Литература

1. Глазко В.И. Генетические маркеры лошадей // Сельскохозяйственная биология. - 1999. - № 6. - С.38-46.

2. Дубровская Р.М. и др. Трансферрины крови и плодовитость // Коневодство и конный спорт. – 1978. - № 5. - С.19.

3. Дубровская Р.М. и др. Контроль происхождения лошадей //Коневодство и конный спорт. – 1981. - № 1. - С. 32.

4. Дубровская Р.М., Стародумов И.М. Аллелофонд локусов трансферрина, альбумина, эстеразы и групп крови лошадей 10 пород, разводимых в СССР // Резервы повышения эффективности коневодства и коннозаводства: Сб. науч. трудов ВННИК, 1987. - С 55-69.

5. Дубровская Р.М., Стародумов И.М. Отечественные породы лошадей // В кн: «Генетические ресурсы сельскохозяйственных животных: редкие и исчезающие отечественные породы», - М.: ВО «Наука», 1992. - С.122-130.

6. Масасина Е.В. и др. Генетический полиморфизм альбумина и трансферрина у лошадей орловской рысистой породы // Перспективы коневодства России в ХХI веке: Тез. докл. науч.-практ. конференции и коорд. совещ., посвящ. 70-летию ВНИИ коневодства. - Ч.2. - Дивово, 2000, С.55-57.

7. Стародумов И.М. Использование полиморфных белков, ферментов и групп крови для анализа генетической структуры пород и повышения хозяйственно-полезных качеств лошадей // Автореф. дисс. …. д.с.-х.н. - М.: 1996. - 34 с.

8. Храброва Л.А. Генетический полиморфизм белков и ферментов крови у лошадей некоторых пород и возможности их использования в селекции // Автореф. дисс. … к.с.-х.н. - М.: 1980. -16 с.

Генетические особенности аллелофонда вятской лошади

Зайцев А. М., Храброва Л. А, к.с.-х.н.

Всероссийский научно-исследовательский институт коневодства

391105, Рязанская обл., Рыбновский р-н, п/о Институт коневодства

В настоящее время проблема сохранения генофондов локальных пород лошадей становится особенно актуальной. Ряд местных пород, разводящихся только на территории России, находятся под угрозой исчезновения. С целью их сохранения МСХП РФ, РАСХН И РАН была создана Федеральная программа «Сохранение генофонда малочисленных пород сельскохозяйственных животных на 1995-2005 г.г.». Для соответствующего выполнения такого рода программ сохранения необходимы глубокие исследования их генетических особенностей и проведение мониторинга генетического разнообразия. Для этих целей наиболее пригодно генетическое маркирование. Генотипирование лошадей по антигенам групп крови, электрофоретическим вариантам белков и ДНК-последовательностям является базой генетического мониторинга, который позволяет оценить уровень генетического разнообразия и его изменения в популяциях лошадей. Изучение генетических особенностей распределения аллельных частот, появляющихся под влиянием факторов отбора представляет интерес и с точки зрения изучения филогенетических связей между породами.

Одной из малочисленных аборигенных пород севера России является вятская лошадь, выведенная методами народной селекции на севере Удмуртии. «Вятка» входит в состав группы северных пород лошадей и, по мнению ряда исследователей, имеет зоологическую основу, характерную для азиатской породной группы. Существуют разные мнения о происхождении вятской лошади. Несомненно, что в ее формировании использовались улучшающие породы. К сожалению, сведения о влиянии других пород на вятскую не документированы и исследователи приводят целый ряд пород, которые могли использоваться как улучшатели. Однако, несмотря на все это, вятские лошади сохранили свое генетическое своеобразие. Вятская порода, ранее широко распространенная, встречается сейчас также в Кировской и Костромской областях. Поголовье вятской лошади очень невелико, но достаточно для возрождения. К 1996 году было выявлено около 200 лошадей в типе «вятка» в 20 хозяйствах, самое типичное поголовье сосредоточено в колхозе «Колос» (Бобкова Н.Ф., 1996).

Вятские лошади описываются как сравнительно некрупные, приземистые, с небольшой головой. Масть вятской лошади - высокоустойчивый признак, преобладает саврасая масть с встречающимися атавистическими признаками, характерными для аборигенных степных и лесных пород («ремень» на спине, частичная зеброидность, «крылья», «налеты»), однако встречаются типичные вятки и других мастей. Лошади отличаются спокойствием в работе, выносливостью, быстротой, энергичностью, неприхотливостью, хорошо адаптированы к местным климатическим и кормовым условиям (в частности, к глубокому снеговому покрову). Рекорды лучших вятских жеребцов, установленные в прошлом, указывают на большие потенциальные возможности совершенствования рабочих качеств. Вятские лошади менее подвержены заболеваниям, отличаются большей плодовитостью и выживаемостью, чем лошади других пород, содержащиеся в одинаковых с ними условиях. Эти характеристики позволили вятской породе в прошлом стать популярной рабочей и военной обозной лошадью и послужили предпосылкой того, что уже в XVII веке вятки активно вывозилась из мест разведения.

Новое возрождение вятской породы началось с середины 80-х годов. В 1994-1995 г.г. утверждены и изданы «Инструкция по бонитировке лошадей вятской породы», «Каталог племенных вятских лошадей Удмуртии, Кировской и Костромской областей».

По просьбе Министерства сельского хозяйства Удмуртии в 2000-2002 гг. лабораторией иммуногенетики ВНИИК было проведено тестирование производящего состава (n=124) вятских лошадей из ряда хозяйств Удмуртии («Колос», «Чутырский», «Россия», «Коротай») и одного хозяйства Кировской области («Гордино») по 8 полиморфным системам крови, включая группы крови А, D, К, белки и ферменты (Es, Tf, Alb, PGD, Ca). Также было проведено определение полиморфизма RAPD-маркеров ДНК с праймерами UBC-85 и UBC-126. Определение полиморфных типов структурных генов - трансферрина, альбумина и сывороточной карбоксилэстеразы - проводили методом горизонтального электрофореза в крахмальном геле по общепринятым методикам (Дубровская Р.М., 1986). Эритроцитарные антигены тестировали с помощью моноспецифических сывороток-реагентов, изготовленных в лаборатории иммуногенетики. Анализ полиморфизма последовательностей ДНК проводился по методике E. Bailey, T. L. Lear, 1994, в адаптациях Г. Е. Сулимовой, 1999, и В. И. Глазко, 1996. На основании полученных данных был проведен генетико-статистический анализ популяции вятской лошади, результаты которого представлены в таблице.

Таблица

Распределение аллельных частот пяти локусов белков и

ферментов крови в субпопуляциях лошадей вятской породы

Локус	Аллель	Хозяйство
		Удмуртия				Кировская область
		«Колос»	«Чутырское»	«Россия»	«Коротай»	«Гордино»
		n=59	n=20	n=9	n=5	n=31
Tf	D	0,1356 0,0315	0,0250 0,0247	0,1111 0,0741	0,1000 0,0949	0,0000
	F	0,5254 0,0460	0,7000 0,0725	0,6111 0,1149	0,7000 0,1449	0,5000 0,0635
	H	0,0509 0,0202	0,2250 0,0660	0,1111 0,0741	0,0000	0,0000
	O	0,1271 0,0307	0,0000	0,0556 0,0540	0,1000 0,0949	0,0484 0,0273
	R	0,1271 0,0307	0,0250 0,0247	0,0556 0,0540	0,1000 0,0949	0,4516 0,0632
Alb	A	0,2457 0,0396	0,2750 0,0706	0,3889 0,1149	0,3000 0,1449	0,2097 0,0517
	B	0,7203 0,0396	0,7250 0,0706	0,6111 0,1149	0,7000 0,1449	0,7903 0,0517
Es	F	0,1695 0,0345	0,3250 0,0741	0,1111 0,0741	0,0000	0,3065 0,0586
	G	0,1356 0,0315	0,1250 0,0523	0,0556 0,0540	0,2000 0,1265	0,0807 0,0346
	I	0,6610 0,0436	0,5500 0,0787	0,8333 0,0879	0,8000 0,1265	0,6129 0,0619
Ca	F	0,0170 0,0119	0,0000	0,0000	0,0000	0,0161 0,0160
	L	0,0763 0,0244	0,0000	0,0000	0,0000	0,0484 0,0273
	I	0,9067 0,0268	1,0	0,9444 0,0540	1,0	0,9355 0,0312
	O	0,0000	0,0000	0,0556 0,0540	0,0000	0,0000
PGD	F	0,8136 0,0359	1,0	0,8333 0,0879	0,9000 0,0949	0,5645 0,0630
	S	0,1864 0,0359	0,0000	0,1667 0,0879	0,1000 0,0949	0,4355 0,0630

Распределение аллельных частот локуса альбумина было сходно у субпопуляций всех исследованных хозяйств, незначительное снижение частоты аллеля Al^A было отмечено в кировской субпопуляции.

При тестировании вятских лошадей в локусе трансферрина выявлено 5 аллелей - Tf^D, Tf^F, Tf^H, Tf^O, Tf^R. Преобладающим являлся аллель Tf^F, частота встречаемости которого оказалась минимальной в популяции хозяйства «Колос» (0,5431), а в среднем для удмуртской популяции – 0,0604, и генотип Tf^FF (в среднем 35,1%), другие аллели представлены в выборке с близкими частотами (Tf^D - 0,1064, Tf^H - 0,0958, Tf^O - 0,0958, Tf^R - 0,0958). Распределение аллельных частот изученных локусов между кировской и удмуртской популяциями значительно отличалось. Так, в кировской популяции было представлено всего три аллеля локуса трансферрина из пяти, обнаруженных у вятских лошадей Удмуртии, причем суммарная частота двух из них составила 0,9516.

В локусе эстеразы у вятской лошади выявлено три аллеля - Es^F, Es^G и Es^I. Преимущественное распространение имел аллель Es^I, частота которого колебалась от 0,5500 («Чутырский») до 0,8333 («Россия») и в среднем для всей популяции составляла 0,6809. Частоты аллелей Es^F и Es^G для популяции в целом соответственно равны 0,1862 и 0,1330. Следует отметить высокую частоту аллеля Es^F (0,3250) в колхозе «Чутырский» и низкую частоту аллеля Es^G (0,0556) в колхозе «Россия». Поголовье хозяйства «Гордино» отличалось относительно высокой частотой аллеля Es^F и сниженной – аллеля Es^G.

В локусах эритроцитарных ферментов также прослеживалась определенная дифференциация между субпопуляциями. В локусе карбоангидразы наибольшее сходство отмечено между субпопуляциями хозяйств «Колос» и «Гордино», обладающих наибольшим поголовьем. Среди лошадей хозяйства «Россия» выявлен аллель Са^L, не представленный у других лошадей вятской породы. Поголовье двух хозяйств Удмуртии оказалось полностью гомозиготным по этому локусу.

Генетическая система 6-фосфоглюконатдегидрогеназы представлена двумя аллелями – PGD^F и PGD^S. Частота аллеля PGD^F у лошадей Удмуртии колебалась от 0,8136 до 1,0. Кировская субпопуляция отличается от удмуртской пониженной частотой аллеля PGD^F (0, 5645)

Аллелофонд по группе крови А был характерным для местных пород и значительно отличался от такого у заводских пород лошадей, в том числе и тех, которые предположительно участвовали в улучшении вятской лошади. Выявлено 3 варианта эритроцитарных антигенов группы крови А: А^-, А^a, А^d. Тип А^ad встречался с частотой более 59 %, тип А^d - 33,8%, при этом антиген А^- встречался с низкой частотой, а тип А^aа не был представлен. Сравнительный анализ генотипов по группе крови D выявил преобладание редкого аллеля D^ad - 0,3716 и генотипа D^ad/de - более 27 %, что также характерно для аборигенных пород. Дифференциация субпопуляций по системам групп крови была выражена в меньшей степени, общей тенденцией является повышение уровня генетической гетерогенности в больших выборках.

На уровне молекулярно-генетических маркеров ДНК при сравнении спектров распределения продуктов амплификации удмуртской и кировской субпопуляций выявлены четко наблюдаемые различия, проявляющиеся в неравномерном распределении фрагментов амплифицированной ДНК разной длины.

Между субпопуляциями разных хозяйств отмечены существенные различия как по наличию аллелей, так и по распределению аллельных частот практически всех изученных локусов. В наибольшей степени дифференциация проявилась при сравнении удмуртской и кировской популяций. Интересно, что наличие дифференциации по промерам между этими группами вятских лошадей было отмечено еще в 50-е годы прошлого столетия.

Наиболее типичные вятки хозяйств «Колос» и «Гордино» имели самую высокую полиморфность практически всех исследованных локусов.

Полученные результаты позволяют утверждать, что аллелофонд вятских лошадей имеет оригинальную генетическую структуру, в целом характерную для аборигенных пород, а порода – достаточно высокий уровень полиморфизма.

Для поддержания генетического разнообразия в этой малочисленной локальной породе необходимо разработать научно обоснованную программу сохранения генофонда, основанную на результатах генетического тестирования с использованием биохимических и ДНК-маркеров и систематическом проведении генетического мониторинга.

ЛИТЕРАТУРА

1. Генетические ресурсы сельскохозяйственных животных в России и сопредельных странах//Составители Л. К. Эрнст, Н. Г. Дмитриев, И. А. Паронян.–С.-Пб.: ФАО/ЮНЕП и РАСХН.–1994.–471 с.

2. Книга о лошади//Под ред. С. М. Буденного.–М.–Гос. изд-во с/х литературы.–1952.–т. 1.–608 с.

3. М. В. Костюченко, И. Г. Удина, А. М. Зайцев и др. ДНК-технологии для оценки генетического разнообразия пород лошадей отечественной селекции//Сельскохозяйственная биология.–2001.–№ 6.–С. 29-33.

4. Методические рекомендации по использованию иммуногенетических маркеров для оценки изменений генетической структуры популяций (пород) лошадей.–Дивово, 1995.–33 с.

5. Столповский Ю. А. Консервация генетических ресурсов сельскохозяйственных животных: проблемы и принципы решения.–М. –1997–109 c.

6. Храброва Л. А., Зайцев А. М. Оценка вятской лошади удмуртской популяции// Тез. докл. научно-практ. конф. «Перспективы коневодства России в XXI веке». – ч. 2.–Дивово, 2000.–С. 70-73.

7. L. A. Khrabrova, A. M. Zaitcev The genetic structure of Vyatka horse populations//XXVIII Intern. Conf. on Animal Genetics ISAG.–Gettingen.–2002.–p. 109.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛИМОРФНЫХ БЕЛКОВ КРОВИ

ПРИ СЕЛЕКЦИИ МЕЗЕНСКИХ ЛОШАДЕЙ

НА ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНЫЕ СПОСОБНОСТИ

Вдовина Н.В.

Архангельский научно-исследовательский институт сельского хозяйства

163059, г. Архангельск, ул. Ильича, д. 43

Воспроизводительная способность лошадей является одним из важных показателей в селекционно-племенной работе с любой породой.

Воспроизводство в условиях Крайнего Севера сопряжено с трудностями приспособительного характера. Значительные колебания зимних и летних температур, большая продолжительность тёмного периода времени, краткосрочность пастбищного сезона и возможности восполнить запасы организма требуют от животных высоких адаптационных способностей. Микроэволюция лошадей местной породы Архангельской области – мезенской - на протяжении многих столетий способствовала созданию массива крепких, выносливых животных.

Лошади мезенской породы имеют хорошие воспроизводительные способности. У жеребцов наблюдается высокий процент зажеребляемости – 86,4 %. Кобылы также имеют высокий процент зажеребляемости (88,7 %) и благополучной выжеребки (91,2 %).

В коневодстве за последние годы отмечается значительное продвижение в области иммуногенетики. В частности изучена связь и выявлена зависимость между воспроизводительными способностями и гетерогенностью воспроизводящего состава по полиморфным белкам крови, что отмечается многими авторами (Дубровская Р.М. и др., 1982; Нехорина Е.Е. и др., 2000; Купцова Н.А. и др., 2001) .

В связи с этим нами были проведены исследования оплодотворяющей способности мезенских жеребцов разного уровня гетерозиготности по локусам полиморфных белков - трансферрина, альбумина, эстеразы. Репродуктивные показатели кобыл изучались по локусу трансферрина.

В исследование взяты 154 образца крови мезенских лошадей из 5 хозяйств Мезенского района.

Оплодотворяющая способность жеребцов мезенской породы (n = 33) определена по результатам 578 покрытий 121 кобылы за период с 1993 по 2001 годы. Результаты покрытий кобыл взяты из племенных карточек.

В зависимости от степени гетерозиготности по аллелям отдельных локусов полиморфных белков крови, жеребцы были разбиты на две группы: гомозиготные и гетерозиготные. Об оплодотворяющей способности производителей каждой группы судили по зажеребляемости кобыл.

Показатели оплодотворяющей способности мезенских жеребцов в зависимости от уровня их гетерозиготности по аллелям локусов трансферрина, альбумина и эстеразы приведены в таблице.

Таблица

Оплодотворяющая способность мезенских жеребцов в зависимости от уровня гетерозиготности полиморфных белков крови

Локус	Уровень гетерозиготности	Число жеребцов	Число покрытий	Оплодотворяющая способность, в %
Tf	гомозиготные	9	184	94,6
	гетерозиготные	24	394	96,0
Al	гомозиготные	20	342	96,2
	гетерозиготные	13	236	94,5
Es	гомозиготные	11	154	94,8
	гетерозиготные	22	424	95,8

Как видно из таблицы, гетерозиготные по локусам трансферрина и эстеразы жеребцы незначительно превосходят по оплодотворяющей способности гомозиготных производителей, а в локусе альбумина гомогенные жеребцы превосходят гетерогенных на 1,7 %. В целом же все жеребцы имеют высокую оплодотворяющую способность (94,5 – 96,2 %), которая, как подтвердили наши исследования, не связана с уровнем их гетерозиготности по локусам полиморфных белков.

Воспроизводительную способность кобыл мезенской породы определяли по показателям зажеребляемости и благополучной выжеребки.

Сравнивались показатели плодовитости кобыл при различных сочетаниях, с учётом особенностей родительских пар по трансферриновому локусу. Все варианты подборов объединили в три группы. В первую группу вошли родительские пары, в которых оба родителя гомозиготны по локусу трансферрина. Вторая группа включала в себя родительские пары, в которых один из родителей был гомозиготным, а второй из родителей – гетерозиготным. В третьей группе и кобылы и жеребцы были гетерозиготны по локусу трансферрина.

Анализ проведённых иследований показал, что во всех трёх группах уровень зажеребляемости кобыл мезенской породы очень высокий и варьирует в пределах 94,0 – 96,4 %. Однако наиболее высокий выход молодняка отмечен в варианте, когда кобыла и жеребец гетерозиготны по Tf (89,2 %). В сочетании гомозиготных пар выход молодняка самый низкий и составляет 80,0 %.

Варианты подборов в зависимости от вероятности рождения гомозиготного или гетерозиготного по аллелям трансферринового локуса потомства были объединены в четыре группы.

В первом варианте подбора весь полученный молодняк был гомозиготный. Второй вариант подбора давал равное количество гомозиготных и гетерозиготных по локусу трансферрина жеребят. От подборов третьей группы получали 25 % гомозиготных и 75 % гетерозиготных жеребят. В четвёртой группе рождались только гетерозиготные животные.

Результаты исследований показали, что наименьший процент живых жеребят (79,2 %) приходится на вариант подбора, когда от кобыл и жеребцов рождается только гомозиготный по трансферрину приплод, хотя процент зажеребляемости кобыл в данной группе и высок (93,0 %). Лучшие показатели по выходу жеребят (90,5 %) отмечены при подборах, в которых 25 % приходится на гомозиготный приплод и 75 % - на гетерозиготный. Зажеребляемость кобыл в этой группе составила 94,2 %. Деловой выход жеребят во второй и четвёртой группах практически одинаков и составил 85,4 % и 85,0 % соответственно.

Результаты проведенных исследований позволяют сделать вывод о возможности использования генетических маркеров, в частности локусов полиморфных белков крови, при селекции лошадей на воспроизводительные способности.