
- •Лабораторное занятие 7, 8, 9.
- •Бактериологический анализ проводят в следующих случаях:
- •Отбор проб:
- •Общие методы исследования.
- •Подготовка образцов к исследованию и проведение:
- •Чувствительность к сибиреязвенному фагу:
- •Феномен капсулообразования:
- •Постановка реакции агглютинации
- •Фаготипизирование
- •Выявление бактерий рода Proteus
- •Выделение бактерий рожи свиней, листериоза и пастереллеза
- •Выявление бактерий кокковой группы
- •Методы обнаружения анаэробов
- •Методы обнаружения микобактерий
- •Список предлагаемых источников :
- •Контрольные вопросы по теме «Бактериологическое исследование мяса»
- •Биологические исследования
Выявление бактерий рода Proteus
Сущность метода заключается в изучении морфологических, культуральных, ферментативных свойств этих бактерий.
Наличие на средах в чашках Петри вуалеобразного налета (Н-форма), при микроскопии которого обнаруживают полиморфные грамотрицательные подвижные палочки, указывает на присутствие вульгарного протея. Для подтверждения наличия протея (Н-форма) производят посев в конденсационную воду свежескошенного агара (способ Шукевича). Присутствие изолированных колоний средней величины, нежных, полупрозрачных, с розоватым центром, свидетельствует о наличии нероящихся О-форм протея. При микроскопии этих колоний обнаруживают грамотрицательные неподвижные палочки. Для подтверждения наличия О-форм протеуса производят посев на агар Плоскирева. О-форма протеуса образует на этой среде прозрачные колонии с характерным запахом. Среда вокруг колоний приобретает желтый цвет в результате ее подщелачивания. Старые колонии нередко мутнеют и принимают белую окраску.
Выделение бактерий рожи свиней, листериоза и пастереллеза
Если в мазках, приготовленных из мелких прозрачных колоний, обнаруживают коккообразные грамотрицательные палочки, расположенные в виде диплококка, или цепочки из коротких палочек, то исследование проводят на пастереллез. Испытуемую культуру вводят внутривенно кролику, внутрибрюшинно морской свинке или белой мыши. При наличии возбудителя животные обычно погибают через 24-48 ч. Из органов павших животных готовят мазки-отпечатки, окрашивают их краской Муромцева в течение 30 с и микроскопируют. Диагностическое значение при этом имеет обнаружение в мазках биполярно окрашенных овоидных палочек.
Существует метод ускоренной идентификации возбудителей рожи свиней, листериоза, сальмонеллеза с помощью флюоресцирующих (люминесцирующих) антител. Сущность метода заключается в определении способности антител иммунных сывороток при соединении через карбомидные группы со специальными красителями (флюорохромами) вступать в специфическую связь с соответствующими антигенами. Образующийся при этом комплекс антиген-антитело флюоресцирует, и его легко можно обнаружить при люминесцентной микроскопии. Применение метода люминесцирующих сывороток для идентификации выделенной культуры микробов ускоряет исследование, так как исключает в ряде случаев необходимость определения культуральных, ферментативных, антигенных и других свойств микроорганизмов.
Таблица 2. Морфологические и культуральные свойства возбудителей рожи свиней, листериоза и пастереллеза
Показатели |
Характеристика бактерий |
||
рожи свиней |
листериоза |
пастереллеза |
|
Рост на МПА |
Мелкие, росинчатые прозрачные колонии |
Мелкие, росинчатые прозрачные колонии, через 2-3 сут. - помутнение колоний |
Мелкие, росинчатые, слегка опалесцирующие, прозрачные колонии; через 2-3 сут. приобретают серовато-белый цвет |
Рост на МПБ |
Слабое помутнение, поднимающийся при встряхивании осадок |
Слабое помутнение с выпадением слизистого осадка, при встряхивании которого образуется косичка |
Равномерное помутнение с осадком |
Мазки-отпечатки из материала |
Неспорообразующие, тонкие, прямые, или слегка изогнутые палочки, иногда нити |
Неспорообразующие короткие палочки с закругленными концами; расположены поодиночке, попарно, в форме римской цифры V или в виде палисада |
Неспорообразующие мелкие, биполярно окрашивающиеся палочки |
Мазки из культуры |
Короткие, прямые или изогнутые палочки; при хроническом течении инфекции — короткие, тонкие палочки и удлиненные цепочки и нити |
Короткие, прямые, овоидные палочки, иногда почти кокки; располагаются кучками или поодиночке |
Мелкие палочки, биполярность почти всегда отсутствует |
Окраска по Граму |
Положительная |
Положительная |
Отрицательная |
Подвижность |
Неподвижные |
Подвижны лишь в молодой 6-20-часовой культуре, выращенной при температуре 20-22°С |
Неподвижны |
Проба на каталазу |
Отрицательная |
Положительная |
Не ставят |