отмечают последнюю со слабоокрашенным
содержанием пробирку перед рядом
обесцвеченных. Диастазное число
рассчитывают путем деления 5 мл (количество
взятого 1% -ного раствора крахмала) на
массу чистого меда, содержащегося в
данной пробирке. Например, слабоокрашенная
пробирка перед
рядом обесцвеченных оказалась пятой
по счету, раствор в ней содержит 0,28
г чистого меда; диастазное число будет
равным 5 :0,28 = 17,85